新佐剂ASP-1蛋白的佐剂功能区及佐剂活性机制的探索性研究

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 项目参与者：
    SaraLustigman； 谭亚娣； 俞建萍； 龚磊； 郭彦；
  • 关键词：
    Ov-ASP-1佐剂TLR

项目摘要

ASP-1蛋白是本课题组发现的一种新的非毒素类佐剂蛋白。我们的前期工作表明，该蛋白具有良好的佐剂活性，能显著增强多肽类、重组蛋白和灭活病毒抗原等抗原的免疫反应，产生Th1偏移的Th1／Th2混合应答。ASP-1可能是通过TLR2和4，活化单核细胞来源的树突状细胞而发挥佐剂效应的。本研究在前期研究的基础上，结合生物信息学分析，设计和表达一系列ASP-1蛋白的截短片段，分析这些截短蛋白在体外与人和小鼠PBMC结合情况，以及对PBMC的刺激效应和特点；以稳定表达有TLR2,4的HEK细胞为细胞模型分析与TLR2和4的结合特性，从中选出能在体外与APC结合和具有活化作用的截短蛋白，通过动物实验分析各截短蛋白的佐剂活性和特征。从而最终确定尽可能去除免疫原性而保留佐剂活性的最小功能片段，探索ASP-1的功能区和分析其作用特性，深入研究ASP-1佐剂活性特征及佐剂功能机制。

结项摘要

根据课题任务目标，本研究设计了不同截短片段并在大肠杆菌表达系统中有效表达、纯化，通过体内外的活性分析，获得了保持全长ASP-1蛋白佐剂活性（包括 OVA, HBsAg, HIV peptide）但自身免疫原性显著降低的活性片段ASPPR。与全长蛋白相比，ASPPR仅为全长蛋白的2/3，具有易于表达、易于稳定保存的特点,这对于新型疫苗的研发具有重要意义。同时，通过对不同的截短片段的佐剂活性分析，揭示了ASP-1发挥佐剂活性的作用机制。目前已经发表中文核心期刊论文1篇，接收待发表1篇，申请国家发明专利1项（已经进入实质审查），总结待投稿英文论文1篇。培养硕士研究生2名，本科生1名。

项目成果

期刊论文数量（2）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（1）
专利数量（0）
新型免疫调节剂ASP-1单克隆抗体的制备及在保守结构域鉴定中的应用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    生物技术通讯
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    郭晶晶;于虹;杨裔;孙维来;肖文珺;郭彦;寇志华;周育森
  • 通讯作者：
    周育森
重组蛋白ASP-1对高致病性禽流感M2e疫苗分子的佐剂活性
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中国人兽共患病学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    俞建萍;周育森;赵光宇;肖文珺;郭彦;孙世惠;寇志华;于虹;温晶;何后军
  • 通讯作者：
    何后军

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其他文献

其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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