TREM2基因在晚发型AD（LOAD）中介导Aβ吞噬与炎症调节的机制研究

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
81460183
项目类别：
地区科学基金项目
资助金额：
47.0万
负责人：
石胜良
依托单位：
广西医科大学
学科分类：
H0901.神经系统发育与代谢异常
结题年份：
2018
批准年份：
2014
项目状态：
已结题
起止时间：
2015-01-01 至2018-12-31

项目参与者：
曾丽；李家鑫；王成志；刘倩倩；林泓宇；饶源；曾爱苹；蒙宁钦；
关键词：
晚发型阿尔茨海默病炎症调控阿尔茨海默病 TREM2基因 Aβ吞噬

项目摘要

Abnormal accumulation and neuronal toxicity of extracellular β-amyloid (Aβ) are the core and basic pathological features for AD and late-onset Alzheimer's disease (LOAD).Many studies have shown that Triggering Receptor Expressed on Myeloid cells 2 (TREM2 gene) is associated with LOAD. TREM2 can mediate the Aβ phagocytosis of microglia and inflammatory regulation processes by the central nervous system(CNS). However, its exact mechanism is not yet clear. Our research will study both TREM2 gene knockout in AD cell and animal models as well as TREM2 gene overexpression in AD cell model.The lentiviral vector-transfection, real-time PCR, Western blot, immunohistochemistry and behavioral test from the different levels of organization as molecules, cells, tissues and animals' level will be studied to investigate the relationships between TREM2 gene and Aβ phagocytosis as well as the inflammation of the central nervous system. Moreover, we will explore the functions and regulation mechanisms of TREM2 gene and TLRS pathways in mediating Aβ phagocytosis and the nervous inflammation in LOAD.We aim to lay a theoretical foundation for the function of TREM2 gene and develop a new therapeutic target for LOAD in the future.

晚发型阿尔茨海默病（late-onset Alzheimer's disease, LOAD)是阿尔茨海默病的重要分型，其发病的核心与基础是细胞外β-淀粉样蛋白（Aβ)异常集聚以及由其引发的神经细胞毒性作用。研究表明TREM2基因与LOAD发病有关，其在介导小胶质细胞Aβ吞噬以及调节中枢神经炎症中有重要作用，然而，迄今其确切的机制尚未明了。本研究将通过建立敲除与过表达TREM2基因的AD细胞模型以及敲除TREM2基因的动物模型，采用慢病毒载体转染、RT-PCR、Western blot、免疫组化、行为学测试等手段从分子、细胞、组织以及整体水平等多层次研究TREM2基因与Aβ吞噬及中枢炎症的关系；探讨TREM2基因与TLRS通路在LOAD 介导Aβ吞噬及调节神经炎症的作用及调控机制，为揭示TREM2基因在LOAD的作用机制奠定一定的理论基础，为靶向治疗LOAD提供新的靶点。

结项摘要

晚发型阿尔茨海默病（late-onset Alzheimer's;disease,LOAD)是阿尔茨海默病的重要分型，其发病的核心与基础是细胞外β-淀粉样蛋白（Aβ)异常集聚以及由其引发的神经细胞毒性作用，前人的研究已证实TREM2基因参与了晚发型AD（LOAD）发病中Aβ吞噬与炎症的调节，然而其确切的机制尚未明了。本课题通过建立TREM2基因敲除与过表达的AD细胞以及动物模型，通过运用蛋白质生物化学、免疫组织化学等方法与技术，研究TREM2基因与Aβ吞噬、TREM2基因与细胞炎症之间的关系，进而探讨TREM2基因与TLRs通路在Aβ吞噬与细胞炎症调节的调控机制。我们在细胞学的研究结果表明：过表达TREM2基因可促进细胞对Aβ吞噬并抑制TLR2/TLR4/TLR6 蛋白表达以及抑制炎症因子IL-6、IL-1、TNF-a的产生，而敲除TREM2基因则抑制细胞对Aβ的吞噬并促进TLR2/TLR4/TLR6 蛋白表达以及促进炎症因子IL-6、IL-1、TNF-a的产生。由此，我们课题研究得出结论：TREM2通过TLRs通路完成对Aβ介导吞噬以及炎症因子调控。TREM2 基因通过TLR2+TLR4 联合受体完成 Aβ识别并介导下游信号通路完成 Aβ吞噬。而通过 TLR4+TLR6 联合受体并介导下游信号通路产生炎症反应过程。动物层面的实验论证我们已在进行中，期以通过本研究为探讨TREM2基因在LOAD的发病机制奠定一定的理论基础。项目资助发表核心论文6篇，待发表1篇。培养硕士生6名。项目投入经费47万元，支出18.59万元。剩余经费28.41万元，剩余经费计划用于本项目研究后续支出。