基于内质网应激的“调脏通络”电针保护DPN大鼠神经细胞凋亡的效应机制研究

DPN is a high incidence of large harm disease with complex etiological factor, which pathogenesis is not very clear, and no specific treatment. Our previous discovery, showed that adjusting Zang organs and clearing out collaterals with electric acupuncture had therapeutic effects indeed, and can improve pathology and conduction of DPN rat tail nerve. New research confirms that has close relationship between the incidence of DPN and the endoplasmic reticulum stress (ERS) mediated apoptosis in peripheral nerve cells, which provides a new way of thinking to Effect mechanism of DPN treatment study by using adjusting Zang organs and clearing out collaterals with electric acupuncture. Therefore, the group proposed the hypothesis of" adjusting Zang organs and clearing out collaterals with electric acupuncture through the intervention of ERS-mediated apoptosis of peripheral nerves, and then protect nerve cells and treat DPN". It is plan to choose DPN rat as study object for utilizing those techniques such as TUNEL staining，immunofluorescence，confocal laser scanning and three-dimensional reconstruction. To observe the proportion of apoptotic cells in peripheral nerve, peripheral nerve cell morphology and density of epidermal nerve fibers with adjusting Zang organs and clearing out collaterals with electric acupuncture, and analyze the relationship between these changes with the ERS levels. The results not only deeply reveal the effect mechanisms by using adjusting Zang organs and clearing out collaterals with electric acupuncture for DPN treatment, but also provide the basis for new strategies and prevention of DPN.

糖尿病周围神经病变(DPN)是一种发病率高、危害大、病因复杂的疾病，其发病机制尚不十分明确，且无特效治疗药物。课题组前期发现，调脏通络电针治疗DPN疗效确切，并能改善DPN大鼠尾神经组织病理和传导功能。最新研究证实，内质网应激(ERS)介导的周围神经细胞凋亡与DPN发病关系紧密，为调脏通络电针治疗DPN的效应机制研究提供了新的思路。因此，课题组提出“调脏通络电针通过干预ERS介导的周围神经细胞凋亡，继而保护神经细胞并治疗DPN”的假说，计划以DPN大鼠为研究对象，利用TUNEL染色、免疫荧光、激光共聚焦扫描与三维重建等技术，观察调脏通络电针对ERS介导的周围神经细胞凋亡比例、周围神经细胞形态和表皮神经纤维密度的影响，并分析上述变化与ERS水平的关系。研究结果既可深入揭示调脏通络电针治疗DPN的效应机制，也能为DPN的防治提供新的策略和依据。

糖尿病（DM）及其并发症是目前危害人类健康的主要疾病，糖尿病周围神经病（DPN）作为DM主要并发症之一，对患者的身体健康和生活质量均造成了严重危害，并发展成为涉及广泛的公共卫生难题。. DPN的发病机制尚不明确，且无特效治疗药物，而针灸疗法对DPN具有良好的治疗作用。通过大量中医基础理论研究后，课题组成员认为血瘀络阻为DPN病机之标，肺脾肾虚应为 DPN病机之本，在DPN的治疗上应以调脏通络为主，创立了“调脏通络电针疗法”治疗DPN，且该疗法在临床研究中取得较好的疗效。. 课题组成员通过前期理论研究发现，DPN的发病与周围神经细胞的凋亡关系密切，最基本的病理变化是周围神经轴突髓磷脂的分解，甚至是周围神经轴突的萎缩和消失。因此，课题组成员从针刺影响周围神经细胞凋亡的角度开展针刺治疗DPN的机制研究工作。. 为阐释“调脏通络”电针治疗DPN的作用机制，本研究采用一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法，建立DPN大鼠动物模型，通过观察“调脏通络”电针对DPN大鼠体重、血糖、热敏感值、神经传导速度等的影响，以及坐骨神经形态学改变、坐骨神经细胞凋亡比例、坐骨神经中内质网应激（ERS）的标志性蛋白GRP78和Caspase12的表达水平，分析“调脏通络”电针对DPN的治疗效果及其作用机制。结果证实，“调脏通络”电针能够降低坐骨神经细胞凋亡比例，保护坐骨神经形态，且能抑制GRP18、Caspase12的表达从而减轻ERS水平。. 通过本项目的研究， 初步揭示了“调脏通络”电针治疗DPN的机制，充分证明“调脏通络”电针对DPN具有良好的治疗作用。本项目的研究结果，为临床采用针灸疗法治疗DPN，提供了可靠的、高质量的实验依据，证明针灸疗法可以作为DPN的主要治疗手段，用于DPN患者的临床治疗，有助于切实提高DPN的临床治疗水平，提高DPN患者的生活质量。

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