Smad7蛋白泛素化和乙酰化修饰对AAN调节机制的研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30972215
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    30.0万
  • 负责人：
    吴国娟
  • 依托单位：
    北京农学院
  • 学科分类：
    C1808.兽医药物学与毒理学
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

马兜铃酸Ⅰ（AAⅠ）引起的肾损伤受到国内外广泛关注。本项目拟在已完成的国家自然科学基金的基础上，对导致肾纤维化的靶点- - Smad7蛋白进行泛素化和乙酰化修饰，结合已建立的马兜铃酸体内外肾病模型，利用RT-PCR、免疫组织和细胞化学、免疫共沉淀、Western blot对比分析Smad7、Arkadia、UCH37、p300和HDAC1等相关因子在mRNA和蛋白水平上的表达变化；将含Arkadia和HDAC1的siRNA载体转染至细胞和小鼠AAN模型，同时加入蛋白酶体抑制剂，检测Smad7、P-Smad2/Smad3及TβRⅠ表达的变化；流式细胞术观察不同条件下Smad7蛋白复合物的组成随细胞周期的变化。从蛋白水平上研究Smad7蛋白复合物组成的时空表达与AAN发生、发展的关系，进一步确定Smad7在肾纤维化中的作用，为AAN的研究和治疗提供新的实验方法与途径。

结项摘要

马兜铃酸Ⅰ（AAI）引起的肾损伤受到国内外广泛关注。本研究结合已建立的马兜铃酸体内外肾病模型，检测了导致肾纤维化的靶点--Smad7蛋白的泛素化和乙酰化修饰情况。利用RT-PCR、免疫组织和细胞化学、免疫共沉淀、Western blot对比分析Smad7、Arkadia、UCH37、p300和HDAC1等相关因子在mRNA和蛋白水平上的表达变化；将含Arkadia、UCH37和HDAC1的siRNA载体转染至细胞AAN模型，同时加入蛋白酶体抑制剂，检测Smad7、P-Smad2/Smad3及TβRⅠ表达的变化；利用透射电镜技术观察后得知AAI处理小鼠后导致细胞器损伤，细胞核变异；AAN动物模型和细胞模型中泛素化酶Arkadia和去乙酰化酶HDAC1的含量增加，而去泛素化酶UCH37和乙酰化酶p300的蛋白水平降低。因此，AAI可通过乙酰化和泛素化从蛋白水平上调控Smad7的含量进而来调节肾纤维化中进程，为AAN的研究和治疗提供新的实验方法和靶点。

项目成果

期刊论文数量（23）
专著数量（2）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（4）
专利数量（0）
去乙酰化蛋白酶1在马兜铃酸肾纤维化模型中对TGF-β1/Smad7信号通路的作用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    畜牧兽医学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李培锋;吴国娟;YANG Yang1,2,ZHANG Zhong-wen2YAO Hua2,GAO Lei2,LI;2.Animal Science;Technology College,Beijing Un
  • 通讯作者：
    Technology College,Beijing Un
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  • DOI：
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  • 发表时间：
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  • 期刊：
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    --
  • 作者：
    王霞;张康;夏楠;李婧;赵海焦;吴国娟;张中文;WANG Xia,ZHANG Kang,XIA Nan,LI Jing,ZHAO Hai-jiao,
  • 通讯作者：
    WANG Xia,ZHANG Kang,XIA Nan,LI Jing,ZHAO Hai-jiao,
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  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    畜牧兽医学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    王霞;XIA Nan;LI Jing;ZHAO Hai-jiao;WU Guo-juan;ZHANG Zhong-wen;张禹;夏楠;李婧;赵海焦;吴国娟;张中文;WANG Xia;ZHANG Yu
  • 通讯作者：
    ZHANG Yu
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  • DOI：
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  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中国兽药杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    祝文琪;WANG Xing;ZHOU Xu-ping;WU Guo-juan;高磊;王晶;王杏;周旭平;吴国娟;ZHU Wen-qi;GAOLei;WANG Jing
  • 通讯作者：
    WANG Jing
马兜铃酸Ⅰ诱导肾小管上皮细胞凋亡的检测
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中国畜牧兽医
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    彭晓兰;GAO Lei;ZHANG Zhong-wen;WU Guo-juan;董晓凯;廖芳芳;高磊;张中文;吴国娟;PENG Xiao-lan;DONG Xiao-kai;LIAO Fang-fang
  • 通讯作者：
    LIAO Fang-fang

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  • 作者：
    张中文;武聚富;沈红;吴国娟;况玲;陆彦
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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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