基因工程化的肌源干细胞移植对括约肌缺陷型女性压力性尿失禁的治疗与再生机制的实验研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81070473
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    30.0万
  • 负责人：
    宋岩峰
  • 依托单位：
    厦门大学
  • 学科分类：
    H0409.女性生殖系统损伤与修复
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

压力性尿失禁是中老年妇女的多发病，现有的治疗难以解决尿道括约肌缺陷，干细胞注射治疗为解决该难题提供了新的方向，体内的微环境是移植干细胞赖以生存的重要条件。IGF-1是肌再生调控和促进细胞增殖生长的重要因子，纤维蛋白胶是重要的组织工程支架。本研究以动物实验为基础，构建IGF-1及GFP双基因慢病毒载体，转染大鼠肌源干细胞，筛选并培养抗性细胞；体外实验探讨携带IGF-1基因及纤维蛋白胶支架对肌源干细胞生物学特性的影响；构建大鼠括约肌缺陷型压力性尿失禁模型，将基因工程化肌源干细胞联合纤维蛋白胶移植大鼠近端尿道，对移植后的大鼠近端尿道进行组织学、功能学评估，及肌源干细胞在体内的存活情况；另一方面，利用基因芯片技术分析携带IGF-1基因的肌源干细胞移植后4周近端尿道组织的差异表达谱；为寻找细胞治疗最佳方案，探索干细胞治疗后肌再生机制，为干细胞治疗的临床应用奠定基础

结项摘要

本项目的完成情况：.1、体外MDSCs的分离、纯化、分化和鉴定。.2、IGF-1＆eGFP重组慢病毒表达载体的构建、鉴定及其MDSCs中的表达。 .3、IGF-1基因修饰的MDSCs移植治疗FSUI大鼠模型的作用及机制。 .⑴体外建立H2O2诱导细胞凋亡模型，探讨IGF-1基因修饰的MDSCs 抑制细胞凋亡的可能机制。结果表明发现H2O2能够诱导MDSCs caspase酶依赖性凋亡，而IGF-1能够部分拮抗H2O2作用，上调抗凋亡相关蛋白P-AKT、NFκB、Bcl-2以及Bcl-xl的表达（p﹤0.05），降低caspase-3、PARP的水解程度（p﹤0.01）。.⑵建立FSUI大鼠模型，以1×106个/只细胞数注入尿道距膀胱约0.5cm处，结果表明：治疗1周后，IGF-1/MDSCs组的细胞存活率显著高于GFP/MDSCs组（p﹤0.01），4周后，IGF-1/MDSCs组的细胞分化强度强于GFP/MDSCs组。IGF-1/MDSCs组和GFP/MDSCs组在治疗1、2、4周后无论是MBP还是ALPP均显著高于PBS组（p﹤0.01），低于假手术组（p＞0.05），其中IGF-1/MDSC组略高于GFP/MDSCs组（p＞0.05）。治疗4周后，IGF-1/MDSCs组新生的毛细血管密度显著高于GFP/MDSCs组（p﹤0.01），后者又高于PBS组及S组（p﹤0.01）。细胞治疗的各个时间点，IGF-1/ MDSCs组的IGF-1和VEGF蛋白表达量显著升高（p﹤0.01），而GFP/MDSCs组在细胞治疗1、2周后，明显高于S组及PBS组（p﹤0.01），4周后，降至正常水平（p＞0.05）。组织形态学观察发现：IGF-1/ MDSCs组有较多新生血管及肌纤维形成。定量肌/胶原比率发现：S组﹥IGF-1/MDSCs组﹥GFP/MDSCs组﹥PBS组（p﹤0.05）。.本项目取得的成果.本研究表明IGF-1可以优化移植微环境，促进移植MDSCs的生存、生长与分化。同时通过其自分泌或旁分泌的形式释放IGF-1、VEGF，共同参与尿道括约肌的成肌修复，并促进局部毛细血管的再生化，具有潜在治疗伴有ISD的SUI作用。.本课题培养了三名博士研究生。研究成果以论文形式提供，部分的研究成果尚在整理过程中，已发表论文如正文中所述。

项目成果

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专著数量（0）
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会议论文数量（0）
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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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