基于CCI大鼠局部微环境的改变研究拨法“通经止痛”的效应机制

Peripheral nerve injury is a common clinical disease, the main symptom being local or distal limb pain or numbness; the treatment of this disease with tuina yields satisfactory results. But the explanation of the mechanism behind this clinical effectiveness stops at the classical theory level, such as "Tongjing Zhitong", etc, mechanism and classical theory have yet to find a meeting point. Our initial research revealed that tuina can increase the expression of neurotrophic factors in muscle, nerve, spinal cord and other tissues, and thereby accelerate neural repair. Recent research also suggests that, interrupted axoplasmic transport hinders neural repair; increased expression of inflammatory cytokines and pain-producing substances are key causes of inflammatory pain and neuropathic pain. Therefore, this study adopts various techniques including HRP retrograde tracing, myelin staining, electrocardiography, ELISA, immunohistochemistry, Western-blot, etc, and focuses on the key indicator motor proteins (dynein, kinesin, dynactin), expression changes in inflammatory cytokines (IL-1, IL-6, TNF- α, PGE2), and combined ethological and morphological changes of the internal micro-environment (site of injury, spinal cord, serum) of CCI (chronic constriction injury of the sciatic nerve) model rats, in order to reveal the underlying scientific basis for tuina’s effect of "moving the meridians to stop pain”.

周围神经损伤是以局部或四肢远端疼痛、麻木为主要症状的临床常见病症，运用推拿治疗，效果满意。但临床对其起效的机制阐述，尚停留在经典理论层面，如“通经止痛”等，经典与机理之间尚未找到契合点。我们前期研究发现，推拿能够通过提高肌肉、神经、脊髓等组织中神经营养因子的表达，促进损伤神经的修复。近期研究亦表明，轴浆运输的中断阻碍了损伤神经的修复；促炎性因子表达的升高、致痛物质的产生，是导致炎性痛与神经性病理痛发生的关键。因此，本次研究拟采用HRP逆行示踪、神经髓鞘染色、神经电生理检测、酶联免疫、免疫组化、Western-blot等技术，着眼于CCI（坐骨神经慢性压迫损伤摸型）大鼠体内微环境（损伤点、脊髓、血清）中关键指标马达蛋白（dynein、kinesin、dynactin）、促炎性因子（IL-1、IL-6、TNF-α、PGE2）表达的变化，结合行为学、形态学改变，揭示推拿“通经止痛”的科学内涵。

【研究背景】本课题组通过前期研究证实，推拿作为治疗周围神经损伤疾病的常用疗法，效果显著。推拿能够促进外周及中枢神经营养物质的产生，帮助轴浆运输功能的恢复，对受损神经的修复起到积极的影响，最终改善实验动物的行为学表现。.【主要研究内容】本研究采用CCI（坐骨神经慢性压迫损伤）模型，运用“按摩推拿手法模拟仪”定性、定量模拟拨法的操作，将神经电生理及形态学作为评价轴浆运输功能的依据，于脊髓中观察马达蛋白表达的变化，探寻拨法治疗周围神经损伤的“通经”机制；将行为学作为疗效评价的依据，于脊髓、血液中观察炎性因子的表达变化，探寻拨法治疗周围神经损伤的“止痛”机制。最终从CCI大鼠局部微环境的改变探讨拨法“通经止痛”的效应机制，揭示其科学内涵。.【重要结果】本次研究从神经电生理与轴浆运输功能角度探讨拨法对CCI模型大鼠的影响，证实拨法可加快神经传导速度，缓解痛觉功能障碍，促进大鼠坐骨神经感觉功能的恢复，促进轴浆运输功能的恢复、神经轴突的再生，达到“通经”的作用；从光热耐痛阈、炎症反应角度探索拨法对CCI大鼠的影响，证实拨法可明显上调大鼠光热耐痛阈值，减轻其痛觉过敏状态；同时抑制外周血清、脊髓等局部微环境中炎性因子（IL-1、IL-6、TNF-α、PGE2）的表达，达到“消炎止痛”的作用，从而达到了治疗周围神经损伤的目的。.【科学意义】本次研究以“穴位-神经-肌肉”结合点作为干预部位，将经络腧穴理论、靶源性神经营养因子理论、解剖学三者有机结合在一起，通过对CCI大鼠不同组织中关键物质含量定性、定量检测，观察、分析其变化原因，并结合组织形态学、行为学的改变，深入探讨概括推拿临床疗效的传统经典理论——“通经止痛”的效应机制。进一步探索了推拿治疗周围神经损伤的内在机理，找到传统理论与临床疗效之间的契合点，为推拿的临床诊治提供理论依据与实验支撑，并丰富推拿学传统经典的现代理论，为临床推拿治疗周围神经损伤的机理揭示奠定基础，最终推动推拿学科的整体发展。

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