Ath5-/Otx2+ 修饰促OC-RSCs成感光细胞分化及机制研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31071202
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    30.0万
  • 负责人：
    黄小勇
  • 依托单位：
    中国人民解放军第三军医大学
  • 学科分类：
    C0703.细胞增殖及细胞周期
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

感光细胞不可逆损伤导致视觉功能永久丧失。视网膜干细胞（RSCs）替代治疗是解决感光细胞丢失的有效手段，促进RSCs向感光细胞分化是替代治疗的核心问题。基于不同发育阶段来源、不同分化倾向的RSCs具有不同的转录因子组合表达的特点，是否可以通过改变RSCs的转录因子组合，促进RSCs向感光细胞分化呢？本项目以大鼠E12.5胚胎视杯RSCs（OC-RSCs）为模型，以决定感光细胞分化的关键转录因子Ath5和Otx2为切入点，构建Ath5-/Otx2+修饰的OC-RSCs，观察其成感光细胞分化的特性，并通过比较Ath5-/Otx2+修饰前后OC-RSCs的感光细胞分化相关转录因子表达以及膜蛋白表达谱的变化，以"Ath5-/Otx2+修饰-转录因子表达-膜蛋白"为主线，探讨Ath5-/Otx2+修饰促OC-RSCs成感光细胞分化的途径和分子机制。为认识感光细胞的定向分化机制提供新线索。

结项摘要

本基金的研究过程中我们应用了免疫荧光化学分析、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、流式细胞分析、激光共聚焦、Western blot等方法，研究结果验证了我们的假设，膜受体的表达与视杯视网膜干细胞(OC-RSCs)的分化差异有关，不同膜受体的表达可能改变视杯视网膜干细胞的分化倾向。研究发现大鼠ED12.5胚胎视杯细胞和OC-RSCs全表达IGF IRα，而在ED13.5和ED15.5视杯中IGF IRα的表达逐渐减少。此外，实验结果还发现：1、使用SDS-PAGE检测OC-RSCs中otx2的表达，添加IGF IRα抗体处理后OC-RSCs的otx2表达明显增加；2、流式细胞分析、Western-blot检测发现IGF IRα抗体处理后OC-RSCs向Thy1.1方向的分化明显减少，向rhodopsin方向的分化明显增加。研究证实OC-RSCs是RSC向视网膜神经细胞定向分化机制研究的理想的细胞模型，也为视网膜变性性疾病提供了新的治疗线索。

项目成果

期刊论文数量（2）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（3）
专利数量（2）
Diagnostic and Therapeutic Challenges
诊断和治疗挑战
  • DOI：
    10.1097/iae.0000000000003060
  • 发表时间：
    2021-10-01
  • 期刊：
    RETINA-THE JOURNAL OF RETINAL AND VITREOUS DISEASES
  • 影响因子：
    3.3
  • 作者：
    Liu，Wei;Guo，Jingli;Waheed，Nadia K.
  • 通讯作者：
    Waheed，Nadia K.

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  • 影响因子：
    --
  • 作者：
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  • 通讯作者：
    刘光锐
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  • 发表时间：
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  • 影响因子：
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  • 作者：
    黄小勇
  • 通讯作者：
    黄小勇
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    金融教育研究
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    --
  • 作者：
    黄小勇;陈运平
  • 通讯作者：
    陈运平

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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