苛求芽孢杆菌胞内尿酸酶的克隆表达、分子改造和应用

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    30672009
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    28.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    H2602.微生物学检验
  • 结题年份:
    2009
  • 批准年份:
    2006
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2007-01-01 至2009-12-31

项目摘要

尿酸酶是酶法测定血清尿酸含量的关键工具酶和治疗高尿酸血症的理想药物。我们建立的专利方法(ZL03135649.4)测定血清尿酸对血清中其它成分的干扰抗性强,成本低,效率高,但需特殊尿酸酶。筛选发现苛求芽孢杆菌胞内尿酸酶催化效力高,对竞争性抑制剂黄嘌呤不敏感,能满足此专利方法要求。本项目克隆并原核表达此尿酸酶基因,考察表达产物用于此专利方法测定血清尿酸的有效性和可靠性;同源模建获得其三维结构模型,识别位于构象空间表面对催化活性非必需且相距较远的中性氨基酸残基,通过定点突变将这些中性氨基酸突变成半胱氨酸,纯化原核表达的对应突变体;用高分子量聚乙二醇对巯基进行位点特异性修饰,测定聚乙二醇修饰的尿酸酶突变体治疗实验动物高尿酸血症的有效性和安全性;用基因工程生产此尿酸酶和符合预期的突变体。上述研究可获得适用于我们测定血清尿酸含量专利方法的尿酸酶,并为开发治疗高尿酸血症药用尿酸酶奠定基础。

结项摘要

项目成果

期刊论文数量(25)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(1)
专利数量(0)
An integration strategy to estimate the initial rates of enzyme reactions with expanded linear ranges using uricases as models
使用尿酸酶作为模型来估计具有扩展线性范围的酶反应初始速率的整合策略
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    Anal. Chim. Acta
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    廖飞
  • 通讯作者:
    廖飞
不同方法测定黄嘌呤对Bacillus fastidiosus胞外尿酸酶抑制效力的比较
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    重庆医科大学学报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    赵运胜;赵利娜;廖飞;陶佳
  • 通讯作者:
    陶佳
右美沙芬的体外代谢方法研究
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    重庆医科大学学报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    廖飞;袁佩;周岐新;张黎黎;杨贵忠;刘颖菊
  • 通讯作者:
    刘颖菊
Correlation of serum arylesterase activity on phenylacetate estimated by the integrated method to common classical biochemical indexes of liver damage .
积分法测定血清苯乙酸芳基酯酶活性与常见肝损伤经典生化指标的相关性。
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    J Zhejiang Univ Sci B
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    廖飞
  • 通讯作者:
    廖飞
产朊假丝酵母尿酸酶的纯化和特性研究
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    西南大学学报(自然科学版)
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    武文明;曾昭淳;杨小兰;廖飞;李小彦
  • 通讯作者:
    李小彦

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其他文献

终点平衡尿酸酶法与动力学尿酸酶法联用测定尿酸
  • DOI:
    10.1051/0004-6361/201526295
  • 发表时间:
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  • 期刊:
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    --
  • 作者:
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  • 通讯作者:
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  • DOI:
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  • 发表时间:
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  • 期刊:
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  • 影响因子:
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  • 作者:
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  • 通讯作者:
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  • DOI:
    --
  • 发表时间:
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  • 期刊:
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  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    刘冬;龙高波;杨晓兰;蒲军;赵华;廖娟;廖飞
  • 通讯作者:
    廖飞
三维非线性自适应容错导引律设计
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2018
  • 期刊:
    控制理论与应用
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    廖飞;王小蕾;季海波;陈天毅
  • 通讯作者:
    陈天毅
兼性离子修饰亲水磁珠固定化谷胱甘肽-S-转硫酶P1 及其表征
  • DOI:
    10.13550/j.jxhg.20190865
  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    精细化工
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
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  • 通讯作者:
    杨晓兰

其他文献

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季也蒙毕赤酵母尿酸酶和苛求芽孢杆菌尿酸酶最适pH影响因素的比较和应用
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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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