HCMV感染致人星形胶质细胞分泌变化及其对神经元存活与功能的影响

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81070501
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    28.0万
  • 负责人：
    李玲
  • 依托单位：
    青岛大学
  • 学科分类：
    H0419.胎儿相关性疾病与胎源性疾病
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

本项目首先拟用HCMV AD169株感染原代培养的人胚胎星形胶质细胞，应用SuperArray PCR基因芯片、RT-PCR和Western blot技术，研究HCMV感染是否激活并引起星形胶质细胞细胞因子、神经营养素和与突触形成相关蛋白的分泌变化，并确定细胞因子的类型。其次建立星形胶质细胞细胞和神经元共培养体系，通过RT-PCR和Western blot技术检测HCMV感染星形胶质细胞对神经元相应因子受体表达的影响；通过MTT法、流式细胞术检测HCMV感染星形胶质细胞对神经元凋亡的影响；通过免疫细胞化学、透射电镜和全细胞膜片钳技术检测HCMV感染AS对神经元突触形成和突触传递功能的影响。为阐明AS在HCMV感染的神经致病性机制中的作用提供一定的理论和实验依据。

结项摘要

人类巨细胞病毒(HCMV)是造成人类宫内感染并导致中枢神经系统先天性异常的主要病原体之一，迄今为止，HCMV引起神经系统损伤的机制尚未阐明。本项目在以下方面进行了相关研究：.1.原代培养人胚胎星形胶质细胞（AS），通过全基因转录谱分析、RT-qPCR、Western bloting、免疫荧光 以及ELISA方法检测HCMV感染不同时间段AS内细胞因子、神经营养素、与神经元突触形成相关蛋白的表达变化；2.采用同位素摄取的方法观察HCMV感染对AS谷氨酸摄取的影响；通过RT-PCR, Western bloting等方法检测AS内与谷氨酸代谢相关GLT-1、GLAST和GS的表达变化；通过免疫比浊法检测GS酶活性。3.建立AS与神经元共培养系统，通过Western bloting、免疫荧光等方法研究由HCMV感染引起的AS分泌变化对神经元存活、凋亡、突触形成和功能的影响。.本研究结果显示：.1、成功建立人胚胎AS、人海马神经元原代培养、人AS与神经元共培养系统和HCMV AD169体外感染AS模型。.2、有利于神经元和胶质细胞生长、修复和发育的重要生长因子、神经肽类和突触相关基因在感染后72h多数表达下调，同时，在下调基因中发现，参与谷氨酸谷氨酰胺循环的基因表达下调。RT-qPCR验证结果与芯片结果表达变化一致。.3、HCMV感染抑制星形胶质细胞分泌促突触形成分子-TSP1、TSP2 ：24h开始 TSP2 mRNA表达递减，48h开始，TSP1 mRNA表达递减；TSP1和TSP2蛋白分别在72和和48h明显下降。.4、感染下调星形胶质细胞神经突起导向因子-4（netrin-4）的表达。.5、HCMV感染减少AS谷氨酸摄取； HCMV感染96h后，GLT-1 、GLAST和GS表达下降，GS酶活性从6 h到72 h呈上升状态，96 h后下降，至120 h下降2倍以上。.6、HCMV通过NF-κB信号途径诱导人星形胶质细胞表达IL-6和IL-8。.7、AS与神经元共培养促进神经元轴突生长和突触形成，HCMV感染AS可抑制其促进作用。HCMV感染AS后，对其共培养的神经元存活和凋亡的影响差异无显著性，但神经元的突起数量和长度均低于Mock感染AS组。HCMV感染星形胶质细胞抑制共培养神经元内突触素-1和突触后致密蛋白95的表达。

项目成果

期刊论文数量（11）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（2）
专利数量（0）
染料木黄酮抑制由单纯疱疹病毒1型感染导致的人胶质瘤细胞增殖和凋亡异常
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    医学研究生学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    WANG Qian1,LI Ling1,WANG Bin2,YU Xiang-min1,SONG X;李玲;王斌;于向民;宋旭霞;钱冬萌;侯云;姜光域;胡明
  • 通讯作者：
    胡明
HCMV 基因在人和小鼠胚胎成纤维细胞中表达的差异性研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    微生物学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    杨瑞;王斌;钱冬萌;李玲;周雯;王桐梅;胡明;陈豪;宋旭霞
  • 通讯作者：
    宋旭霞
人参皂苷Rb1抗单纯疱疹病毒1型感染及保护神经的实验研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    中国中西医结合杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    梁园园;王斌;李玲;钱冬萌;宋旭霞;胡明;王志浩;LIANG Yuan-yuan,WANG Bin,LI Ling,et al Key Laborat
  • 通讯作者：
    LIANG Yuan-yuan,WANG Bin,LI Ling,et al Key Laborat
Human cytomegalovirus infection modulates thrombospondins 1 and 2 in primary fetal astrocytes
人巨细胞病毒感染调节原代胎儿星形胶质细胞中的血小板反应蛋白 1 和 2
  • DOI：
    10.1097/wnr.0b013e32836206d1
  • 发表时间：
    2013-07
  • 期刊：
    NeuroReport
  • 影响因子：
    1.7
  • 作者：
    Zhang, Li;Li, Ling;Wang, Bin;Qian, Dong-Meng;Song, Xu-Mia;Hu, Ming
  • 通讯作者：
    Hu, Ming
黄芩素抑制人巨细胞病毒感染星形胶质细胞的实验研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    微生物学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    周雯;李玲;于向民;刘爱红;王 斌;钱冬萌;杨 瑞;张志超
  • 通讯作者：
    张志超

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其他文献

π共役系高分子のコンフォメーションと光物性
π共轭聚合物的构象和光学性质
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
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  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    劉尊奇;李玲;久保和也;野呂真一郎;芥川智行;中村貴義;大図慎吾・石塚智也・小島隆彦;Habuchi S
  • 通讯作者：
    Habuchi S
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含甲烷水合物沉积物中硫酸盐-甲烷过渡带上方甲烷、硫和铁生物地球化学循环的新见解：以南海东沙地区为例
  • DOI：
    10.1016/j.dsr.2019.01.011
  • 发表时间：
    2019-03
  • 期刊：
    Deep sea research Part I
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李季伟;李玲;柏仕杰;许恒超;陈顺;杜梦然;彭晓彤
  • 通讯作者：
    彭晓彤
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  • 期刊：
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  • 作者：
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  • 通讯作者：
    唐石
油桃开花时间调控基因在花芽休眠过程中的表达分析
  • DOI：
    10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0225
  • 发表时间：
    2016
  • 期刊：
    园艺学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    高真真;王东岭;付喜玲;徐功勋;陈修德;李玲;高东升
  • 通讯作者：
    高东升
基于P_V下垂系数修正的并联逆变器输出功率成比例分配实现
  • DOI：
    10.19595/j.cnki.1000-6753.tces.2016.02.015
  • 发表时间：
    2016
  • 期刊：
    电工技术学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    金国彬;罗安;陈燕东;肖华根;李玲
  • 通讯作者：
    李玲

其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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