重组人FcγRIIB在系统性红斑狼疮B细胞激活中的作用

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基本信息

  • 批准号：
    81160375
  • 项目类别：
    地区科学基金项目
  • 资助金额：
    45.0万
  • 负责人：
    杨志伟
  • 依托单位：
    宁夏医科大学
  • 学科分类：
    H1107.自身免疫性疾病
  • 结题年份：
    2015
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2015-12-31

项目摘要

本项目以可溶性和膜结合性的重组人FcγRIIB为研究对象，利用分子生物学技术，获得可溶性和膜结合性的重组人FcγRIIB，分别检测其与人和小鼠免疫复合物的结合情况，评价其生物学活性；通过体外检测其对SLE患者和模型鼠B细胞分泌抗体、浆细胞凋亡反应、B细胞信号转导分子Lyn 、SHIP、 Dok 、BTK及其mRNA表达的影响；探索FcγRIIB体外对系统性红斑狼疮B细胞的免疫调节作用；利用SLE模型鼠观察可溶性和膜结合性 FcγRIIB 的体内作用，分别观察SLE模型鼠的皮肤、关节、脑、心、肝、肾脏病理改变及免疫复合物的沉积，检测SLE模型鼠血清中ANA及外周免疫器官中B细胞的FcγRIIB表达水平及信号转导分子的变化；揭示可溶性和膜结合性FcγRIIB两者之间在体内外对系统性红斑狼疮B细胞的作用及其差异性，为进一步研究奠定基础。

结项摘要

构建FcγRⅡB慢病毒诱导表达载体，测序结果显示插入片段碱基序列与GenBank提供FcγRⅡB基因序列同源性100%。表达病毒滴度达106TU/mL，调节病毒滴度达105TU/mL。慢病毒载体介导的FcγRIIB基因可在人B细胞稳定表达并下调IgM、IgG抗体的分泌水平；抗体分泌降低可能的机制是FcγRIIB活化影响下游Btk,Lyn,DOK-1和SHIP蛋白的磷酸化水平且促进B细胞凋亡。. 构建了原核重组质粒pET-sFcγRIIb，诱导表达并纯化获得重组FcγRIIb胞外区蛋白；SLE患者血清中可溶性FcγRIIb含量低于正常人，重组蛋白husFcγRIIb可与血清中免疫复合物结合，抑制免疫复合物对B淋巴细胞的激活，减少IgM、IgG抗体的分泌，为进一步研究可溶性FcγRIIb的生物学作用奠定了基础。. 分别通过尾静脉注射小鼠FcγRⅡB慢病毒表达载体和可溶性FcγRIIB重组蛋白到MRL/lpr SLE小鼠体内，均可减少MRL/lpr SLE小鼠尿蛋白、自身抗体含量，延缓MRL/lpr SLE小鼠的病情进展,可能是防治系统性红斑狼疮的一个新途径。

项目成果

期刊论文数量（10）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
真核重组质粒pEGFP-Fcγ RIIb在NIH3T3细胞及BALB/c小鼠体内的表达
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    宁夏医科大学学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    秦三利;杨志伟
  • 通讯作者：
    杨志伟
小鼠FcγRIIb胞外区重组蛋白的原核表达及对小鼠SLE模型的治疗作用研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    中华微生物学和免疫学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    雷泽华;曹秀琴;杨志伟
  • 通讯作者：
    杨志伟
上调巨噬细胞FcγRIIb的表达抑制其吞噬和趋化功能
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    细胞与分子免疫学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    郑修军;王琦;曹秀琴;杨志伟
  • 通讯作者：
    杨志伟
人FcγRIIb胞外区原核表达载体的构建及表达
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    宁夏医科大学学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    张雷;曹秀琴;杨志伟
  • 通讯作者：
    杨志伟
人可溶型FcγRIIb的制备及其功能初步研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    细胞与分子免疫学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    张雷;曹秀琴;杨志伟
  • 通讯作者：
    杨志伟

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    吴孙勇;廖桂生;杨志伟
  • 通讯作者：
    杨志伟

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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