nNCBT在雌性生殖中作用的研究

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基本信息

  • 批准号：
    30900513
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    20.0万
  • 负责人：
    刘颖
  • 依托单位：
    华中科技大学
  • 学科分类：
    C1101.循环与血液生理
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

SLC4基因家族的钠离子偶联碳酸氢根转运蛋白NCBT-包括生电性的eNCBT和电中性的nNCBT-是机体主要的pH调控蛋白及碳酸氢根离子跨膜运输的主要载体。碳酸氢根对于雌性生殖道中发生的精子获能及顶体反应非常重要，从而对于受精过程起着重要作用。在前期研究中，本人从事了大量关于NCBT分子生理学的工作，包括新cDNA的克隆、表达分析和分子生理学功能的研究。在本课题中，我们将进一步把对NCBT的研究扩展到生殖学领域，探究nNCBT在雌性生殖中的表达及生理学作用。研究内容：（1）在mRNA及蛋白水平上研究nNCBT在雌性生殖道上皮细胞中的表达，及所表达的剪切异构体；（2）以蛙卵为表达体系，以电生理学技术为主要手段，研究nNCBT剪切异构体的分子生理学活性；（3）利用基因敲除小鼠，研究nNCBT与雌性生殖的生理学相关性。本研究的结果将对于认识雌性生殖道碳酸氢根的分泌机制以及雌性不育具有重要意义。

结项摘要

SLC4基因家族的钠离子偶联碳酸氢根转运蛋白NCBT是机体主要的pH调控蛋白及碳酸氢根离子跨膜运输载体。碳酸氢根对于雌性生殖道中发生的精子获能及顶体反应非常重要，从而对于受精过程起着重要作用。本课题主要研究电中性nNCBT在雌性生殖道中的表达及生理学作用。.在课题的研究过程中，我们主要在以下三个方面取得了比较重要的进展：.（1）NCBT的功能基因组学.对编码NBCe1，NBCn1及NBCn2的基因在雌性小鼠生殖道组织及其他组织中表达产物的多样性进行了比较系统的研究，发现并克隆关于NBCe1，NBCn1和NBCn2的一系列新的表达产物异构体形式（在GenBank发表cDNA序列34个），大为丰富了我们关于对这些重要基因的表达产物多样性的认识。.（2）HCO3–转运体在雌性生殖道组中的表达分布及生理学作用.我们通过RT-PCR、蛋白印迹和免疫荧光等技术各种NCBT以及其他重要的HCO3–转运体在雌性生殖道组中的表达与分布，并初步研究了NBCn1在雌性生殖道组织中的表达与雌性生殖周期的关系。.（3）NCBT的结构与功能研究。.我们对克隆的各种不同NBCn1剪接体的活性进行了分析，发现了NBCn1的两个重要的增强转运体活性的结构域。此外，通过与NBCe1的结构和活性的比较分析，我们对决定NBCe1的生电性相关的结构功能元件进行了探索。.通过本课题的工作，我们共发表SCI论文5篇，国内核心期刊论文1篇，会议论文6篇，此外还有一篇Journal of Physiology论文在审稿中。

项目成果

期刊论文数量（6）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（6）
专利数量（0）
Effect of Simultaneously Replacing Putative TM6 and TM12 of Human NBCe1-A with Those from NBCn1 on Surface Abundance in Xenopus Oocytes
同时用 NBCn1 替换假定的人 NBCe1-A TM6 和 TM12 对非洲爪蟾卵母细胞表面丰度的影响
  • DOI：
    10.1007/s00232-012-9421-y
  • 发表时间：
    2012-03-01
  • 期刊：
    JOURNAL OF MEMBRANE BIOLOGY
  • 影响因子：
    2.4
  • 作者：
    Chen, Li-Ming;Qin, Xue;Boron, Walter F.
  • 通讯作者：
    Boron, Walter F.
Cloning and functional characterization of novel variants and tissue-specific expression of alternative amino and carboxyl termini of products of slc4a10.
Slc4a10 产物新变体的克隆和功能表征以及替代氨基和羧基末端的组织特异性表达
  • DOI：
    10.1371/journal.pone.0055974
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    PloS one
  • 影响因子：
    3.7
  • 作者：
    Liu Y;Wang DK;Jiang DZ;Qin X;Xie ZD;Wang QK;Liu M;Chen LM
  • 通讯作者：
    Chen LM
Cloning and identification of two novel NBCe1 splice variants from mouse reproductive tract tissues: A comparative study of NCBT genes
小鼠生殖道组织中两种新型 NBCe1 剪接变体的克隆和鉴定：NCBT 基因的比较研究
  • DOI：
    10.1016/j.ygeno.2011.04.010
  • 发表时间：
    2011-08-01
  • 期刊：
    GENOMICS
  • 影响因子：
    4.4
  • 作者：
    Liu, Ying;Xu, Jiu-Ying;Chen, Li-Ming
  • 通讯作者：
    Chen, Li-Ming
Expression and distribution of NBCn2 (Slc4a10) splice variants in mouse brain: cloning of novel variant NBCn2-D.
NBCn2 (Slc4a10) 剪接变体在小鼠大脑中的表达和分布：新变体 NBCn2-D 的克隆
  • DOI：
    10.1016/j.brainres.2011.03.046
  • 发表时间：
    2011-05-16
  • 期刊：
    Brain research
  • 影响因子：
    2.9
  • 作者：
    Liu Y;Xu JY;Wang DK;Boron WF;Chen LM
  • 通讯作者：
    Chen LM

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其他文献

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  • 期刊：
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  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    刘颖;王丽敏;姜建华;赵成丽;张池军;孙铁铮
  • 通讯作者：
    孙铁铮

其他文献

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刘颖的其他基金

氨基端结构域在NBCe1功能调制中的作用及机制研究
  • 批准号：
    31571201
  • 批准年份：
    2015
  • 资助金额：
    64.0 万元
  • 项目类别：
    面上项目

相似国自然基金

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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