乳腺感染导致奶牛乳蛋白含量降低的信号转导机制

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
31472249
项目类别：
面上项目
资助金额：
85.0万
负责人：
武瑞
依托单位：
黑龙江八一农垦大学
学科分类：
C1809.临床兽医学
结题年份：
2018
批准年份：
2014
项目状态：
已结题
起止时间：
2015-01-01 至2018-12-31

项目参与者：
王建发；周玉龙；杨彬；贺显晶；徐丹丹；李启涛；曲艳鹏；
关键词：
奶牛乳蛋白信号转导乳腺炎

项目摘要

Bovine mammary infection can lead to milk composition changes and milk protein decrease and result in a major economic impact in the dairy industry. However, the underlying mechanism of mammary infection induced milk protein depression remains unclear. We hypothesize that the crosstalk between the TLRs/NF-κB and mTOR pathways, the SOCS and JAK-STAT pathways may have a potential role in mammary infection induced milk protein depression in dairy cows based on the theory of milk protein synthesis and the innate immune response of bovine mammary gland to E. coli and S. aureus. The project will use western blotting, real-time RT-PCR, ELISA, EMSA and other methods to characterize the sequential change of the crosstalk between the TLRs/NF-κB and mTOR pathways, the SOCS and JAK-STAT pathways, the transcriptional activity of NF-κB and STAT5, the expression of pro-inflammation cytokine and milk protein genes in dairy cow and mammary epithelial cells after LPS/LTA challenge so as to identify the signal transduction pathway in mammary infection induced milk protein depression in dairy cows. These results will provide scientific basis to further study the regulatory mechanism of milk protein synthesis of and improve the nutritional quality of cow's milk.

奶牛乳腺感染可导致乳蛋白产量降低，然而乳腺感染导致乳蛋白含量降低的分子机制尚不清晰。本项目在认识奶牛乳腺天然免疫以及乳蛋白合成调控网络基础上，聚焦于奶牛乳腺感染时TLRs/NF-κB信号通路与PI3K-Akt-mTOR信号通路的交互作用，以及SOCS分子可能参与介导乳腺上皮细胞PRL、GH和胰岛素抵抗上。在体研究奶牛乳腺自然感染和实验性感染条件下TLRs/NF-κB、PI3K-Akt-mTOR、SOCS、JAK-STAT信号通路、炎性细胞因子水平及乳蛋白合成情况的变化；体外研究干预相关信号通路对实验性感染乳腺上皮细胞其它信号通路的时序表达差异、相互作用，炎性细胞因子、乳蛋白合成水平，以及SOCS表达水平与PRL、GH和胰岛素抵抗的相关性。以期揭示乳腺感染导致乳蛋白产量降低的信号转导机制，为深入研究乳蛋白合成调控机制提供科学依据，为通过人工干预手段来提高牛奶营养品质奠定研究基础。

结项摘要

奶牛乳腺感染可导致乳蛋白产量降低，然而乳腺感染导致乳蛋白含量降低的分子机制尚不完全清晰。申请人在充分认识奶牛乳腺天然免疫以及乳蛋白合成调控网络基础上，推测奶牛乳腺感染时TLRs/NF-κB信号通路与PI3K-Akt-mTOR信号通路的交互作用，以及SOCS分子可能参与介导乳腺上皮细胞PRL、GH和胰岛素抵抗，进而导致乳蛋白合成相关信号通路失活，抑制乳蛋白的合成。在本项目的资助下，我们检测了LPS和LTA刺激奶牛乳腺上皮细胞后TLRs/NF-κB、PI3K-Akt-mTOR、SOCS、JAK-STAT信号通路、炎性细胞因子水平、紧密连接功能及乳蛋白合成情况的变化；研究了干预相关信号通路对实验性感染乳腺上皮细胞其它信号通路的时序表达差异、相互作用，炎性细胞因子、乳蛋白合成水平，以及SOCS表达水平与PRL抵抗的相关性。研究发现，LPS或LTA处理奶牛乳腺上皮细胞后TLRs/NF-κB/SOCS通路活化，PI3K-Akt-mTOR、JAK-STAT信号通路收到抑制，炎性细胞因子水平升高，紧密连接功能降低；过表达SOCS3后再用PRL刺激乳腺上皮细胞，PRL刺激乳蛋白合成的能力受到抑制。该研究为深入认识乳蛋白合成调控机制提供了研究依据，为通过人工干预手段来提高牛奶营养品质奠定了研究基础。