miR-200b/c/429功能簇对胆管癌干细胞恶性生物学行为的调控及其机制研究

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基本信息

  • 批准号：
    81101621
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    22.0万
  • 负责人：
    王敏
  • 依托单位：
    华中科技大学
  • 学科分类：
    H1810.肿瘤干细胞
  • 结题年份：
    2014
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2014-12-31

项目摘要

我们前期研究发现，胆管癌CD24+CD44+EpCAMhigh细胞有强成瘤、自我更新和分化等肿瘤干细胞样特性，是胆管癌恶性核心细胞。但目前关于其恶性生物学行为分子机制的研究尚未见报道。microRNA对肿瘤恶性生物学行为具有极为重要的调控作用。我们前期通过芯片筛选和验证发现，miR-200b/c/429在胆管癌和胆管癌干细胞中显著低表达。已有研究表明miR-200b/c/429参与调节多种肿瘤干细胞的"干性"，但它在胆管癌干细胞中的作用和机制尚未阐明。基于以上背景，我们通过qRT-PCR和原位杂交方法进一步明确miR-200b/c/429在胆管癌干细胞中的关键亚基；构建慢病毒载体验证其对胆管癌干细胞生物学行为的调节作用；通过荧光报告素酶体系和ChIP方法检测靶基因，阐明其调控机制。以上研究有望进一步揭示胆管癌干细胞恶性生物学行为的分子机制，为特异性靶向胆管癌干细胞的分子治疗奠定基础。

结项摘要

我们在前期研究中发现，胆管癌cd24+cd44+EpMhigh细胞有强成瘤、自我更新和分化等肿瘤干细胞样特性，是胆管癌恶性核心细胞。但目前关于其恶性生物学行为分子机制的研究尚未见报道。microRNA对肿瘤恶性生物学行为具有极为重要的调控作用。前期我们通过芯片筛选和验证发现，miR-200b/c/429在胆管癌和胆管癌干细胞中显著性低表达。已有研究表明miR-200b/c/429参与调节多种肿瘤干细胞的“干性”。针对以上认知，我们通过qRT-PCR和原位杂交方法进一步明确miR-200b/c/429在胆管癌干细胞中的关键亚基——miR-200b/c；构建慢病毒增强表达载体干预胆管癌干细胞，证明miR-200b/c 可抑制胆管癌细胞体内外侵袭、迁移、远处转移；可有效的增加胆管癌细胞对5-氟尿嘧啶的化疗敏感性；可以抑制胆管癌成瘤、克隆形成，并减少胆管癌细胞膜表面 CD133 的表达量；利用荧光报告素酶体系和ChIP方法检测发现miR-200b/c通过miR-200b/c-ROCK2-LIMK-Cofilin 和 ZEB1/2-E-Cadherin 通路共同影响胆管癌的侵袭转移能力，二者具有协同性，同时miR-200b/c通过SUZ12影响胆管癌干细胞效应。通过本项目研究，我们证实了miR-200b/c/429功能簇在胆管癌干细胞生物学特性中的重要调控作用，并初步阐明了作用机制，为胆管癌干细胞的分子靶向治疗提供了坚实的理论基础。

项目成果

期刊论文数量（14）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
改良胰肠、胰胃吻合及胆汁胰液分流在 胰十二指肠切除消化道重建中的应用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    中华普通外科杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    朱峰;王敏;张航;田锐;申铭;石程剑;秦仁义
  • 通讯作者：
    秦仁义
双重连续锁边缝合胰胃吻合术的 临床应用研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
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  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    陈东;朱峰;王敏;田锐;秦仁义
  • 通讯作者：
    秦仁义
循环型miR-141在胆囊癌侵袭转移和复发中的影响及其br / 临床意义br /
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    世界华人消化杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    彭丰;王敏;江建新;田锐;李旭;徐盟;郭兴军;秦仁义
  • 通讯作者：
    秦仁义
胰头部动脉优先离断在根治性胰十二指肠切除术中的运用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    中华消化外科杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    秦仁义;朱峰;王敏;田锐;石程剑;彭丰;徐盟;陈东
  • 通讯作者：
    陈东
十字孢碱对胰腺癌Panc-1细胞增殖和凋亡的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    世界华人消化杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    田锐;徐盟;郭兴军;秦仁义
  • 通讯作者：
    秦仁义

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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