LGP2在大黄鱼免疫识别过程中的角色与调控

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31402273
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    24.0万
  • 负责人：
    邹鹏飞
  • 依托单位：
    集美大学
  • 学科分类：
    C1901.水产学基础
  • 结题年份：
    2017
  • 批准年份：
    2014
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2015-01-01 至2017-12-31

项目摘要

Currently, the function of pattern recognition receptor LGP2 in the host immune-related signalling pathway is still controversial in vertebrates. This proposed project is designed to identify LGP2 in large yellow croaker Larimichthys crocea, and to investigate the expression patterns and subcellular localization of LGP2 in cells. The function of LGP2 in the host immune response and regulation of immune-related gene expression will also be determined by over-expression of LGP2 in fish cells. The roles of different domains of LGP2, and the regulation of LGP2 in RIG-I/MDA5-mediated type I IFN promoter activation will be determined by luciferase activity assay. It is also expected that the proteins associated with LGP2 will be revealed by phage display technology and co-immunoprecipitation assays, and the mechanism of LGP2 in the immune-related signalling pathway will be further clarified. It is believed that the completion of this proposed research will provide substantial information for understanding comprehensively the role and mechanism of fish LGP2 in the pathogen recognition, activation as well as regulation of the signalling pathway and immune response, which will also have an important role in the disease control and prevention of marine commercial fishes.
脊椎动物中，模式识别受体LGP2在宿主免疫相关信号通路中的功能目前尚存在较大争议。本课题拟对大黄鱼LGP2分子进行克隆，研究其表达特征及亚细胞定位；通过LGP2的过表达研究LGP2对免疫相关效应因子的表达调控，以及在宿主免疫反应中的作用；通过荧光素酶实验分析LGP2不同结构域的功能以及在RIG-I/MDA5介导的I型干扰素活化过程中的调节作用；采用噬菌体展示技术与免疫共沉淀实验对与LGP2相互作用的蛋白进行筛选与鉴定，阐明鱼类LGP2对免疫相关信号通路调控的分子作用机制。该项目的完成将揭示LGP2在鱼类抗病免疫中的病原识别、分子激活及调控机制，进一步丰富和完善脊椎动物模式识别受体的研究，同时本项目的研究成果还为海水经济鱼类制定合理的疾病防御和防治策略提供指导。

结项摘要

细菌或病毒等病原微生物感染宿主细胞后，宿主细胞可以通过模式识别受体（PRRs）识别病原相关分子模式（PAMPs），启动机体的免疫应答，在宿主的先天性免疫反应中发挥着重要作用。其中，脊椎动物的RIG样受体包括RIG-I、MDA5和LGP2，主要在宿主的抗病毒免疫反应中发挥作用。本项目以海水经济鱼类大黄鱼为实验对象，对大黄鱼模式识别受体LGP2的功能进行了研究：克隆并鉴定了大黄鱼LGP2分子，阐明了其亚细胞定位及在大黄鱼组织中的表达规律，通过RNA-Seq技术分析了其高表达对宿主其他基因表达的影响，解析了LGP2在鱼类中介导的免疫信号途径及调控机制，还对LGP2分子的不同结构域在LGP2所介导的IRF3、IRF7等信号通路中的作用进行了分析；此外，本项目也在大黄鱼中克隆了细胞信号转导的重要接头分子IRAK4，阐明了其基因组结构、亚细胞定位、在大黄鱼不同组织中的表达规律以及在不同病原刺激下的表达规律，揭示了IRAK4在NF-κB激活中的作用，并发现大黄鱼IRAK4可与MyD88相互结合，并显著抑制MyD88介导的NF-κB的激活。在项目研究的开展过程中，我们通过对大黄鱼基因组信息进行分析，结果显示大黄鱼具有模式识别受体RIG-I受体家族中的LGP2和MDA5分子，但缺乏RIG-I的同源基因，可能是在进化过程中发生了基因丢失事件，为了进一步揭示模式识别受体中的RIG样受体在硬骨鱼类免疫中的作用，我们还以模式鱼类斑马鱼为实验对象，克隆了斑马鱼RIG-I及其异构体，阐明了RIG-I及其异构体的亚细胞定位与表达规律，揭示了RIG-I及其异构体在介导I型干扰素活化中的作用，阐明了RIG-I及其异构体在宿主细胞抗病毒感染中的作用，并揭示RIG-I及其异构体均可与接头蛋白MAVS相互结合，且RIG-I的异构体在RIG-I/MAVS介导的抗病毒免疫信号通路中起到增强子的作用。本项目的完成，对于揭示硬骨鱼类模式识别受体的功能及其细胞信号转导的分子机制具有重要意义。

项目成果

期刊论文数量（6）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（3）
NOD2 in zebrafish functions in antibacterial and also antiviral responses via NF-kappa B, and also MDA5, RIG-I and MAVS
斑马鱼中的 NOD2 通过 NF-kappa B、MDA5、RIG-I 和 MAVS 发挥抗菌和抗病毒反应的作用
  • DOI：
    10.1016/j.fsi.2016.05.031
  • 发表时间：
    2016
  • 期刊：
    Fish & Shellfish Immunology
  • 影响因子：
    4.7
  • 作者：
    Zou Peng Fei;Chang Ming Xian;Li Ying;Xue Na Na;Li Jun Hua;Chen Shan Nan;Nie Pin
  • 通讯作者：
    Nie Pin
Higher antiviral response of RIG-I through enhancing RIG-I/MAVS-mediated signaling by its long insertion variant in zebrafish
RIG-I 通过其长插入变体在斑马鱼中增强 RIG-I/MAVS 介导的信号传导，从而产生更高的抗病毒反应
  • DOI：
    10.1016/j.fsi.2014.12.001
  • 发表时间：
    2015-03-01
  • 期刊：
    FISH & SHELLFISH IMMUNOLOGY
  • 影响因子：
    4.7
  • 作者：
    Zou, Peng Fei;Chang, Ming Xian;Nie, Pin
  • 通讯作者：
    Nie, Pin
Zebrafish as a Model for the Study of Host-Virus Interactions
斑马鱼作为研究宿主病毒相互作用的模型
  • DOI：
    10.1007/978-1-4939-7237-1_2
  • 发表时间：
    2017-01-01
  • 期刊：
    INNATE ANTIVIRAL IMMUNITY: METHODS AND PROTOCOLS
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Zou, Peng Fei;Nie, Pin
  • 通讯作者：
    Nie, Pin
Retinoic acid-inducible gene I (RIG-I)-like receptors (RLRs) in fish: current knowledge and future perspectives
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  • DOI：
    10.1111/imm.12714
  • 发表时间：
    2017-05-01
  • 期刊：
    IMMUNOLOGY
  • 影响因子：
    6.4
  • 作者：
    Chen, Shan Nan;Zou, Peng Fei;Nie, Pin
  • 通讯作者：
    Nie, Pin
Molecular and immune response characterizations of IL-6 in large yellow croaker (Larimichthys crocea)
大黄鱼 (Larimichthys crocea) IL-6 的分子和免疫反应特征
  • DOI：
    10.1016/j.fsi.2016.01.041
  • 发表时间：
    2016-03-01
  • 期刊：
    FISH & SHELLFISH IMMUNOLOGY
  • 影响因子：
    4.7
  • 作者：
    Zhu, Qian;Li, Chan;Yao, Cui-Luan
  • 通讯作者：
    Yao, Cui-Luan

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高分辨率极化SAR图像水平集分割
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  • 发表时间：
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  • 通讯作者：
    邹鹏飞

其他文献

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TRIF依赖的信号通路在大黄鱼抗病免疫反应中的作用
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AI项目解读示例

课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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