基于Microtox技术的中药毒性分级原理与标准研究

In view of lack of objective evaluation standard and technical problems of Chinese medicine toxicity grading, we are going to study the effects of 15 kinds of representative toxic Chinese medicine and 5 kinds of Non- toxic traditional Chinese Medicine on luminous intensity of luminescent bacteria (Vibrio fischeri) based on Microtox Technique systematically. The process and characteristics of dose-time-effect relationship of luminous intensity, the relationship of luminous intensity and toxic substances, luminous intensity and toxic target organs, are evaluated and compared objectively. The ultimate goal is to establish a kind of new, fast, simple, objective toxicity grading standard of Chinese medicine based on Microtox Technique and achieve major breakthroughs of safety evaluation and risk assessment of toxic Chinese medicine.

针对现行中药毒性分级缺少客观评价方法和技术瓶颈等难题，基于本实验建立专有的中药综合毒性快速检测Microtox（微毒测试）技术平台，选择现行《药典》及本科教材记载的最具代表性的15味有毒中药（大毒、有毒、小毒各5味）以及5味无毒中药为研究对象，系统研究有毒中药的对发光菌（费氏弧菌）发光强度影响的药效-毒性效应谱、剂量-反应曲线和剂量-时间-反应关系，客观描述有毒中药毒性效应动力学过程和作用特点，以IC50值及标准毒物（如氯化汞）相对发光强度参比值，客观评价和比较有毒中药毒性大小，系统研究有毒中药发光抑制毒性效应与毒性物质、毒性表现（强度、靶器官）之间的内在规律，发展快捷、简便、客观的基于Microtox毒性测试表征的有毒中药毒性分级标准，实现有毒中药安全性评价以及风险分级评定的重大突破。

针对现行中药毒性分级缺少客观评价方法和技术瓶颈等难题，基于中药综合毒性快速检测Microtox技术平台，选择最具代表性的15味有毒中药以及5味无毒中药为研究对象，系统研究有毒中药的对发光菌（费氏弧菌）发光强度影响的药效-毒性效应谱、剂量-反应曲线和剂量-时间-反应关系，客观描述有毒中药毒性效应动力学过程和作用特点，以IC50值客观评价和比较有毒中药毒性大小，系统研究有毒中药发光抑制毒性效应与毒性物质、毒性表现（强度、靶器官）之间的内在规律。研究结果表明：1.针对费氏弧菌建立的测试体系具有良好的特异性、稳定性、灵敏度、准确度及适应性，可用于中药综合毒性的测试；2.川乌、草乌、马钱子、巴豆、天仙子、山豆根、附子、雷公藤、苍耳子、半夏、吴茱萸、川楝子、重楼、蛇床子、细辛、人参、黄芪、当归、麦冬、巴戟天基于Microtox技术综合毒性检测的IC50值分别为0.023，0.164，0.068，0.029，0.013，0.042，0.308，0.017，0.033，0.067，0.011，0.006，0.069，0.006，0.016，0.066，0.091，0.024，0.083，0.038g生药/ml。3. 川乌、山豆根、吴茱萸中药效-毒性成分含量高低与提取方法有关，对于水溶性差的中药成分应用该技术方法，难以达到较好的评价结果。因此，对于Microtox技术体系还有待进一步研究，以扩大该技术体系的适用范围。

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