猪瘟病毒非结构蛋白介导基因组复制和病毒粒子装配调节与致病性研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31070134
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    32.0万
  • 负责人：
    潘兹书
  • 依托单位：
    武汉大学
  • 学科分类：
    C0107.病毒学
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

在揭示猪瘟病毒非结构蛋白NS3和NS5B酶学特性及基因组3′端非编码区与病毒毒力关系基础上，采用结构功能预测和构建突变体策略，体外研究NS2-3、NS3和NS5B等病毒复制装配调控相关蛋白的结构与功能；进而在CSFV全长感染性cDNA克隆上进行遗传操作，构建、拯救一组具有不同NS2-3切割效率及NS3和NS5B酶活性的病毒突变体，研究这些病毒突变体的复制装配效率、增殖特性和在猪体的致病性，揭示NS2-3、NS3和NS5B等非结构蛋白在CSFV复制装配中的作用及其调节机制；发现CSFV增殖效率低下的分子基础；探讨CSFV复制装配调节与致病性的关系，进而加深对猪瘟发病机理的理解，并为基于感染性cDNA克隆操作构建高效抗猪瘟基因工程疫苗提供技术支撑。

结项摘要

采用杆状病毒表达了野生型和位于NS2跨膜区的7个位点氨基酸突变体NS23pro，分析了这些氨基酸在NS23自切割中的作用；采用感染性cDNA克隆反向遗传操作在基因组上对NS2中7个位点进行突变，体外转录vRNA转染PK15细胞拯救CSFV，并进行特性研究。结果显示，NS2蛋白第37、52、57、60、78、85和100等位点单个氨基酸突变可某种程度降低NS23的自切割活性；第60位的Asp、第78位的非Lys对于感染性CSFV产生起关键作用，这两种致死突变不取决于NS23的自切割活性高低；与野生型相比，突变体NS2在细胞中的分布及与E2的相互作用表现差异。用CSFV弱毒疫苗C株3′UTR、E2单独或同时替换强毒Shimen株对应区域构建了3种嵌合病毒，研究显示，3′UTR单替换对嵌合病毒特性没有显著影响；E2单替换导致产生感染性病毒和形成蚀斑能力一定程度下降，但在细胞传代后恢复；而E2和3′UTR双替换嵌合病毒生长特性和形成蚀斑能力显著降低，在细胞传代过程中保持稳定。这些工作加深了对CSFV复制调控和致病机制的理解，为发展猪瘟防控新策略提供新的思路。

项目成果

期刊论文数量（1）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）

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表达猪圆环病毒2型Cap蛋白重组耐热新城疫病毒的构建及免疫原性
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  • 期刊：
    中国兽医学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李丽;赵康;张媛;王红琳;罗青平;邵华斌;潘兹书;温国元
  • 通讯作者：
    温国元
猪瘟病毒Core蛋白核仁定位序列鉴定
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
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  • 期刊：
    微生物与感染
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    吴锐;潘兹书
  • 通讯作者：
    潘兹书

其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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