溶藻弧菌外膜耐药功能蛋白组的研究

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基本信息

  • 批准号：
    40976080
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    47.0万
  • 负责人：
    李惠
  • 依托单位：
    中山大学
  • 学科分类：
    D0604.生物海洋学与海洋生物资源
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

抗生素滥用导致水产品药物残留等食品安全问题，直接或间接影响人类健康和生态环境。因此，积极开展水产动物病原菌耐药分子机制的研究，对减少和避免抗生素的使用具有非常重要的意义。本课题拟以严重危害水产养殖动物的溶藻弧菌为研究对象，在前期对卡那霉素、红霉素、四环素、萘啶酮酸、链霉素、氯霉素耐药菌外膜差异蛋白质研究的基础上，采用基于native-SDS/PAGE的蛋白质组学技术路线结合蛋白质-蛋白质相互作用技术方法，开展溶藻弧菌外膜耐药功能蛋白质复合物组的研究,发现和鉴定相关耐药功能蛋白质。进一步采用基因敲除和高表达方法对关键外膜耐药蛋白复合物的耐药功能进行功能研究。同时研究这些关键蛋白质复合物组对不同抗生素反应的规律，初步阐明外膜耐药蛋白质复合物组的耐药作用机制。在此基础上，优选抗体作用靶点，探讨抗体靶向配合低浓度抗生素抑制耐药菌的可行性。

结项摘要

抗生素滥用导致水产品药物残留等食品安全问题，直接或间接影响人类健康和生态环境。因此，积极开展水产动物病原菌耐药分子机制的研究，对减少和避免抗生素的使用具有非常重要的意义。项目以模式大肠杆菌和严重危害水产养殖动物的溶藻弧菌为研究对象，采用基于native-SDS/PAGE的蛋白质组学技术路线结合蛋白质-蛋白质相互作用技术方法，开展溶藻弧菌和大肠杆菌外膜耐药功能蛋白质复合物组的研究。结果发现，溶藻弧菌巴洛沙星耐药菌、四环素耐药菌、链霉素耐药菌、头孢他啶耐药菌、氯霉素耐药菌发生变化的蛋白复合物依次有6、4、4、4、5种，主要与能量代谢相关的蛋白质复合物，其中溶藻弧菌Na+-NQR系统复合物极为重要。为确认这些发现，采用基因克隆、原核表达、重组蛋白纯化和抗体制备，对这些差异蛋白及其复合物进行了验证。进一步采用缺失菌株和高表达菌株对这些重要复合物进行功能研究，结果发现能量代谢相关复合物组功能下调，导致质子动力势下降，使抗生素进入细胞减少。这一机制阐明对理解细菌耐药特性与能量代谢代偿的关系具有重要意义。项目发表论文9篇，其中SCI论文8篇，影响因子均大于3 (大约5的2篇); 部分内容获省科技进步一等奖1项。

项目成果

期刊论文数量（7）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Differentially Expressed Outer Membrane Proteins of Vibrio alginolyticus in Response to Six Types of Antibiotics
溶藻弧菌外膜蛋白对六种抗生素响应的差异表达
  • DOI：
    10.1007/s10126-009-9256-4
  • 发表时间：
    2010-03
  • 期刊：
    Marine Biotechnology
  • 影响因子：
    3
  • 作者：
    Xiong, Xiao-Peng;Wang, Chao;Ye, Ming-Zhi;Yang, Tian-Ci;Peng, Xuan-Xian;Li, Hui
  • 通讯作者：
    Li, Hui
Alterations of protein complexes and pathways in genetic information flow and response to stimulus contribute to Escherichia coli resistance to balofloxacin
遗传信息流中蛋白质复合物和途径的改变以及对刺激的反应有助于大肠杆菌对巴洛沙星的耐药性
  • DOI：
    10.1039/c2mb25090j
  • 发表时间：
    2012-01-01
  • 期刊：
    MOLECULAR BIOSYSTEMS
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Li, Hui;Pan, Jian-Yi;Peng, Xuan-Xian
  • 通讯作者：
    Peng, Xuan-Xian
Complexome of Escherichia coil Envelope Proteins under Normal Physiological Conditions
正常生理条件下大肠杆菌包膜蛋白复合体
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    JOURNAL OF PROTEOME RESEARCH
  • 影响因子：
    4.4
  • 作者：
    Pan, Jian-Yi;Li, Hui;Ma, Yan;Chen, Ping;Zhao, Ping;Wang, San-Ying;Peng, Xuan-Xian
  • 通讯作者：
    Peng, Xuan-Xian
Downregulation of Na(+)-NQR complex is essential for Vibrio alginolyticus in resistance to balofloxacin
Na()-NQR复合物的下调对于溶藻弧菌对巴洛沙星的耐药性至关重要
  • DOI：
    10.1016/j.jprot.2012.03.006
  • 发表时间：
    2012-05-17
  • 期刊：
    JOURNAL OF PROTEOMICS
  • 影响因子：
    3.3
  • 作者：
    Li, Peipei;Liu, Xianjie;Peng, Xuan-Xian
  • 通讯作者：
    Peng, Xuan-Xian
Determination of the heterogeneous interactome between Edwardsiella tarda and fish gills
迟缓爱德华氏菌与鱼鳃之间异质相互作用组的测定
  • DOI：
    10.1016/j.jprot.2011.10.022
  • 发表时间：
    2012-02-02
  • 期刊：
    JOURNAL OF PROTEOMICS
  • 影响因子：
    3.3
  • 作者：
    Liu, Yang;Zhang, Haili;Peng, Xuanxian
  • 通讯作者：
    Peng, Xuanxian

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  • 通讯作者：
    3.China Petroleum Jilin Chemical & Engineeing Cons

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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