KIR2DS2和KIR2DL5受体对乙肝患者NK细胞功能的影响及其机制

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81171574
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    14.0万
  • 负责人：
    卢志明
  • 依托单位：
    山东大学
  • 学科分类：
    H2103.肝炎病毒与感染
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2012-12-31

项目摘要

乙型肝炎病毒（HBV）感染是我国常见的传染性疾病，NK细胞在HBV感染及转归中发挥重要作用，KIR基因家族参与了NK细胞抗病毒免疫应答的调节。前期研究发现KIR2DS2为HBV感染的易感基因，KIR2DL5为保护基因。本课题拟利用SSP-PCR及流式细胞术筛选出不同KIR2DS2和KIR2DL5表型的乙型肝炎患者 NK细胞，检测其KIR2DS2和KIR2DL5表达水平，研究不同KIR表型对NK细胞杀伤活性、细胞因子分泌功能的影响及其受体通路机制；另外选取NK92细胞系，利用RNA干扰及基因转染技术构建不同KIR2DS2和KIR2DL5表型的NK92细胞系，检测不同KIR表型对NK92细胞杀伤活性和细胞因子分泌功能的影响。探讨HBV感染中，KIR2DS2作为易感基因，KID2DL5作为保护基因的潜在细胞和分子机制，为乙肝感染高危人群的筛查和干预提供理论基础。

结项摘要

研究背景：NK细胞在乙型肝炎病毒感染过程中发挥了重要的作用，KIR参与了NK细胞抗病毒免疫应答的调节。前期研究发现KIR2DS2为HBV感染的易感基因，KIR2DL5为保护基因。.目的：探讨KIR2DS2作为易感基因、KIR2DL5作为保护基因的潜在的细胞和分子机制。.方法：1.利用SSP-PCR进行KIR基因分型，筛选不同KIR2DS2、KIR2DL5表型的慢性乙型肝炎感染患者（CHB）组、自限性乙肝患者(SR)组、乙肝疫苗无应答组及健康对照组，并对各组间KIR基因频率进行比较；2.进行KIR基因配体HLA-Cw基因分型分析；3.免疫磁珠法分离CHB、SR组的外周血NK细胞进行培养；4.LDH释放法研究不同KIR表型的NK细胞的杀伤活性，并用单克隆抗体CDl58f封闭处理NK细胞后与体外培养的K562细胞共培养，检测外周血NK细胞对靶细胞的体外杀伤活性；5.用Real-time PCR的方法检测外周血单个核细胞（PBMC）KIR的表达水平。.结果：1.成功筛选出了不同KIR2DS2、KIR2DL5表型的CHB、SR、无应答组及健康对照组；2. 通过SSP-PCR进行KIR基因分型，发现疫苗无应答组KIR3DS1基因的阳性率较健康对照组升高；3. CHB组HLA-Cw03基因的阳性率较健康对照组及疫苗无应答组高，疫苗无应答组HLA-Cw02和HLA-Cw04基因表型频率较健康对照组升高；4.免疫磁珠法分离出CHB、SR组的外周血NK细胞；5.同一个体对K562细胞不同效靶比之间NK细胞的杀伤活性有一定差异，抗CD158f单抗封闭2DL5后，NK细胞对K562细胞的杀伤活性分别均较阻断前降低，CHB 2DL5-组NK细胞对K562细胞的杀伤活性较SR 2DL5+组、SR 2DL5-组低。.结论：1. KIR3DS1基因可能与机体对乙肝疫苗的无应答状态有关；2. HLA-Cw03可能是乙肝持续感染的易感基因，HLA-Cw02和HLA-Cw04可能是下调抗-HBs 应答水平的等位基因；3.同一个体对K562细胞不同效靶比之间NK细胞的杀伤活性有显著性差异；4.NK细胞对靶细胞的杀伤效应与其KIR的基因型、表型均有一定的相关性。

项目成果

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  • 期刊：
    Journal of Marine Systems
  • 影响因子：
    2.8
  • 作者：
    卢志明
  • 通讯作者：
    卢志明
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  • 影响因子：
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  • 作者：
    王月玲;金炎;白媛媛;宋真;初文君;赵梦麒;郝莹莹;卢志明
  • 通讯作者：
    卢志明

其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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