淀粉分子链重构制备低热量糊精的酶学基础研究

项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    31730067
  • 项目类别:
    重点项目
  • 资助金额:
    311.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    C2002.食品生物化学
  • 结题年份:
    2022
  • 批准年份:
    2017
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2018-01-01 至2022-12-31

项目摘要

Low caloric dextrin is a special form of soluble dextrin rich in α-1,2、α-1,3、α-1,6 glycosidic bonds or cyclic sugar chain structure. Due to its digestive enzyme-resisting properties, low calorie dextrin has been supplemented in diets as an effective intervention measure for the control of sub-health problems such as obesity. Low caloric dextrin is mainly obtained through molecular reconstruction using starch as the raw material. Current process for its preparation is low in efficiency and high in cost, and is thus unable to meet the demands of the consumer society. The key problems in this process are the lack of specific transglycosidases and the lack of an effective measure for controlling the enzymatic reaction. In the preliminary results, we have identified more than ten different enzymes for the preparation of low calorie dextrin, including branching enzyme, α-glucosidase, and α-cyclodextrin glycosyltransferase. The proposed project will further explore the identification of new enzymes; and investigate enzyme properties, structure and function relationship, as well as the mechanism of the transglycosylation reaction. Based on these studies, the function of enzymes will be optimized through molecular modification to improve their catalytic efficiency and applicability. The mechanism for the directional and quantitative control of the complex enzyme conversion system will also be elucidated. This project provides the indispensible theoretical basis not only for the mechanistic investigation of transglycosidases but also for the more efficient preparation of low calorie dextrin, and has significance to the development of starch deep processing industry.
低热量糊精是一类富含α-1,2、α-1,3、α-1,6糖苷键或环状糖链结构的可溶性糊精的总称。低热量糊精具有抗人体消化酶特性,增加其在摄入组分中的含量是防控肥胖等亚健康问题的有效膳食干预手段。低热量糊精主要是以淀粉为原料,通过分子链重构获得。目前制备效率低、生产成本高、难以满足大众消费者的需求。导致此问题的关键是缺乏适用于低热量糊精制备体系的特异性转糖苷酶和酶反应过程调控手段。前期工作中,本课题组已获得10余种可用于低热量糊精制备的转糖苷酶,包括分支酶、α-葡萄糖苷酶以及α-环糊精葡萄糖基转移酶。项目拟进一步挖掘新酶,研究各类酶特性、结构及转苷作用机制,并在此基础上,通过分子改造优化酶功能以提高其效率和应用适应性,阐明定向有序及定量可控的复合酶转化机制。本项目将为转糖苷酶作用机制研究以及低热量糊精高效制备提供重要的理论基础,对淀粉深加工行业的发展具有积极意义。

结项摘要

淀粉是食用碳水化合物的主要来源,在加工过程中可通过分子重构引入抗/慢消化性糖苷键或将糖链环化获得低热量糊精。低热量糊精具有抗人体消化酶特性,增加其在摄入组分中的含量是防控肥胖等亚健康问题的有效膳食干预手段。目前,低热量糊精制备中存在高性能转糖苷酶缺乏、作用机制不够明确、以及复合酶反应体系调控机制不清晰等关键科学问题,导致制备过程效率低、生产成本高,难以满足大众消费需求。针对该现状,项目围绕淀粉分子重构制备低热量糊精用转糖苷酶的基因挖掘、催化机制、分子改造和复配应用开展了多维、多角度、全链条式研究。在酶的基因挖掘方面,通过序列遗传进化和优势特征基序分析,挖掘并鉴定获得了应用性能优良的α-葡萄糖苷酶、分支酶、4,6-α-葡聚糖转移酶、分支蔗糖酶和环糊精葡萄糖基转移酶等转糖苷酶18个;在酶机制解析及分子改造方面,解析了新型转糖苷酶的晶体结构,利用前期建立的转糖苷酶多尺度模拟分子计算方法解析了该类酶催化转苷反应和键型特异性的分子机制,并进一步通过分子改造提升了转苷活性和产物中抗消化键型的比例,其中抗消化键比例最高可达92%;此外,项目还深入研究了制备低热量糊精的多酶协同反应路径及复合酶协同关系,成功构建了不同类型转糖苷酶的协同反应体系,实现了系列低热量糊精的高效酶法制备。项目共发表SCI论文21篇(第一标注17篇);申请发明专利19件(美国专利3件),其中3件中国发明专利及2件美国专利获授权;培养研究生24名,其中博士研究生7名;此外,转糖苷酶基因挖掘相关成果是国家技术发明二等奖“淀粉加工关键酶制剂的创制及工业化应用技术”的重要组成部分。本项目研究不仅获得了新型转糖苷酶,丰富了该酶类家族结构与功能关系的酶学理论知识,还创立了高效低热量糊精复合酶转化体系,为低成本制造低热量糊精产品以满足大众人群需求提供了重要的理论基础和关键技术。

项目成果

期刊论文数量(23)
专著数量(0)
科研奖励数量(1)
会议论文数量(0)
专利数量(19)
改性麦芽糊精的酶法制备及其在烘焙制品中的应用
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
    食品与发酵工业
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    李娜;陈晟;吴敬
  • 通讯作者:
    吴敬
Characterization of a new 4,6-α-glucanotransferase from Limosilactobacillus fermentum NCC 3057 with ability of synthesizing low molecular mass isomalto-/maltopolysaccharide
来自发酵柠檬酸杆菌 NCC 3057 的新型 4,6-α-葡聚糖转移酶的表征,具有合成低分子量异麦芽糖/麦芽多糖的能力
  • DOI:
    10.1016/j.fbio.2021.101514
  • 发表时间:
    2021-12
  • 期刊:
    Food Bioscience
  • 影响因子:
    5.2
  • 作者:
    Weikang Yang;Lufei Sheng;Sheng Chen;Lei Wang;Lingqia Su;Jing Wu
  • 通讯作者:
    Jing Wu
Cyclodextrin enhanced the soluble expression of Bacillus clarkii -CGTase in Escherichia coli
环糊精增强大肠杆菌中克氏芽孢杆菌-CGTase的可溶性表达
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2018
  • 期刊:
    BMC Biotechnology
  • 影响因子:
    3.5
  • 作者:
    Lei Wang;Sheng chen;Jing Wu
  • 通讯作者:
    Jing Wu
Recent Advances in Recombinant Protein Production by Bacillus subtilis
枯草芽孢杆菌生产重组蛋白的最新进展
  • DOI:
    10.1146/annurev-food-032519-051750
  • 发表时间:
    2020-01-01
  • 期刊:
    ANNUAL REVIEW OF FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY, VOL 11
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    Zhang, Kang;Su, Lingqia;Wu, Jing
  • 通讯作者:
    Wu, Jing
Efficient secretory expression of Bacillus stearothermophilus α/β-cyclodextrin glycosyltransferase in Bacillus subtilis
枯草芽孢杆菌中嗜热脂肪芽孢杆菌α/β-环糊精糖基转移酶的高效分泌表达
  • DOI:
    10.1016/j.jbiotec.2021.03.011
  • 发表时间:
    2021-03-21
  • 期刊:
    JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
  • 影响因子:
    4.1
  • 作者:
    Su, Lingqia;Li, Yunfei;Wu, Jing
  • 通讯作者:
    Wu, Jing
共 16 条
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基于短小芽孢杆菌转录组的强启动子鉴定
  • DOI:
    10.13995/j.cnki.11-1802/ts.026660
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    2021
  • 期刊:
    食品与发酵工业
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    姚动邦;张康;朱昫飏;吴敬
  • 通讯作者:
    吴敬
异淀粉酶在α-环糊精制备中的应用及条件优化
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
    基因组学与应用生物学
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    冉红艳;段绪果;吴敬;吴丹
  • 通讯作者:
    吴丹
大肠杆菌alpha;-溶血素分泌途径研究进展
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
    微生物学报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    宿玲恰;陈晟;吴敬
  • 通讯作者:
    吴敬
定向进化提高来源于Arthrobacter ramosus 的MTHase的热稳定性
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2021-03
  • 期刊:
    生物技术通报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    陈春;宿玲恰;夏伟;吴敬
  • 通讯作者:
    吴敬
锰钴镍氧浸没式探测器制备及性能
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
    红外与毫米波学报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    欧阳程;吴敬;高艳卿;黄志明
  • 通讯作者:
    黄志明
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    面上项目