银翘散提取物对流感病毒感染诱导激活的NF-κB和Raf/MEK/ERK信号途径的影响研究

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基本信息

  • 批准号：
    81102871
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    20.0万
  • 负责人：
    时宇静
  • 依托单位：
    中国中医科学院中药研究所
  • 学科分类：
    H3213.中药抗病毒与感染药理
  • 结题年份：
    2014
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2014-12-31

项目摘要

流感病毒感染致病涉及病毒与机体两个复杂生物系统及其二者间的相互作用。流感病毒激活的宿主NF-κB和Raf/MEK/ERK信号途径在病毒复制和细胞因子分泌中发挥着重要作用。本课题以NF-κB和Raf/MEK/ERK信号途径为切入点，采用real time RT-PCR技术、western blotting方法、免疫荧光技术、液相芯片技术，观察甲型流感病毒感染A549、AECs细胞模型和小鼠流感病毒感染模型肺泡灌洗液中病毒载量、NF-κB活性、ERK活性、细胞因子表达量、病毒RNP蛋白的变化，从细胞、分子、基因水平阐明病毒感染的生物学机制，并在此基础上探讨中药银翘散水煎剂及其黄酮类和木脂素类有效部位的抗病毒作用机理。为寻找有效的抗病毒新靶标、分析银翘散抗病毒作用的药效物质基础、揭示中药整体调节的抗病毒机理、开辟治疗的新途径提供依据。

结项摘要

1 研究目的：流感病毒感染致病涉及病毒与机体两个复杂生物系统及其二者间的相互作用。流感病毒激活的宿主NF-κB和Raf/MEK/ERK信号途径在病毒复制和细胞因子分泌中发挥着重要作用。本课题以NF-κB和Raf/MEK/ERK信号途径为切入点，观察甲型流感病毒感染细胞模型和小鼠流感病毒感染模型肺组织中的病毒载量、NF-κB活性、ERK活性、细胞因子表达量的变化，从细胞、分子、基因水平阐明病毒感染的生物学机制，并在此基础上探讨中药复方银翘散提取物的抗病毒作用机理。本课题的完成对在分子水平上了解病毒和宿主的相互作用以及研究中医药治疗病毒感染性疾病的分子机制具有重要意义。为寻找有效的抗病毒药物，揭示中药整体调节的抗病毒机理、开辟治疗的新途径提供依据。.2 实验方法：本研究分为体内实验和体外实验，受试物为化学方法提取分离的银翘散水提物和有效部位，研究采用real time RT-PCR技术、western blotting方法、免疫荧光技术、液相芯片技术，多时间点动态观察甲型流感病毒PR8株感染小鼠模型和A549细胞模型病毒载量、NF-κB活化、ERK活性、细胞因子表达量的变化。.3 实验结果：研究结果显示，银翘散提取物可以降低模型小鼠的肺指数和病毒载量以及A549细胞的病毒载量，银翘散提取物可以降低体内外流感病毒感染模型的ERK磷酸化水平，可抑制NF-κB的活化，可以降低流感病毒感染诱导的KC/IL-8，IL-6，RANTES，TNF-α和MCP-1细胞因子表达。.4 实验结论：银翘散提取物可能通过抑制Raf/MEK/ERK和NF-κB信号通路，发挥抗病毒作用，同时下调KC/IL-8，IL-6，MCP-1，RANTES和TNF-α细胞因子的表达。.5 研究成果：通过本研究的实施，发表国内核心期刊文章1篇，获得国内发明专利1项，并参加国内外学术交流2次。

项目成果

期刊论文数量（1）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
MEK1/2抑制剂U0126体内外抗流感病毒研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    世界中西医结合杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    田红娇;时宇静;钟菊迎;刘方舟;高英杰;崔晓兰
  • 通讯作者：
    崔晓兰

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    王雅欣;包蕾;赵荣华;耿子涵;鲍岩岩;孙静;时宇静;周利润;陈梦苹;徐英莉;庞博;郭姗姗;崔晓兰
  • 通讯作者：
    崔晓兰

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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