TRH及甲状腺轴对睾丸功能调节的研究

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项目介绍
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基本信息

  • 批准号：
    81000245
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    20.0万
  • 负责人：
    赵勇
  • 依托单位：
    中国人民解放军总医院
  • 学科分类：
    H0404.男性生殖内分泌异常及相关疾病
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

促甲状腺激素释放激素(TRH)最初是从羊和猪的下丘脑中提取并纯化的3肽， 是下丘脑-垂体-甲状腺轴（HPT）的中枢。我们前期的研究证实了TRH及TRH-R1、R2均表达于人及哺乳动物睾丸；一定浓度的TRH能够促进原代培养的大鼠睾丸Leydig祖细胞增值或分化，却抑制成熟Leydig细胞基础睾酮及hCG刺激下的睾酮分泌。为了阐明TRH以及甲状腺轴紊乱影响睾丸生理功能的机理，我们拟用形态学、分子生物学等方法，从细胞实验、动物实验及临床试验的层面上，探讨TRH调节Leydig细胞功能的信号转导通路及分子基础； 观察甲状腺轴紊乱下Leydig细胞分化、发育，精子发生及睾丸功能表型等生殖生理学变化；甲状腺轴紊乱患者精液参数、精子超微结构、受精能力等的改变。本课题的开展将进一步阐明甲状腺轴对男性生殖的影响及其机理，对研究男性生殖生理具有重要的理论价值和临床应用前景。

结项摘要

促甲状腺激素释放激素(TRH)最初是从羊和猪的下丘脑中提取并纯化的3肽，是下丘脑-垂体-甲状腺轴（HPT）的中枢。已证实了TRH及TRH-R1、R2均表达于人及哺乳动物睾丸。为了研究TRH对原代培养Leydig细胞睾酮合成作用机制的研究，本研究优化并完善了大鼠睾丸间质细胞的分离、鉴定和培养工作，使分离的细胞数量和纯度进一步提高。.采用PCR技术对TM3细胞中TRH-R基因mRNA表达情况进行了研究，证明了TM3细胞系同样表达TRH受体，为TRH作用于TM3细胞引起细胞功能改变提供基础。采用real-time PCR及Western方法观察了TRH对TM3细胞和原代培养的成年型Leydig细胞睾酮合成限速酶3β-HSD和StAR的影响。结果显示3β-HSD蛋白的表达量与TRH呈剂量依赖效应，小剂量的TRH可以增加3β-HSD蛋白的表达，而相对高剂量的TRH则抑制了3β-HSD蛋白的表达水平，这与睾酮合成的结果相符合，显示出TRH对TM3细胞和原代培养的成年型Leydig细胞的类固醇激素合成主要通过调节3β-HSD蛋白的表达而起作用。StAR蛋白的表达与TRH刺激无明显剂量相关性，在不同剂量TRH的刺激下，StAR蛋白表达在各组之间无统计学差异。提示TRH对TM3细胞睾酮合成的影响可能不通过StAR其作用。初步证实了TRH对睾丸间质细胞睾酮合成作用的机制。.为研究TRH对Leydig细胞增殖的影响，采用BrdU掺入实验检测TRH对小鼠mLTC-1细胞和睾丸Leydig祖细胞增殖的影响。阳性染色细胞计数，两组之间有显著差异，提示TRH与mLTC-1细胞及睾丸Leydig祖细胞增殖或DNA合成具有相关性。.本课题建立了新生期甲状腺功能减低大鼠模型，观察到新生期甲状腺功能减低大鼠出生后体重和睾丸质量低于对照组，其睾丸间质细胞的发育晚于正常大鼠，雄激素水平低于同日龄大鼠。结果提示甲状腺功能低下可引起青春期前大鼠睾丸功能发育的变化。.临床诊断为甲状腺功能减退患者的血清睾酮水平稍低于对照组，存在统计学差异；精子畸形率与正常对照组存在统计学差异。精子浓度、活动率之间无统计学差异。提示甲减对患者的生育力存在一定程度的影响。.综上所述，甲状腺轴功能的改变可以影响睾丸的生理功能。

项目成果

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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