伪狂犬病病毒激活三叉神经节细胞对其NF-кB和PI3K/Akt信号转导通路影响的分子机制研究

The pseudorabies virus (PRV), a member of the Alphaherpesvirus subfamily, is the causative agent of pseudorabies in pigs. Pseudorabies is one of the primary contagious diseases which impacts the pig industry with substantial economic losses each year. The main difficulty in control and eradicate Pseudorabies is due to the PRV latent infections. Although the underlying mechanisms responsible for the establishment, maintenance and reactivation of the latency infections are still unclear at the moment, most viruses have been shown to promote host cell survival during the early stages of infection by producing anti-apoptotic factors. Two isoforms of PRV US3, namely US3a and US3b, have been shown to produce anti-apoptotic factors, and the anti-apoptosis effect of US3a is greater than that of US3a has a greater anti-apoptotic effect than US3b. This project will use the rat and swine trigeminal ganglion (TG) in vitro model and use rat and swine in vivo model. It will proceed from the two signaling pathways that activate the PRV US3 proteins, i.e., NF-кB and PI3/AKT, to study and reveal the molecular mechanism of TG cell activation induced by JEV infections. This study will not only lay the foundation for the elucidation of the pathogenesis and immune of PRV but also provide a reference for the studies on the viral infections due to other members of family Herpesviridae.

伪狂犬病病毒(PRV)属于疱疹病毒科中的α疱疹病毒亚科，是引起猪伪狂犬病的病原体。伪狂犬病是危害养猪业的主要传染病之一，每年造成巨大的经济损失。控制和消灭伪狂犬病所面临的主要困难是PRV的潜伏感染问题。虽然目前关于潜伏感染的建立、维持及激活机制尚不明确，但是大多数病毒已被发现会产生抗凋亡因子，进而促进感染早期的宿主细胞存活。PRV US3的两个异构体（US3a和US3b）已被证实能够产生抗凋亡因子，且US3a的抗凋亡活性大于US3b。本项目将以鼠和猪的三叉神经节细胞（TG)为体外模型，以鼠和猪为体内模型，通过PI3K/Akt和NF-кB两条信号通路激活的PRV US3蛋白出发，研究并揭示PRV感染引起三叉神经节细胞激活的分子机制。该研究将为阐明PRV致病与免疫机理奠定基础，而且还可为其它疱疹科病毒感染问题的揭示提供借鉴。

项目的背景. 控制和消灭伪狂犬病所面临的主要困难是PRV潜伏感染的问题，关于PRV潜伏感染的建立、维持及激活机制尚不明确，揭示PRV感染引起三叉神经节细胞激活的分子机制将为阐明PRV致病机理与免疫机理奠定基础，还可为其它疱疹科病毒感染问题的揭示提供借鉴。.主要研究内容. PRV激活三叉神经节细胞NF-кB信号通路的研究、PRV激活三叉神经节细胞NF-κB信号通路对炎症因子分泌的影响和伪狂犬病病毒对三叉神经节细胞PI3K/Akt信号通路影响研究，从 NF-кB 和 PI3K/Akt 信号通路方向入手，解析PRV直接感染引起三叉神经节细胞激活的分子机制，为进一步揭示 PRV 的致病机理奠定基础。.重要结果. （1）成功分离培养出小鼠三叉神经节（TG）细胞，PRV能够体外感染TG细胞内增殖，并能产生相应的CPE现象。PRV在小鼠TG细胞内增值明显，同时严重阻碍TG细胞分裂，该研究进步一证实了该TG细胞的病变与PRV感染有直接关系。. （2）PRV感染TG细胞和小鼠三叉神经节后能够激活NF-κB信号通路，激活的途径是通过MyD88途径而实现的，PRV感染TG细胞和小鼠三叉神经节后MyD88、TRIF和NF-κB p65转录和表达水平表现为先下调后上调，上调IL-6转录和表达水平以及IL-1β转录水平。. （3）建立了PRV感染小鼠的体内感染模型；PRV感染后会抑制PI3K、Akt mRNA表达，但高感染量PRV会促进PI3K、Akt蛋白表达以及Akt的磷酸化；高感染量（50 000TCID50）PRV感染小鼠后会激活三叉神经节细胞PI3K/Akt信号通路。. （4）PRV感染TG细胞通过PI3K依赖的方式激活Akt；PI3K/Akt信号通路在PRV感染TG细胞抑制细胞凋亡中发挥重要作用；PRV感染TG细胞的凋亡主要是通过经典的PI3K/Akt/Bax信号通路。.科学意义. 建立了PRV小鼠的体内感染和体外感染模型，PRV感染小鼠体内和体外TG细胞均能激活能NF-κB信号通路和PI3K/Akt信号通路，激活NF-κB信号通路的途径是通过MyD88途径而实现的，PRV感染TG细胞的凋亡主要是通过经典PI3K/Akt/Bax信号通路而实现的。该研究为进一步揭示猪伪狂犬病毒潜伏感染及其致病机理提供了新的线索，也为其它疱疹科病毒感染j提供借鉴。

内容获取失败，请点击重试