噻虫嗪抗独特型纳米抗体提高免疫分析灵敏度的分子机制研究

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31701808
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    25.0万
  • 负责人：
    方庆奎
  • 依托单位：
    安徽农业大学
  • 学科分类：
    C1405.植物化学保护
  • 结题年份：
    2020
  • 批准年份：
    2017
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2018-01-01 至2020-12-31

项目摘要

Immunological detection technology is one of the most important screening methods for pesticide residue. As a substitute for antigen, anti-idiotypic antibody can significantly improve the sensitivity of immunoassay, while, at present, the molecular mechanism of improving the analytical sensitivity of anti-idiotypic nanobody is unclear, which limits the application of anti-idiotypic antibody in the field of pesticide residues immunoassay. So the project intends to carry out the study on the molecular mechanism of thiamethoxam anti-idiotypic nanobody in improving the immunoassay sensitivity. In detail, ① producing anti-thiamethoxam monoclonal antibody. ② establishing phage display library, obtaining thiamethoxam phage display anti-idiotypic nanobody by affinity panning, preparation a series of anti-idiotypic nanobody with variable sensitivity by vitro evolution. ③ revealing the molecular mechanism of anti-idiotypic nanobody by molecular simulation. ④ exploration and verification of the relationship between the mechanism and sensitivity of anti-idiotypic nanobody, and verification of the mechanism. Project results can clarify study on the molecular mechanism of thiamethoxam anti-idiotypic nanobody in improving the immunoassay sensitivity, and provide a theoretical basis for the development and application of high-sensitivity anti-idiotypic nanobody.
免疫分析技术是农药残留现场快速筛查手段之一。抗独特型纳米抗体作为一种抗原替代物可显著提高免疫分析的灵敏度，然而农药抗独特型纳米抗体提高分析灵敏度的分子机制不明，成为限制抗独特型纳米抗体在农药残留免疫分析中应用的关键问题。本项目拟开展噻虫嗪抗独特型纳米抗体提高免疫分析灵敏度的分子机制研究，内容包括：①合成人工抗原，制备抗噻虫嗪单克隆抗体；②构建噬菌体展示纳米抗体文库，淘选噻虫嗪抗独特型纳米抗体，体外进化制备系列具有不同灵敏度的抗独特型纳米抗体；③分子模拟解析抗独特型纳米抗体与噻虫嗪抗体互作的分子机制；④比对分析探寻作用机制与分析灵敏度之间内在联系，并进行突变验证。研究结果有望阐明噻虫嗪抗独特型纳米抗体提高免疫分析灵敏度的分子机制，为其它农药高灵敏度的抗独特型纳米抗体的研制提供理论指导。

结项摘要

抗独特型纳米抗体作为一种抗原替代物可显著提高免疫分析的灵敏度，明确其提高分析灵敏度的分子机制，有利于抗独特型纳米抗体在农药残留免疫分析中的进一步应用。本项目利用噻虫嗪原药一步合成噻虫嗪半抗原，通过活泼酯法合成噻虫嗪人工抗原，筛选获得1株稳定分泌抗噻虫嗪单克隆抗体的杂交瘤细胞株。在最优条件下，建立了灵敏的噻虫嗪残留免疫分析方法，ELISA分析线性范围为0.125-25.0 ng/mL，IC50值2.11 ng/mL，最低检测限为0.17 ppb (IC10)。试纸条分析可视检测限为0.5 μg/L，2.0 μg/L完全消线，建立的免疫分析方法成功用于农产品中噻虫嗪残留快速筛查。构建了3种动物源的天然抗独特型纳米抗体噬菌体展示文库，文库容量约为2×1012，开展了噻虫嗪噬菌体展示抗独特型纳米抗体的淘选，有效富集到抗独特型纳米抗体噬菌体阳性克隆。本研究结果为深入探讨噻虫嗪抗独特型纳米抗体提高免疫分析灵敏度的分子机制提供了基础数据。

项目成果

期刊论文数量（3）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Biointeractions of Herbicide Atrazine with Human Serum Albumin: UV-Vis, Fluorescence and Circular Dichroism Approaches.
除草剂莠去津与人血清白蛋白的生物相互作用：紫外-可见光、荧光和圆二色性方法
  • DOI：
    10.3390/ijerph15010116
  • 发表时间：
    2018-01-11
  • 期刊：
    International journal of environmental research and public health
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Zhu M;Wang L;Wang Y;Zhou J;Ding J;Li W;Xin Y;Fan S;Wang Z;Wang Y
  • 通讯作者：
    Wang Y
Quantitative Determination of Acetamiprid in Pollen Based on a Sensitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay
基于灵敏酶联免疫吸附测定花粉中啶虫脒的定量测定
  • DOI：
    10.3390/molecules24071265
  • 发表时间：
    2019-04-01
  • 期刊：
    MOLECULES
  • 影响因子：
    4.6
  • 作者：
    Fang, Qingkui;Zu, Quan;Cao, Haiqun
  • 通讯作者：
    Cao, Haiqun
Dissipation behavior, residue distribution and risk assessment of three fungicides in pears
三种杀菌剂在梨体内的消散行为、残留分布及风险评估
  • DOI：
    10.1002/jsfa.10199
  • 发表时间：
    2020-01-08
  • 期刊：
    JOURNAL OF THE SCIENCE OF FOOD AND AGRICULTURE
  • 影响因子：
    4.1
  • 作者：
    Fang, Qingkui;Wu, Ruifeng;Cao, Haiqun
  • 通讯作者：
    Cao, Haiqun

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI：
    {{ item.doi || "--"}}
  • 发表时间：
    {{ item.publish_year || "--" }}
  • 期刊：
    {{ item.journal_name }}
  • 影响因子：
    {{ item.factor || "--"}}
  • 作者：
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者：
    {{ item.author }}

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ patent.updateTime }}

其他文献

其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI：
    {{ item.doi || "--" }}
  • 发表时间：
    {{ item.publish_year || "--"}}
  • 期刊：
    {{ item.journal_name }}
  • 影响因子：
    {{ item.factor || "--" }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者：
    {{ item.author }}
empty
内容获取失败，请点击重试
重试联系客服
title开始分析
查看分析示例
此项目为已结题，我已根据课题信息分析并撰写以下内容，帮您拓宽课题思路：

AI项目思路

AI技术路线图

相似国自然基金

{{ item.name }}
  • 批准号：
    {{ item.ratify_no }}
  • 批准年份：
    {{ item.approval_year }}
  • 资助金额：
    {{ item.support_num }}
  • 项目类别：
    {{ item.project_type }}

相似海外基金

{{ item.name }}
{{ item.translate_name }}
  • 批准号：
    {{ item.ratify_no }}
  • 财政年份：
    {{ item.approval_year }}
  • 资助金额：
    {{ item.support_num }}
  • 项目类别：
    {{ item.project_type }}
{{ showInfoDetail.title }}

作者：{{ showInfoDetail.author }}

知道了

AI项目解读示例

课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
关闭
close
客服二维码