抑制PI3K/Akt/mTOR/p70S6K 信号通路促进巨噬细胞自体吞噬稳定易损斑块的分子机制研究

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
30971216
项目类别：
面上项目
资助金额：
31.0万
负责人：
陈文强
依托单位：
山东大学
学科分类：
H0214.动脉粥样硬化与动脉硬化
结题年份：
2012
批准年份：
2009
项目状态：
已结题
起止时间：
2010-01-01 至2012-12-31

项目参与者：
宋兆峰；郭涛；殷乐；安贵鹏；陈良；李燕；
关键词：
巨噬细胞 signaling PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号通路自体吞噬易损斑块动脉粥样硬化 .PI3K/Akt/mTOR/p70S6K pathway/macrophage/.autophagy/atherosclerosis/vulnerable　plaque

项目摘要

巨噬细胞的大量侵润是动脉粥样硬化（AS）易损斑块的主要特征，减少斑块中的巨噬细胞进而稳定易损斑块是本课题的主要目的。为了探明PI3K/Akt/mTOR/p70S6K 信号通路在巨噬细胞自体吞噬稳定易损斑块中的作用及分子机制，在体外巨噬细胞与PI3K、Akt抑制剂、雷帕霉素以及mTOR siRNA共培养，证实信号通路在巨噬细胞自体吞噬中的作用。在球囊损伤腹主动脉内皮+高胆固醇饲料喂养的实验兔中转染野生型p53基因，建立易损斑块的动物模型。分别给于PI3K、Akt抑制剂、雷帕霉素及mTOR SiRNA干预，以血管内超声技术观察斑块破裂的发生率和影像学特征，应用病理学、RT-PCR、Western-blot等技术从分子生物学、细胞学及在体实验等方面阐明抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路促进巨噬细胞自体吞噬、抑制炎症反应、稳定易损斑块的作用，结果对于预防急性心脑血管事件将产生重要的理论意义。

结项摘要

巨噬细胞的大量侵润是动脉粥样硬化（AS）易损斑块的主要特征，减少斑块中的巨噬细胞进而稳定易损斑块是本课题的主要目的。本课题主要是为了探明PI3K/Akt/mTOR/p70S6K 信号通路在促进巨噬细胞自体吞噬进而稳定易损斑块中的作用及分子机制。我们课题组严格按照课题计划和设计要求，三年内按时完成了预定的目标。我们已经完成家兔巨噬细胞的分离培养，并分别在体外针对PI3K/Akt/mTOR/p70s6K信号传导通路的分子PI3K、Akt、mTOR进行药物抑制或基因沉默干预处理。研究结果显示选择性抑制PI3K/Akt/mTOR/p70s6K信号传导通路能够促进巨噬细胞自体吞噬，其中mTOR发挥核心作用。转染p53基因成功构建了家兔易损斑块的动物模型，该模型具有与人类易损斑块相似的特征：较薄的纤维帽、较大的脂质核、活跃的炎症反应，能够为体内PI3K/Akt/mTOR/p70s6K信号传导通路的研究提供了非常适宜的研究对象。将PI3K、Akt抑制剂、雷帕霉素及mTOR SiRNA干预已构建的易损斑块的家兔模型，结果显示：与对照组比较，治疗组炎性因子的血清学水平和mRNA及蛋白表达明显下降，IVUS检查发现斑块部位的EEMA、PA、PB%显著降低，斑块中巨噬细胞的自噬体明显增加，自噬相关蛋白LC3-II的表达显著增加，自噬相关基因Beclin 1的mRNA相对表达水平显著上调，病理学研究发现治疗组斑块的易损指数及斑块破裂率显著下降。结论：选择性抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路能诱导巨噬细胞自体吞噬，减少斑块巨噬细胞的浸润, 抑制炎症反应进而稳定动脉粥样硬化易损斑块。部分研究成果已经在《Circulation Journal》、《Hypertension Research》、《中华心血管病杂志》、《中华超声影像学杂志》、《山东大学学报》上发表，部分研究成果在《中国病理生理杂志》、《中华老年医学杂志》上接受发表，部分已经投递相关杂志后续发表。