LncRNA SH3PXD2A-AS1介导溃疡性结肠炎“炎-癌”转变的作用及 机制研究

LncRNAs play important roles in chronic inflammation and tumorigenesis, but the underlying mechanisms of lncRNAs remain unclear in the inflammatory-to-cancer process. In our previous study, lncRNA SH3PXD2A-AS1 expression was gradually increased in the inflammatory-to-cancer process of ulcerative colitis(UC). High SH3PXD2A-AS1 expression could promote proliferation and inhibit apoptosis by activation of STAT3 signaling in this process. So, we hypothesized that p-STAT3-induced upregulation of SH3PXD2A-AS1 could repress SOCS3 and p21 expressions by binding to CoREST and DNMT1, and further lead to UC ingravescence and accelerate inflammatory-to-cancer process. Based on our study of lncRNAs and the inflammatory-to-cancer process of UC, we will explore the regulatory effect of SH3PXD2A-AS1 on STAT signaling using ChIP, RIP, RNA-pulldown, and etc. All the findings could reveal the underlying regulatory mechanism of SH3PXD2A-AS1 in the inflammatory-to-cancer process and provide more research and theoretical basis for CAC prevention and diagnosis.

LncRNA在慢性炎症及肿瘤发生中起重要作用，但在“炎-癌”转变中机制不明。本课题组发现lncRNA SH3PXD2A-AS1表达量在溃疡性结肠炎“炎-癌”转变中渐升高，起促增殖、抑凋亡作用，且可能通过STAT通路介导溃疡性结肠炎“炎-癌”转变。据此提出假设：在溃疡性结肠炎中，p-STAT3诱导SH3PXD2A-AS1表达，SH3PXD2A-AS1通过募集绑定CoREST及DNMT1抑制下游靶基因SOCS3、p21，进一步激活STAT通路，加重溃疡性结肠炎，促进溃疡性结肠炎“炎-癌”转变。在申请人既往研究lncRNA及溃疡性结肠炎“炎-癌”转变的基础上，采用ChIP、RIP、RNA-pulldown等技术，以SH3PXD2A-AS1为切入点，探索其对STAT通路的调节作用，揭示其调控溃疡性结肠炎“炎-癌”转变的分子机制，为结肠炎相关性结肠癌的预防和诊断提供部分研究基础和理论依据。

分析TCGA和GEO数据库的数据，发现lncRNA SH3PXD2A-AS1可能与结肠癌（CRC）进展相关。采用qRT-PCR检测SH3PXD2A-AS1在CRC组织标本和细胞系中的表达水平。通过细胞活力检测、Transwell法、流式细胞术、裸鼠移植瘤模型等方法研究其生物学功能。通过RIP、CHIP、Rescue assay检测SH3PXD2A-AS1介导基因表达的分子机制。我们首次发现SH3PXD2A-AS1在CRC组织和细胞系中的表达水平显著上调，其高表达与CRC患者的肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移有关。敲降SH3PXD2A-AS1后抑制了CRC细胞的增殖、迁移和侵袭，在体内抑制了移植瘤的生长。机制研究表明SH3PXD2A-AS1可以通过与EZH2相互作用，抑制P57和KLF2的表达。结论:本研究首次证明了SH3PXD2A-AS1在CRC中具有致癌基因的作用，可能成为CRC患者新的诊断或治疗靶点。.由于 SH3PXD2A-AS1与小鼠之间不具有同源性，选择小鼠与人存在同源性的lncRNA H19在动物水平进行研究。实验小鼠分为对照组及模型组，饲养7天、70天（炎症组）、90天（肠癌组）留取小肠标本及外周血。通过HE染色分析小鼠肠道病理特征。应用qRT-PCR检测小鼠肠道组织及肿瘤组织中的部分炎症因子和lncRNAH19的表达水平。采用ELISA实验检测小鼠血清中TNF-α的浓度。结果：对照组第7、70、90天小鼠小肠粘膜未见明显炎症反应，模型组第70天小鼠小肠黏膜出现炎症反应，模型组第90天小鼠肠腔内出现赘生物，HE染色提示为肿瘤。肠癌组肠道肿瘤组织中LncRNA H19 、IL-6、iNOS的表达量、血清中TNF-α浓度较炎症阶段（第70天）明显升高，但均高于对照组。结论：成功构建了小鼠炎症相关性结肠癌模型，lncRNA H19在炎症相关性结肠癌的发生中起到了一定的作用。为炎症相关性结肠癌发生的研究提供了新的视角。.本课题组采用qRT-PCR、CCK-8、皮下移植瘤模型、RIP、CHIP、Western blot等方法研究了MAPKAPK5-AS1影响CRC增殖机制的研究，实验结果提示LncRNA MAPKAPK5-AS1通过部分结合组蛋白EZH2，进而抑制下游靶基因p21的表达，从而促进CRC细胞增殖。

内容获取失败，请点击重试