金黄色葡萄球菌肠毒素B的B细胞免疫优势表位的鉴定及免疫保护机制研究

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基本信息

  • 批准号：
    31300759
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    22.0万
  • 负责人：
    赵卓
  • 依托单位：
    中国人民解放军第三军医大学
  • 学科分类：
    C0804.自身免疫与免疫耐受
  • 结题年份：
    2016
  • 批准年份：
    2013
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2014-01-01 至2016-12-31

项目摘要

Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) show multiple drug-resistant,serious clinical infection and damage, but at present there is no effective MRSA vaccine that has been successfully developed. Staphylococcal enterotoxin B (SEB) is a major virulence factor of MRSA, and its recombinant mutant can induce effective immune protection.Therefore,it is an important candidate antigen of MRSA vaccine.Our previous study showed that:antibody dependent protective immune effects of SEB show significant difference when assisted with different adjuvants. Effects assisted with Freund's adjuvant adjuvant is better than that with CFA aluminum salt adjuvants.The specific molecular basis and mechanism of the protective response is still not clear. Therefore,this project aims to screen and identify the B cell immunodominant epitopes of SEB by the technology of immunodominant antibody response analysis,and to clarify the immune protective effect and response mechanism of SEB by in vivo and in vitro experiments,then finally put forward a new explanation of the different antibody dependent protective effects of antigen when assisted with different adjuvants,and therefore provide candidate molecule and the theory basis to optimize MRSA vaccine design strategy based on the SEB antigen.
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）呈现多重广泛耐药，临床感染危害严重，但目前尚未成功研制的有效MRSA疫苗。肠毒素Ｂ（SEB）是MRSA的主要毒力因子，其重组突变体可诱导有效的免疫保护，是MRSA疫苗的重要候选抗原。我们前期实验发现：SEB的抗体依赖的免疫保护作用在不同佐剂辅助下存在差异，弗氏佐剂辅助下的免疫保护效果优于铝盐佐剂，该保护性应答的具体分子基础和作用机制尚不明确。因此，本项目拟用抗体免疫优势应答分析技术，对SEB抗原中免疫优势应答的Ｂ细胞表位进行筛选与鉴定，并通过体内外实验阐明其免疫保护作用和应答机制，对不同佐剂辅助下抗体依赖的抗原免疫保护效果差异提出新的解释，为基于SEB抗原的MRSA疫苗设计策略的优化提供候选分子和理论依据。

结项摘要

本课题全面筛选了金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的B细胞免疫优势表位，并对其表位的免疫保护机制进行了研究。基于合成重叠肽的ELISA方法，从SEB抗原中筛选鉴定出6个线性B细胞免疫优势表位：SEB31-48、SEB97-114、SEB133-150、SEB193-210、SEB205-222和SEB247-261(氨基酸残基31-48, 97-114, 133-150, 193-210, 205-222, and 247-261)，其中，SEB31-48, SEB133-150 、 SEB193-210、SEB205-222为四个新发现表位。用优势表位-KLH蛋白免疫小鼠，发现这6个优势表位均有效激发了抗MRSA感染的保护性抗体应答，经抗体亚型分析可知，表位特异性抗体以IgG1亚型为主，其次为IgG2b。进一步，用基因工程方法将6个单肽串联，制备了SEB多表位疫苗。在小鼠模型中，SEB多表位疫苗引起了IgG1为主的SEB特异性应答，应答倾向于Th2型，该多表位抗血清发挥了补体依赖的协同调理吞噬作用。相对于SEB全抗原疫苗，SEB多表位蛋白疫苗能更有效减少小鼠各脏器细菌的定植量。并且，SEB多表位疫苗对分泌SEB的不同近源性的多种临床MRSA菌株有交叉保护效果。本研究为SEB的 B细胞多表位疫苗的人体实验奠定了基础。

项目成果

期刊论文数量（3）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（1）
专利数量（0）
Multiple B-cell epitope vaccine induces a Staphylococcus enterotoxin B-specific IgG1 protective response against MRSA infection.
多 B 细胞表位疫苗可诱导葡萄球菌肠毒素 B 特异性 IgG1 针对 MRSA 感染的保护性反应。
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    Scientific Reports
  • 影响因子：
    4.6
  • 作者：
    Zhu; Jiang;Zeng; Hao;Zou; Quan-Ming;Wu; Chao
  • 通讯作者：
    Chao
Fine-mapping of immunodominant linear B-cell epitopes of the Staphylococcus aureus SEB antigen using short overlapping peptides
使用短重叠肽对金黄色葡萄球菌 SEB 抗原的免疫显性线性 B 细胞表位进行精细定位
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    PLos One
  • 影响因子：
    3.7
  • 作者：
    Jian H;Ya-Fei H;Hao Z; Quan-Ming Z;Chao W
  • 通讯作者：
    Chao W
金黄色葡萄球菌肠毒素B在不同动物模型中的应答和治疗策略研究新进展
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    中国生物制品学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    赵卓;吴超;邹全明
  • 通讯作者：
    邹全明

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  • 通讯作者：
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AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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