基于TRYP/CHT双酶-氧化石墨烯修饰的整体柱毛细管电色谱手性药物分离新体系的构建

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81803495
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    21.0万
  • 负责人：
    洪婷婷
  • 依托单位：
    常州大学
  • 学科分类：
    H3410.药物分析
  • 结题年份：
    2021
  • 批准年份：
    2018
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2019-01-01 至2021-12-31

项目摘要

The living systems present distinctive physiological responses to different enantiomeric forms of a single drug, chiral separation exhibits its significant importance nowadays. Enzymes is a type of endogenous chiral selector, and enzyme-based capillary electrochromatography technique can be used to separate different enantiomers with high performance due to the wide varieties of enzymes. However, the application of enzyme-involved chiral selectors is limited since the activity and immobilization capacity of enzymes are easily affected by the immobilization process in capillaries. Following our previous works, a graphene oxide-modified capillary monolith can be applied to build a stable microenvironment for enzyme immobilization and achieve chiral separation with high column efficiency and resolution. Furthermore, for the sake of separating different types of enantiomers, bi-enzymatic system will be developed to combine the enantiomeric separation ability of Trypsin (TRYP) and Chymotrypsin (CHT). In addition, in order to investigate the chiral separation process at a molecular level, frontal analysis technology will also be applied to discuss the interaction mechanism between TRYP/CHT and enantiomers. This project is expected to provide a novel technique for the development of enzyme-based chiral separation systems with high efficiency and broad applicability. Meanwhile, this technology can be utilized to discuss enzyme-enantiomers interaction mechanism.
手性药物的对映异构体在人体内具有不同的药理毒理效应，手性药物的分离具有重要的现实意义。作为内源性手性选择剂，酶分子种类繁多，依托酶类手性固定相的毛细管电色谱技术可实现更为广谱手性药物的快速高效分离。然而，毛细管柱内酶固定化效率不高且易失活，成为酶类手性选择剂应用的难点问题。本项目拟在前期工作基础上，借助自主研发的氧化石墨烯（GO）修饰毛细管整体柱，构建性能稳定的酶固载化微环境，充分发挥GO对酶手性分离能力的提升作用，获得高柱效高分离度的手性分离电色谱图。同时，利用胰蛋白酶（TRYP）与糜蛋白酶（CHT）手性识别效能的互补性，建立基于双酶联用策略的多种类手性药物分离新方法。此外，将该体系与前沿分析法结合，从分子层面探讨各单旋体与TRYP/CHT相互作用对手性分离的影响。此项目有望为实现酶类手性选择剂高效快速广谱的分离性能提供新的技术手段，并为体内酶-手性药物相互作用机理研究提供参考。

结项摘要

手性药物的对映异构体在人体内具有不同的药理毒理效应，手性药物的分离具有重要.的现实意义。作为内源性手性选择剂，酶分子种类繁多，依托酶类手性固定相的毛细管电.色谱技术可实现更为广谱手性药物的快速高效分离。然而，毛细管柱内酶固定化效率不高.且易失活，成为酶类手性选择剂应用的难点问题。本项目拟在前期工作基础上，借助自主.研发的氧化石墨烯（GO）修饰毛细管整体柱，构建性能稳定的酶固载化微环境，充分发挥.GO对酶手性分离能力的提升作用，获得高柱效高分离度的手性分离电色谱图。同时，利用.胰蛋白酶（TRYP）与糜蛋白酶（CHT）手性识别效能的互补性，建立基于双酶联用策略的.多种类手性药物分离新方法。此外，将该体系与前沿分析法结合，从分子层面探讨各单旋.体与TRYP/CHT相互作用对手性分离的影响。此项目有望为实现酶类手性选择剂高效快速广.谱的分离性能提供新的技术手段，并为体内酶-手性药物相互作用机理研究提供参考。

项目成果

期刊论文数量（7）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Microdroplet Synthesis of Silver Nanoparticles with Controlled Sizes
尺寸受控的银纳米颗粒的微滴合成
  • DOI：
    10.3390/mi10040274
  • 发表时间：
    2019-04-01
  • 期刊：
    MICROMACHINES
  • 影响因子：
    3.4
  • 作者：
    Hong, Tingting;Lu, Aijuan;Chen, Chuanpin
  • 通讯作者：
    Chen, Chuanpin
Click chemistry at the microscale
微观尺度的点击化学
  • DOI：
    10.1039/c8an01497c
  • 发表时间：
    2019-03-07
  • 期刊：
    ANALYST
  • 影响因子：
    4.2
  • 作者：
    Hong, Tingting;Liu, Wenfang;Chen, Chuanpin
  • 通讯作者：
    Chen, Chuanpin
Recent advances in the fabrication and application of nanomaterial-based enzymatic microsystems in chemical and biological sciences
基于纳米材料的酶微系统在化学和生物科学中的制造和应用的最新进展
  • DOI：
    10.1016/j.aca.2019.02.031
  • 发表时间：
    2019-08-27
  • 期刊：
    ANALYTICA CHIMICA ACTA
  • 影响因子：
    6.2
  • 作者：
    Hong, Tingting;Liu, Wenfang;Chen, Chuanpin
  • 通讯作者：
    Chen, Chuanpin
Fluorescence coupled capillary electrophoresis as a strategy for tetrahedron DNA analysis
荧光耦合毛细管电泳作为四面体 DNA 分析的策略
  • DOI：
    10.1016/j.talanta.2021.122225
  • 发表时间：
    2021-02-24
  • 期刊：
    TALANTA
  • 影响因子：
    6.1
  • 作者：
    Hong, Tingting;Zheng, Ronghui;Wang, Jianhao
  • 通讯作者：
    Wang, Jianhao
A multichannel microchip containing 16 chambers packed with antibody-functionalized beads for immunofluorescence assay
包含 16 个腔室的多通道微芯片，其中填充有用于免疫荧光测定的抗体功能化珠子
  • DOI：
    10.1007/s00216-019-01601-y
  • 发表时间：
    2019-03-01
  • 期刊：
    ANALYTICAL AND BIOANALYTICAL CHEMISTRY
  • 影响因子：
    4.3
  • 作者：
    Peng, Si;Hong, Tingting;Chen, Chuanpin
  • 通讯作者：
    Chen, Chuanpin

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  • 通讯作者：
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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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