中药马齿苋中新型脑苷脂类成分-马齿苋脑苷A抗肝癌转移机制的实验研究

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81102774
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    23.0万
  • 负责人：
    郑国银
  • 依托单位：
    中国人民解放军第二军医大学
  • 学科分类：
    H3203.中药药效物质
  • 结题年份：
    2014
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2014-12-31

项目摘要

复发转移是肝癌致死的重要原因，迄今尚无有效的防治方法。目前已知Rac激活的SAPK/JNK通路磷酸化水平升高，可促进肝癌的转移。对该通路进行干预研究，对于抑制肝癌转移药物的发现，具有重要的潜在价值。我们发现首次从中药马齿苋中获得的新型脑苷脂类成分-马齿苋脑苷A具有抑制肝癌细胞转移的作用，但尚不清楚这种作用是否与Rac下游受体SAPK/JNK磷酸化有关。本课题拟采用pull down assay、激光共聚焦、transwell小室和Western blot方法，系统研究马齿苋脑苷A对高转移潜能肝癌细胞（MHCC97H）的Rac-GTP水平、细胞骨架、细胞运动能力和SAPK/JNK级联的影响，分析Rac活性与细胞骨架、细胞运动能力和SAPK/JNK的相关性。进而转染Rac-DA、PI3-K入MHCC97H细胞，观察上述作用能否被逆转，来探讨其抑制肝癌转移的作用机制，为最终临床应用提供理路依据。

结项摘要

马齿苋脑苷A（PCA）为从中药马齿苋中分离到的新型脑苷脂类化合物，在前期的实验研究发现其对人肝癌细胞有一定的抑制作用，为此在本研究中我们选用MTT法、凋亡形态学观察、流式细胞凋亡检测、划痕试验、Transwell小室迁移和粘附试验对马齿苋脑苷A的体外抗人肝癌细胞的作用进行观察，同时还运用FQ-RT-PCR、Western blot等分子生物学方法进行了PCA诱导HCCLM3细胞凋亡的分子机制进行了研究。实验结果显示，PCA能够诱导人肝癌HCCLM3细胞凋亡，其机制是通过激活p38MAPK和JNK信号通路，降低线粒体膜电位，使线粒体膜通透性增加，线粒体中细胞色素c和凋亡诱导因子漏出到细胞质中，进而激活caspase-9和caspase-3，诱导下游的凋亡级联反应，导致细胞死亡。PCA能够抑制人肝癌HCCLM3细胞粘附、侵袭和迁移的能力，其发挥作用的途径与肿瘤细胞转移相关的nm23-H1、TIMP2、MTA1、RhoA、Rac1/Cdc42、MMP-2和MMP-9的基因和蛋白的表达有关。结果提示，PCA具有较好的体外诱导肝癌细胞凋亡和抗肝癌转移的作用。

项目成果

期刊论文数量（5）
专著数量（0）
科研奖励数量（1）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
凌昌全治疗肝硬化腹水的经验
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
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  • 影响因子：
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  • 作者：
    李曙光;郑国银
  • 通讯作者：
    郑国银
凌昌全辨治慢性乙型肝炎经验
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    中医杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    郑国银;苗洁琼;陈喆
  • 通讯作者：
    陈喆
马齿苋脑苷A对人宫颈癌HeLa细胞凋亡和侵袭转移的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    肿瘤防治研究
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    郑国银;曲丽萍;张宏;辛海量
  • 通讯作者：
    辛海量
Portulacerebroside A induces apoptosis via activation the mitochondrial death pathway in human liver cancer HCCLM3 cells
马齿苋苷 A 通过激活人肝癌 HCCLM3 细胞线粒体死亡途径诱导细胞凋亡
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    Phytochemistry Letters
  • 影响因子：
    1.7
  • 作者：
    Guo-Yin Zheng;Li-Ping Qu a;Xiao-Qiang Yue;Wei Gu;Hai-Liang Xin
  • 通讯作者：
    Hai-Liang Xin
Inhibition of invasion and metastasis of human liver cancer HCCLM3 cells by portulacerebroside A
马齿苋苷A抑制人肝癌HCCLM3细胞侵袭和转移
  • DOI：
    10.3109/13880209.2014.941505
  • 发表时间：
    2015-05-01
  • 期刊：
    PHARMACEUTICAL BIOLOGY
  • 影响因子：
    3.8
  • 作者：
    Ji，Qian;Zheng，Guo-Yin;Xin，Hai-Liang
  • 通讯作者：
    Xin，Hai-Liang

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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