miR-140-5p靶向作用LIFR调控成脂分化机制的研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    81460221
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    47.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    H1901.衰老机制与调控
  • 结题年份:
    2018
  • 批准年份:
    2014
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2015-01-01 至2018-12-31

项目摘要

The research aims to demonstrate that the mechanisms of miR-140-5p targeting on LIFR in adipogenic differentitation. This study is divided into two parts (in vitro and vivo). It will be as an object of study that human bone marrow mesenchymal stem cells differentiate into adipoctyes in vitro. We will confirm the pre-experiments results that miR-140-5p target on the LIFR by real time quantitative PCR,lentiviral-mediated RNAi and western-blotting. Then we identify miR-140-5p target gene is LIFR by up\down regulation of miR-140-5p expression and further confirm the target sites by dual luciferase system.Subsequently,we analysis the JAK2-STAT3 signal pathway, the adipogenic phenotype and the gene expression of adipogenic characteristics by up\down regulation of miR-140-5p and LIFR expression. In vivo, miR-140-5p and LIFR of the different gene expression level are implanted in the nude mice subcutaneous where adipogenic differentitation will happen. After the newborn subcutaneous adipose tissue will be removed. We also make a analysis using the same assessment methods adopted in vitro. In this way, we can further clarify the regulatory mechanisms of adipogenic differentiation which miR-140-5p target on LIFR through JAK2-STAT2 signaling pathway in vitro and vivo experiments. It will provide a new theoretical basis for profound understanding and effective treatment of osteoporosis.
本项目以miRNA为视角,沿着miR-140-5p靶向作用LIFR的思路,朝着阐述miR-140-5p调控成脂分化机制的目标开展工作。研究分体内和体外二部分,体外试验以人类骨髓间充质干细胞成脂分化过程为对象,应用定量PCR、慢病毒介导的RNAi和免疫印迹等技术证实miR-140-5p靶向作用于LIFR这一预实验结果,采用上\下调miR-140-5p表达的方法验证LIFR是miR-140-5p的靶基因,并用荧光素酶报告系统鉴定靶位点;通过改变miR-140-5p、LIFR表达,检测JAK2-STAT3信号通路、成脂表型及成脂特征基因表达。体内试验将miR-140-5p和LIFR表达水平不同的hMSCs植入裸鼠皮下,获取新生组织采用与体外相同的评价指标,从体内和体外二方面阐述miR-140-5p靶向作用LIFR经JAK2-STAT3通路调控成脂分化的机制,为认识和治疗骨质疏松提供新的理论依据。

结项摘要

探索人骨髓间充质干细胞(hMSCs)成骨/成脂分化的分子机制对于防治骨质疏松症具有至关重要的意义。本项目以miRNA为视角,沿着miR-140-5p靶向作用LIFR的思路,朝着阐述miR-140-5p调控成脂分化机制的目标开展了工作。主要研究成果如下:1)完成了 miR-140-5p 及其预测的靶基因白血病抑制因子受体(LIFR) 在成脂分化过程中的变化趋势;运用慢病毒介导的过表达和siRNA干扰研究了 miR-140-5p 对成脂分化的影响。 2)发现了LIFR 上游 miRNA-377-3p 对hMSCs成脂分化具有重要的调控作用;并运用双荧光素酶报告系统、实时荧光定量 PCR 和免疫印迹等技术鉴定靶基因 LIFR 3′UTR 含有miRNA-377-3p 的靶位点。3)证实了LIFR 在 hMSCs 成脂分化中所扮演的重要角色;阐述了LIFR 也是链接细胞因子和 JAK-STATS、MAPK 信号通路之间关键核心点。4)在完成项目计划的基础上,我们探索了miRNA上游调控因子lncRNA可能在hMSCs成骨和成脂分化平衡调控中起到了重要作用,并通过对高通量数据的深入挖掘发现lncRNA TSC22D1-AS1可能以ceRNA模式抑制miR-765靶向作用BMP6调控成骨分化。该项目的研究结果系统阐明了miRNA-140-5p和miRNA-377-3p及其靶基因LIFR调控人骨髓间充质干细胞成脂分化的分子机制,为探索骨质疏松的发病机制提供了有价值的线索。

项目成果

期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Effects of Leukemia Inhibitory Factor Receptor on the Early Stage of Osteogenic Differentiation of HumanBone Marrow MesenchymalCells
白血病抑制因子受体对人骨髓间充质细胞早期成骨分化的影响
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    Folia Biologica
  • 影响因子:
    0.6
  • 作者:
    Wang Tao;Yan Ruiqiao;Xu Xiaoyuan;Cao Lingling;Liu Jianyun;Zheng Meirong;Li Weidong
  • 通讯作者:
    Li Weidong
miR-377-3p regulates adipogenic differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells by regulating LIFR
miR-377-3p通过调节LIFR调控人骨髓间充质干细胞的成脂分化
  • DOI:
    10.1007/s11010-018-3366-0
  • 发表时间:
    2018
  • 期刊:
    Molecular and Cellular Biochemistry
  • 影响因子:
    4.3
  • 作者:
    Li Xingnuan;Yang Yaofang;Yan Ruiqiao;Xu Xiaoyuan;Gao Liyun;Mei Jun;Liu Jianyun;Wang Xinping;Zhang Jie;Wu Ping;Li Weidong;Zhao Zhijun;Xiong Jianjun;Wang Tao
  • 通讯作者:
    Wang Tao
Effects of leukemia inhibitory factor receptor on adipogenic differentiation of human bone marrow mesenchymal cells
白血病抑制因子受体对人骨髓间充质细胞成脂分化的影响
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    Molecular Medicine Reports
  • 影响因子:
    3.4
  • 作者:
    Wang Tao;Yan Ruiqiao;Xu Xiaoyuan;Yu Huan;Wu Jianfang;Yang Yaofang;Li Weidong
  • 通讯作者:
    Li Weidong
miRNA-140-5p 在人骨髓间充质干细胞成脂分化中的表达及其靶基因的预测
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
    南方医科大学学报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    汪涛;颜瑞巧;曹俊;曹玲玲;张铉浦;李兴暖;吴萍;周小鸥;吴建芳;许晓源
  • 通讯作者:
    许晓源
Curcumin represses adipogenic differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells via inhibiting kruppel-like factor 15 expression
姜黄素通过抑制克鲁佩尔样因子15表达抑制人骨髓间充质干细胞的成脂分化
  • DOI:
    10.1016/j.acthis.2018.12.007
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
    Acta Histochemica
  • 影响因子:
    2.5
  • 作者:
    Wang Tao;Yan Ruiqiao;Xu Xiaoyuan;Li Xingnuan;Cao Lingling;Gao Liyun;Liu Jianyun;Zhou Xiaoou;Yu Hui;Wang Xinping;Jiang He;Yang Yaofang
  • 通讯作者:
    Yang Yaofang

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  • 通讯作者:
    汪涛
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  • 发表时间:
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  • 通讯作者:
    汪涛
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  • 通讯作者:
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  • 发表时间:
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  • 期刊:
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  • 作者:
    朱义君;王超;汪涛;任嘉伟
  • 通讯作者:
    任嘉伟

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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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