甘露糖基转移酶基因MaMnt1在金龟子绿僵菌侵染致病过程中的表达特征及功能研究

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30900964
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    20.0万
  • 负责人：
    金凯
  • 依托单位：
    重庆大学
  • 学科分类：
    C1406.生物防治
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

昆虫病原真菌是重要的生防资源，阐明其侵染致病的分子机制对于充分挖掘其生防潜力具有重要意义。在前期工作中，从感病蝗虫体内的金龟子绿僵菌的cDNA文库中，发现了一个编码甘露糖基转移酶基因MaMnt1。甘露糖蛋白是细胞壁的重要成分，其糖链分布在细胞最外层，保护细胞壁，是昆虫免疫识别病原真菌中的抗原物。甘露糖基转移酶是参与蛋白糖基化修饰过程的重要酶类。在人类病原真菌中，该基因通过影响细胞壁的结构和组成，进而影响毒力。在昆虫病原真菌中，对蛋白的糖基化修饰还缺乏研究，MaMnt1的功能尚不清楚。本项目将利用报告基因gfp，结合冷冻切片等技术，分析MaMnt1在金龟子绿僵菌侵染致病过程中的表达特征；采用RNAi和超量表达等技术，研究MaMnt1与金龟子绿僵菌毒力的关系。本项目研究将阐明MaMnt1在真菌侵染致病过程中的作用，有助于理解昆虫病原真菌侵染致病的分子机理，可望为菌株改良提供目的基因和理论依据。

结项摘要

昆虫病原真菌是重要生防微生物，其细胞壁主要由多糖和蛋白组成，糖基化修饰对细胞壁合成至关重要。本研究以绿僵菌为材料，克隆了一个甘露糖基转移酶基因MaMnt1及其上游启动子序列。利用MaMnt1启动子控制egfp的绿僵菌转化子进行MaMnt1的表达特征研究，发现MaMnt1在菌丝生长和侵染寄主过程中表达水平较高。进一步分析绿僵菌基因组，发现了另两个甘露糖基转移酶基因MaMnt2和MaMnt3。分别敲除MaMnt1、MaMnt2和MaMnt3进行逆境敏感性分析表明，MaMnt1缺失后绿僵菌的抗氧化能力下降明显，菌体的细胞壁完整性和抗高渗能力无变化；MaMnt2和MaMnt3的单缺失对菌体细胞壁完整性、抗高渗和抗氧化能力均无显著影响。毒力分析表明MaMnt1、MaMnt2和MaMnt3单敲除后对绿僵菌毒力无显著影响。为了明确MaMnt1、MaMnt2和MaMnt3三个基因之间的功能是否存在互补机制，通过软件分析从这3个基因的cDNA序列中分别选取一段干扰效率高且序列特异性好的序列进行串联，构建MaMnt1/2/3的共干扰载体，并转化绿僵菌，筛选得到MaMnt1/2/3的共干扰转化子。逆境敏感性分析发现，共干扰MaMnt1/2/3三个基因后菌体细胞壁完整性和抗氧化能力均显著降低，表明MaMnt1、MaMnt2和MaMnt3在维持绿僵菌细胞壁的完整性上存在功能上的互补。毒力分析发现，共干扰MaMnt1/2/3三个基因后绿僵菌毒力显著下降，表明MaMnt1、MaMnt2和MaMnt3在维持绿僵菌的正常侵染致病上也存在功能上的互补。真菌细胞壁中的多糖主要由葡聚糖、甘露糖和几丁质构成。葡聚糖合成酶为真菌细胞壁骨架成分——葡聚糖合成的关键酶。为进一步阐明细胞壁多糖的作用，本研究还克隆了绿僵菌的β-1,3-葡聚糖合成酶基因MaFKS并研究了其功能。与野生型菌株相比，MaFKS干扰转化子的细胞壁完整性和抗高渗能力显著下降，逆境条件下的产孢量显著降低。测定菌丝壁β-1,3-葡聚糖的含量，发现减少MaFKS的表达降低了绿僵菌菌丝壁β-1,3-葡聚糖的含量。本项目中有关MaFKS的研究内容已在SCI核心期刊上公开发表论文1篇，有关MNTs研究内容的英文初稿已撰写，预计能够在SCI核心期刊上公开发表。另外，在本项目的资助下已申请专利2项，其中1项已获权。所以，本项目达到了预期的研究目标。

项目成果

期刊论文数量（1）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
beta-1,3-葡聚糖合成酶影响蝗绿僵菌的细胞壁完整性，渗透压耐受性和产孢。
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    Current Genetics
  • 影响因子：
    2.5
  • 作者：
    杨敏;金凯;夏玉先
  • 通讯作者：
    夏玉先

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI：
    {{ item.doi || "--"}}
  • 发表时间：
    {{ item.publish_year || "--" }}
  • 期刊：
    {{ item.journal_name }}
  • 影响因子：
    {{ item.factor || "--"}}
  • 作者：
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者：
    {{ item.author }}

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ patent.updateTime }}

其他文献

猪miR-124靶向IQGAP2调节巨噬细胞内沙门氏菌的增殖
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2020
  • 期刊：
    南方农业科学 Journal of Southern Agriculture
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    陈旺;邓榆;殷俊;官州;金凯;石博妹;黄廷华;姚敏
  • 通讯作者：
    姚敏
绿僵菌异戊烯基转移酶基因的克隆及表达谱分析
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    微生物学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    殷从松;金凯;夏玉先
  • 通讯作者：
    夏玉先
凯氏定氮法与杜马斯燃烧法测定大豆粗蛋白的比较研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中国畜牧杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    韩博;张文娟;金凯;贺平丽;马曦
  • 通讯作者：
    马曦
基于随形水路技术的带把双色水杯注塑模具设计
  • DOI：
    10.19491/j.issn.1001-9278.2018.01.022
  • 发表时间：
    2018
  • 期刊：
    中国塑料
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李桂金;匡唐清;金凯
  • 通讯作者：
    金凯
HLS800MeV直线加速器相位控制系统的研制
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    核技术
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    王雪涛;黄贵荣;林宏翔;周伟实;金凯;贾大春;刘勇涛
  • 通讯作者：
    刘勇涛

其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI：
    {{ item.doi || "--" }}
  • 发表时间：
    {{ item.publish_year || "--"}}
  • 期刊：
    {{ item.journal_name }}
  • 影响因子：
    {{ item.factor || "--" }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者：
    {{ item.author }}
empty
内容获取失败，请点击重试
重试联系客服
title开始分析
查看分析示例
此项目为已结题，我已根据课题信息分析并撰写以下内容，帮您拓宽课题思路：

AI项目思路

AI技术路线图

金凯的其他基金

锌指蛋白MaNCP1介导硝酸盐代谢途径调控蝗绿僵菌产孢方式转换的作用机制
  • 批准号：
  • 批准年份：
    2021
  • 资助金额：
    59 万元
  • 项目类别：
    面上项目
锌指蛋白MaNCP1介导硝酸盐代谢途径调控蝗绿僵菌产孢方式转换的作用机制
  • 批准号：
    32172479
  • 批准年份：
    2021
  • 资助金额：
    59.00 万元
  • 项目类别：
    面上项目
几丁质合成对绿僵菌侵染致病的作用机制
  • 批准号：
    31471820
  • 批准年份：
    2014
  • 资助金额：
    85.0 万元
  • 项目类别：
    面上项目
O-甘露糖基化修饰影响绿僵菌细胞壁组成、结构及侵染致病的作用机制
  • 批准号：
    31270040
  • 批准年份：
    2012
  • 资助金额：
    80.0 万元
  • 项目类别：
    面上项目

相似国自然基金

{{ item.name }}
  • 批准号：
    {{ item.ratify_no }}
  • 批准年份：
    {{ item.approval_year }}
  • 资助金额：
    {{ item.support_num }}
  • 项目类别：
    {{ item.project_type }}

相似海外基金

{{ item.name }}
{{ item.translate_name }}
  • 批准号：
    {{ item.ratify_no }}
  • 财政年份：
    {{ item.approval_year }}
  • 资助金额：
    {{ item.support_num }}
  • 项目类别：
    {{ item.project_type }}
{{ showInfoDetail.title }}

作者：{{ showInfoDetail.author }}

知道了

AI项目解读示例

课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
关闭
close
客服二维码