癌/睾丸抗原表位疫苗诱导的特异性T细胞及其在抗多发性骨髓瘤免疫中作用与机制研究

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
81172884
项目类别：
面上项目
资助金额：
60.0万
负责人：
王月丹
依托单位：
北京大学
学科分类：
H1111.疫苗和免疫预防
结题年份：
2015
批准年份：
2011
项目状态：
已结题
起止时间：
2012-01-01 至2015-12-31

项目参与者：
白慧卿；薛殷彤；朱蕴兰；胡彦；邓珂；张秀春；徐兰；刘姚萍；初明；
关键词：
疫苗 T细胞多发性骨髓瘤癌/睾丸抗原微电子纳米细胞对芯片检测技术

项目摘要

本研究拟在前期工作的基础上，根据已获得的多发性骨髓瘤细胞的癌/睾丸抗原（C/T抗原）的表达谱和相应的T细胞抗原表位序列，采用单纯多肽疫苗和口服沙门氏菌菌毛疫苗等不同形式的以CT抗原表位为基础的疫苗，在体内和体外激发特异性的T细胞应答。以来自骨髓瘤患者的原代培养细胞和荷骨髓瘤的转人HLA-A2基因的小鼠动物为模型，通过微电子纳米细胞对芯片检测技术等方法，将识别C/T抗原表位的T细胞进行单细胞的高通量定性研究。从而对不同形式疫苗诱导的T细胞应答进行较精确的鉴别和研究，并分析可能影响抗肿瘤特异性T细胞功能的因素。为提高抗原表位疫苗在抗多发性骨髓瘤免疫治疗中的效果，提供实验的依据。同时，该研究采用的微电子纳米细胞对芯片检测技术可以提供高通量的细胞毒细胞的单细胞定性研究，为探索精确研究免疫细胞的细胞毒作用的单个细胞对之间的相互作用提供新的方法。

结项摘要

多发性骨髓瘤（MM）是威胁人类健康的恶性浆细胞增生性疾病，预后不良。课题组在本项目的研究过程中，利用PCR、二代测序及免疫组化对人MM细胞株和新鲜的MM 标本中的癌睾丸（CT）抗原表达谱进行进一步的筛选。发现并确定了NY-ESO-1、HCA587 和HCA661 等多种CT抗原在人MM中的表达谱和相应CT抗原HLA-A0201限制性表位的序列。在此基础上，课题组分别通过T2结合实验及ELISPOT等免疫学技术和微纳流体芯片技术，对这些CT抗原特异性表位多肽激活CTL功能进行检测。在此过程中，课题组根据免疫细胞和MM细胞的弹性特征，对前期采用的微纳流体芯片及检测体系进行了改造，大大提高了检测的效率，并最终确定了HCA661-2等表位具有激活特异性CTL产生IFN-γ的作用。课题组建立口服CT抗原表位沙门氏菌毛疫苗，在荷人MM细胞株XG-1的转HLA-A2 基因小鼠的动物模型中，发现其具有抑制肿瘤生长的作用。课题组还建立了可用于快速预测和筛选核酸适配体的天然核酸适配体数据库，并采用ELISA、免疫荧光标记、免疫组化和SPR等多种技术验证了该数据库的可靠性。这些研究成果，不仅可以为筛选可靠的CT抗原表位疫苗提供新实验依据，促进MM免疫治疗的研究，而且也为微纳流体芯片及核酸适配体检测技术在免疫学研究中的应用提供了新的经验，基本达到了本项目计划的预期研究目标。