P450 BM-3单加氧酶的定向进化以及突变酶的结构与功能研究

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30570411
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    25.0万
  • 负责人：
    梅乐和
  • 依托单位：
    浙大宁波理工学院
  • 学科分类：
    C0505.蛋白质、多肽与酶生物化学
  • 结题年份：
    2008
  • 批准年份：
    2005
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2006-01-01 至2008-12-31

项目摘要

研究拟将基因工程、蛋白质工程和计算机模拟技术相结合提高酶的稳定性、催化性能、扩大底物专一性为研究目标，选择已知晶体结构和氨基酸序列并具有重要价值的P450 BM-3酶为研究对象，采用酶分子的定向进化技术，人为地创造特殊的进化条件，模拟自然进化机制，构建人工突变酶库，再通过一定的筛选或选择方法最终获得预先期望的具有比天然酶活力更高、稳定性更好和广泛底物专一性的的进化酶。通过对突变进化酶的生物化学性质及催化性能的表征和空间结构的模拟，分析突变酶的结构信息，研究突变位点与酶结构、酶催化活性之间的关系，探索模型蛋白结构和功能的关系，并将其用于指导定点突变的理性进化，结合应用前景，将P450 BM-3用于催化吲哚合成染料靛蓝，研究催化反应的作用机理，并在此基础上将酶分子定向进化技术研究平台推广至其他有研究意义和应用前景的酶的改造。

结项摘要

项目成果

期刊论文数量（33）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（13）
专利数量（0）
Optimization of fermentation conditions for P450 BM-3 monooxygenase production by hybrid design methodology
通过混合设计方法优化 P450 BM-3 单加氧酶生产的发酵条件
  • DOI：
    10.1631/jzus.2007.b0027
  • 发表时间：
    2007
  • 期刊：
    Journal of Zhejiang University SCIENCE B
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
  • 通讯作者：
离子液体中脂肪酶催化拆分外消旋烯丙酮醇反应
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    催化学报，2006,27(9):799-804
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
  • 通讯作者：
Biosynthesis of gamma-aminobutyric acid (GABA) using immobilized whole cells of Lactobacillus brevis,
使用固定化短乳杆菌全细胞生物合成γ-氨基丁酸（GABA），
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
  • 通讯作者：
响应面法优化工程菌产细胞色素P450 BM-3的发酵条件
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2006
  • 期刊：
    化工学报，2006,57(5):1187-1192
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
  • 通讯作者：
硅胶柱层析法分离普那霉素
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    浙江大学学报：工学版，2008，42（5）：895-899
  • 影响因子：
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  • 作者：
  • 通讯作者：

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其他文献

Process modeling of in situ-adsorption of pristinamycin in fermentation by Streptomyces pristinaespiralis
原始螺旋链霉菌发酵原位吸附原始霉素的过程模型
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2010
  • 期刊：
    Huagong Xuebao/CIESC Journal
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    郑喜;梅乐和;张达;金志华
  • 通讯作者：
    金志华
利用荧光光谱法研究脲和盐酸胍诱导谷氨酸脱羧酶的去折叠
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2016
  • 期刊：
    高校化学工程学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    胡升;黄俊;柯丕余;赵伟睿;吕常江;王进波;尚龙安;梅乐和
  • 通讯作者：
    梅乐和
羧基化磁性微球固定化谷氨酸脱羧酶
  • DOI：
    10.11949/j.issn.0438-1157.20161301
  • 发表时间：
    2017
  • 期刊：
    化工学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李佳男;谢湉;胡升;谢东芳;方卉;梅乐和;黄俊;王进波;姚善泾
  • 通讯作者：
    姚善泾
酸胁迫下短乳杆菌谷氨酸脱羧酶系统关键基因的表达及酶活性响应
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    高校化学工程学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    赵伟睿;胡升;梅乐和;姚善泾
  • 通讯作者：
    姚善泾
重组谷氨酸脱羧酶的表达条件优化、纯化及酶学性质研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    发酵科技通讯
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    范恩宇;梅乐和;胡升;黄俊
  • 通讯作者：
    黄俊

其他文献

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梅乐和的其他基金

基于酶家族共进化网络解析的谷氨酸脱羧酶构效关系研究及酶分子定向设计
  • 批准号：
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    58 万元
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    面上项目
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    2016
  • 资助金额：
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    面上项目
酸环境胁迫下乳酸菌谷氨酸脱羧酶应答机制和功能改造研究
  • 批准号：
    21176220
  • 批准年份：
    2011
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    60.0 万元
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    面上项目
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  • 项目类别：
    面上项目

相似国自然基金

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相似海外基金

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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