新城疫病毒HN蛋白茎区突变体构建及其生物学特性研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31101839
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    23.0万
  • 负责人：
    朱启运
  • 依托单位：
    中国农业科学院兰州兽医研究所
  • 学科分类：
    C1802.兽医病毒学
  • 结题年份：
    2014
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2014-12-31

项目摘要

新城疫病毒血凝素神经氨酸酶蛋白(HN)由球状头部和茎区部分组成，球状头部的结构和功能研究较为深入，但茎区氨基酸序列调控病毒生物学特性的分子机制尚未完全清楚。本项目用新城疫病毒作为病毒研究对象，拟对HN茎区HR之间的居间序列进行突变，构建7-10个HN突变体，运用流式细胞、Content-mixing和免疫共沉淀等技术手段，对野生型和突变型HN蛋白进行受体结合、神经氨酸酶和细胞融合等特性的比较分析，揭示居间序列对HN蛋白生物学功能的影响；并利用反向遗传技术平台进行病毒拯救，获得同时表达eGFP和HN 蛋白的重组突变型病毒，通过病毒复制动力学分析、SPF动物实验和组织病理学等技术的运用，分别从不同角度系统解析居间序列变异对HN蛋白功能、病毒感染性和致病性调控作用的分子机制。为研制和开发新型靶向抗病毒药物或小分子抑制剂以及减毒活疫苗提供理论依据。

结项摘要

新城疫病毒血凝素神经氨酸酶蛋白(HN)由球状头部和茎区部分组成，球状头部的结构和功能研究较为深入，但茎区氨基酸序列调控病毒生物学特性的分子机制尚未完全清楚，已有研究结果也有待进一步验证和解析。本项目以基因Ⅶ型新城疫病毒G7株作为研究对象，对 HN 茎区HR之间的居间序列进行突变，构建6 个 HN 突变体，对野生型和突变型 HN 蛋白进行细胞表面表达、受体结合、神经氨酸酶和细胞融合等特性的比较分析，验证了居间序列突变对 HN 蛋白生物学功能的影响。进一步，利用反向遗传技术进行病毒拯救，获得5株HN 突变型和野生型新城疫病毒，通过病毒复制动力学分析和SPF 动物实验等技术从不同层面、系统解析居间序列突变对病毒感染性和致病性等生物学特性的影响。结果表明，茎区HR居间序列突变降低了病毒在BHK-21细胞上的增殖活性，同时病毒对SPF鸡有毒力致弱作用，并降低了病毒的感染性。本课题系统研究了HN蛋白居间序列突变对蛋白和病毒生物学特性的影响，为深入研究副黏病毒的膜融合机制拓展了思路，为NDV新型疫苗的研制及靶向小分子药物的开发积累了实验数据，提供了理论依据。

项目成果

期刊论文数量（1）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
基因Ⅶ型新城疫病毒HN蛋白茎区居间序列突变株的拯救及其生物学特性的分析
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    中国兽医科学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    刘彬;吉艳红;林中青;朱启运
  • 通讯作者：
    朱启运

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其他文献

表达非洲猪瘟病毒p30蛋白的重组新城疫病毒在小鼠中的免疫原性
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  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    中国兽医科学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
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  • 通讯作者：
    朱启运
细丝蛋白A通过活化Ⅰ型干扰素信号通路抑制 H5N6流感病毒复制
  • DOI：
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  • 发表时间：
    2018
  • 期刊：
    中国科学: 生命科学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    韩璐;汪亮;曾艳;陈化兰;朱启运;徐帅
  • 通讯作者：
    徐帅
一株洞庭湖候鸟新城疫病毒的分离鉴定及基因组特征分析
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    中国兽医科学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    吉艳红;刘彬;朱启运;李郁
  • 通讯作者：
    李郁

其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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