补肾法对骨形成和骨吸收雌激素相关受体alpha作用机制探讨

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30973761
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    31.0万
  • 负责人：
    王海彬
  • 依托单位：
    广州中医药大学
  • 学科分类：
    H3110.中医骨伤科学
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

骨质疏松等骨科疾病严重威胁着人类的安全，给人民带来极大的痛苦和经济负担。雌激素受体被认为在骨质疏松中起着重要的作用，但从基因敲除小鼠发现，除了雌激素受体还有其他的信号途径影响着骨形成和骨吸收。雌激素相关受体由于和雌激素受体具有高度的相似性，共同调控一些下游基因表达，被认为参与了雌激素受体的信号传导途径，而且在成骨细胞和破骨细胞中都具有高表达。本研究拟采用抑制剂，激活剂，siRNA，基因超表达等技术，探讨ERRalpha在骨形成和骨吸收中的作用和补肾中药的关系。并借助成骨细胞和破骨细胞共培养偶联技术与骨质疏松动物模型，研究ERRalpha在偶联环境和体内，对骨形成和吸收能力的影响。探明补肾法和ERRalpha在骨形成和骨吸收中的分子作用机理，为骨质疏松等骨科疾病开创新的治疗思路和理论依据。

结项摘要

1．.成骨细胞和破骨细胞的共育的体系为研究对象，不单研究MG63和RAW264.7的作用，并培养了鼠的成骨细胞和RAW264.7的作用，已经建立的几种模型都有一定的代表性，但是整体而言，难以有一个衡量的标准，本研究用细胞系分化培养，建立了较稳定的细胞共培养模型。.2．.活血中药为主的药物，在共育体系中对细胞中ALP，BMP等基因有促进作用，并和剂量成正向的关系，低剂量的活血中药，对细胞中CLO，RUX2等基因有促进的作用。黄芪对ALP有较优明显的促进作用，对细胞中CLO，RUX2等基因，没有检测出有剂量的依赖性，但高剂量黄芪，可以增加ALP的生成。实验中应用的XCT，是明显的增加了BMP和CLO的生成。.3．.活血中药的不同剂量，均可以增加OPG的生成，说明活血中药对骨的生成有重要的促进作用。高剂量的活血化瘀中药，同时增加了RNAK和RNAKL的量，说明中药在促进成骨的同时，对破骨也有一定的作用。.4．.利用基因报告系统证明，山奈酚可以在人成骨细胞株MG-63中激活雌激素受体的活性。在本研究中，细胞活性实验显示山奈酚可以显著的提高细胞活力，并促进成骨细胞前期分化标志ALP的活性和晚期分化标志骨矿化能力。.5．.报告系统中应用XCT-790可以显著的、特异性的分别降低ERRa和ERRβ的活性，但染料木素对ERRs的活性并无显著的影响， XCT-790来抑制ERRα的活性，从而抑制整个线粒体氧化磷酸化中比较关键的基因。.6．.成功构建并包装了表达hERRa基因的重组慢病毒载体，并发现过表达hERRa促进了a549细胞增殖，这与hEERa抑制剂能抑制细胞增殖的发现是一致的。.7．.PPARγmRNA在骨成骨中其扮演着重要性的角色， PPARγmRNA的过度表达最终导致股骨头内骨细胞变性，脂肪细胞变性积聚，最终导致骨坏死的发生；另一方面PPARγmRNA高度表达会使多能干细胞成脂分化增强，成骨分化被抑制，最终导致骨质疏松。.8．.对破骨细胞的前体细胞应用骨微粒和不同剂量的中药进行研究，结果提示，不同剂量含药血清均能增高TGF-β的表达，降低TNF-α的表达，说明活血中药在抗炎中有一定的疗效，和临床的发现相同。.9．.去势作用后，BMU处于抑制状态，成骨细胞存活减少，而破骨细胞活动增加。成骨与破骨失去正常的耦合作用。补肾中药增加了骨细胞的活性.

项目成果

期刊论文数量（7）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（4）
专利数量（0）
雌激素相关受体α特异性抑制剂XCT-790对成骨细胞株MG-63增殖分化的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    广州中医药大学学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    杨冰;谭彤燕;梁笃;曾展鹏;周驰;王海彬
  • 通讯作者：
    王海彬
负载ERRα基因片段慢病毒构建及表达
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中国公共卫生
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    王海彬;周驰;刘锋;曾展鹏;WANG Hai-bin,ZHOU Chi,LIU Feng,et al(Department of
  • 通讯作者：
    WANG Hai-bin,ZHOU Chi,LIU Feng,et al(Department of
雌激素相关受体alpha特性抑制剂XCT-790对细胞糖代谢的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    当代医学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    杨冰;王海彬;梁笃;王军舰;方芳;高明慧;刘文明;周曦
  • 通讯作者：
    周曦
β-甘草次酸选择性调节法呢醇X受体活性
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中国新药杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    刘文明;王海彬;刘丽;周曦;王军舰
  • 通讯作者：
    王军舰
山柰酚对成骨细胞株MG-63增殖分化的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    时珍国医国药
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    曾意荣;曾建春;樊粤光;王海彬;王军舰
  • 通讯作者：
    王军舰

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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