表达LTB-F乳酸乳球菌抗呼吸道合胞病毒的免疫保护机制研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31160193
  • 项目类别：
    地区科学基金项目
  • 资助金额：
    46.0万
  • 负责人：
    曾韦锟
  • 依托单位：
    昆明学院
  • 学科分类：
    C0806.感染与非感染性炎症
  • 结题年份：
    2015
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2015-12-31

项目摘要

呼吸道合胞病毒(RSV)是严重危害人类健康的病原体，目前尚无有效疫苗。申请者及他人的实验证明，粘膜佐剂LTB同抗原融合，能够增强、调控抗原诱导粘膜免疫应答，尤其是产生特异性sIgA。乳酸乳球菌是安全有效的疫苗活载体，通过口服重组乳酸乳球菌呈递抗原可诱导包括呼吸道在内的粘膜免疫应答。本项目选择RSV保护性抗原F蛋白基因，将LTB与F的基因融合，构建表达LTB-F融合蛋白的重组乳酸乳球菌，口服免疫Balb/c小鼠，用RSV活病毒进行攻毒，检测攻毒前后血液、呼吸道组织和灌洗液的中和抗体、CTL、细胞因子，观察攻毒后小鼠肺组织切片的改变，评价疫苗诱导的体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫应答，进而阐明候选疫苗可能的保护性机制，本项目的完成将为研制新型安全、有效的RSV疫苗奠定理论基础。

结项摘要

呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）是引起婴幼儿下呼吸道感染的最重要病原体，本项目选择RSV主要保护性抗原F蛋白部分片段F212-489，将大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位（LTB）与F212-489基因融合，构建表达LTB-F212-489融合蛋白的重组乳酸乳球菌，口服免疫Balb/c小鼠，检测小鼠血液、呼吸道组织和灌洗液的相关抗体、CTL、脾脏细胞因子生成细胞，用RSV活病毒对免疫后小鼠进行攻毒，检测病毒滴度和小鼠肺组织切片的改变。实验结果表明，该重组乳酸乳球菌能够刺激小鼠产生针对RSV的具有中和作用的特异性sIgA及IgG抗体，免疫后的脾脏淋巴细胞具有特异性的CTL效应，所诱导的免疫应答能避免Th2免疫极化。攻毒实验表明，表达LTB-F212-489的重组乳酸乳球菌免疫后能有效降低RSV感染滴度，并减少肺部的病理损伤。因此，该重组乳酸乳球菌候选疫苗能有效诱导小鼠保护性的细胞免疫及体液免疫，且具有较好的安全性及有效性，为进一步研制新型安全、有效的RSV疫苗奠定了基础。

项目成果

期刊论文数量（23）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
呼吸道合胞病毒F2蛋白与结核分枝杆菌早期分泌抗原靶6蛋白的融合表达及纯化
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    中国生物制品学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    岳婷婷;井申荣;曾韦锟;黄芬
  • 通讯作者：
    黄芬
呼吸道合胞病毒诱导细胞凋亡与自噬
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    生命的化学
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    卿琰;井申荣
  • 通讯作者：
    井申荣
原核增强子样序列筛选及其功能区域鉴定
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    中国生物制品学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    杨思达;黄芬;曾韦锟;井申荣
  • 通讯作者：
    井申荣
乳酸乳球菌表面展示技术中锚定基序应用的研究进展
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    中国生物制品学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    冯金;洪愉;井申荣;曾韦锟
  • 通讯作者：
    曾韦锟
甲型副伤寒沙门菌PagC蛋白在乳酸乳球菌中的表达研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    中国微生态学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    王纪爱;黄芬;井申荣;曾韦锟
  • 通讯作者：
    曾韦锟

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其他文献

戊型肝炎病毒感染性克隆的研究进展
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    医学分子生物学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    杨臣臣;龙飞燕;毕艳红;李云龙;王珏;曾韦锟;井申荣;黄芬
  • 通讯作者：
    黄芬
锌指抗病毒蛋白基因真核表达质粒的构建及其在HepG2细胞中的表达
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    中国生物制品学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    赵显晨;黄芬;井申荣;曾韦锟
  • 通讯作者：
    曾韦锟
Toll样受体4与呼吸道合胞病毒感染关系研究进展
  • DOI：
    10.1016/j.ceramint.2013.08.075
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    云南大学学报自然科学版
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    曾韦锟;岳婷婷;井申荣
  • 通讯作者：
    井申荣
戊型肝炎病毒感染HepG2细胞蛋白质组学研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    医学分子生物学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    毕艳红;崔成成;杨臣臣;井申荣;曾韦锟;黄芬
  • 通讯作者：
    黄芬
信号调节蛋白-α基因真核表达质粒的构建及其在A549细胞中的表达
  • DOI：
    10.1101/827329
  • 发表时间：
    2015
  • 期刊：
    中国生物制品学杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    杨臣臣;毕艳红;曾韦锟;井申荣;黄芬
  • 通讯作者：
    黄芬

其他文献

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norR缺失的甲型副伤寒杆菌耐受烈性噬菌体侵染的机制研究
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    地区科学基金项目

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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