AIBP通过上调mTORC1/SREBP-2信号通路抑制脑动脉粥样硬化的作用和机制

Atherosclerosis is the most important cause of ischemic cerebrovascular disease. This research is to promote the function of high density lipoprotein cholesterol (hdl-c), increase its ability to remove cholesterol, give full play to its anti-atherosclerosis function. Previous studies have suggested that apolipoprotein A-I binding protein (AIBP) can enhance cholesterol efflux, mitigate the development of atherosclerosis and decrease atherogenesis in the aortic ring, but no study focuses on cerebral vessels, and the mechanism remains unknown. This project will firstly construct the transgenic mice with AIBP overexpressed in vascular endothelial cells and establish mouse cerebral atherosclerosis model, illustrate the effect of AIBP on cerebral atherosclerosis by means of immunofluorescence co-localization, real-time quantitative PCR and protein immune blotting, and secondly, THP-1 cell model will be constructed by overexpressing or knocking down AIBP to explore the mechanism of AIBP in anti-atherosclerosis by regulating the activity of mTORC1/SREBP-2 signaling pathway, and raising the LDL-R level. It is the first time to explore the effects of AIBP on cerebral atherosclerosis and its mechanism from multiple levels, and helps to provide clues for finding new targets and treatment options for ischemic cerebrovascular disease.

动脉粥样硬化是缺血性脑血管病的最主要病因，促进高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的功能，增加其去除胆固醇的能力，充分发挥其抗动脉粥样硬化的功能是本课题研究的重点。前期研究提示，载脂蛋白A-I结合蛋白(AIBP)可促进胆固醇外流，在主动脉中具有抗动脉粥样硬化和抑制血管生成的作用，但脑血管中未见研究，且机制不明。本项目首先构建血管内皮细胞过表达AIBP的转基因小鼠并建立小鼠脑动脉粥样硬化模型，通过免疫荧光共定位、实时定量PCR和蛋白质免疫印迹等手段阐明AIBP对脑动脉粥样硬化的影响；其次通过过表达和敲低AIBP，从THP-1细胞模型深入探讨AIBP通过激活mTORC1/SREBP-2信号通路，上调LDL-R水平进而发挥抗动脉粥样硬化作用的机制。本研究将首次从动物、细胞、分子等多重水平深入探讨AIBP对脑动脉粥样硬化的影响及其调节机制，为寻找缺血性脑血管病新的靶点和治疗方案提供线索。

缺血性脑卒中是最常见的致死和致残原因之一，然而对于错过溶栓期的患者现有的药物治疗手段十分有限，因此深入研究缺血性卒中的发病机制，为创新药物研究提供新的靶标具有重大意义。能量限制已被证明能保护脑缺血损伤，然而其潜在机制尚不清楚。本研究通过大鼠自主进食或间断性禁食3个月，然后进行大脑中动脉闭塞手术。在指定时间点测量体重、梗死体积和神经功能缺损评分；ELISA和qRT-PCR检测细胞因子的分泌和表达；免疫荧光法评价小胶质细胞在体内的活化和血管生成；Westernblotting测定SIRT6、TXNIP和信号分子的蛋白质水平。在体外研究中，建立氧-葡萄糖剥夺/复氧(OGD/R)处理的细胞模型，采用MTT法和试管形成法测定细胞活力和管形成能力；ChIP法检测SIRT6和SIRT6介导的组蛋白3脱乙酰化的染色质占位。我们发现间断禁食或能量限制模拟物改善了脑缺血性脑损伤和小胶质细胞激活，增强了体内血管生成。其机制可能是能量限制介导SIRT6上调，抑制TXNIP进而抑制脑缺血时小胶质细胞的激活和增强血管生成。上述成果为探索脑梗死后缺血性脑损伤和血管新生的分子调节机制，寻找靶向小胶质细胞活化和血管生成信号途径提供了新的生物学靶点或诊断/治疗标志物，或将为缺血性脑卒中治疗提供新思路。

内容获取失败，请点击重试