血型A糖抗原模拟多肽的研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30972820
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    25.0万
  • 负责人：
    胡丽华
  • 依托单位：
    华中科技大学
  • 学科分类：
    H2601.生物化学检验
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

血型ABO不相容移植是当前器官移植研究领域的热点，其一关键难点是如何抑制由血型A抗原－抗体介导的超急性排斥反应。新近，血型A糖抗原被用于免疫吸附滤除血型A抗体，在抑制由A抗体引起的超急性排斥反应中显示出重要作用。但A糖抗原存在价格昂贵等诸多缺点，已成为阻碍ABO不相容器官移植研究和应用的一个瓶颈。因此，研制一种A糖抗原的模拟替代物成为当务之急。本项目在前期发现肽EYWYCGMNRTGC具有A糖抗原模拟作用的基础上，利用定点突变技术、二级噬菌体文库构建、筛选技术进一步研究明确与血型A抗体有更高亲和力的A糖抗原模拟多肽；制备可溶性多肽；初步构建基于多肽的新型血型A抗体滤除材料和易于标准化的ELISA检测方法。本项目的实施有望获得与血型A抗体有高亲和力的A糖抗原模拟多肽；用此新颖的多肽代替A糖抗原，为克服A糖抗原的不足，推动ABO不相容器官移植的理论和应用研究提供新思路。

结项摘要

人工合成的血型A糖抗原被用于亲和滤除血浆中的抗A，在抑制供体表达的A抗原与受者体内的抗A介导的超急性移植排斥反应方面发挥了显著的作用。由于糖抗原的合成十分困难、价格昂贵，研究A糖抗原的替代物就十分必要。本课题通过丙氨酸扫描前期获得的血型A抗原模拟肽EYWYCGMNRTGC确定其中的关键氨基酸，以此氨基酸为基础构建二级噬菌体文库，进一步筛选血型A抗原的模拟肽，分析模拟肽与抗A的亲和力及可能的相互作用方式。构建基于二次筛选肽的抗A ELISA检测方法和滤除方案。结果发现肽EYWYCGMNRTGC中的E1/W3/T10/C12是模拟A抗原的关键氨基酸，基于此4个氨基酸的二级文库筛选到新的A抗原模拟肽EYWYCLSWRTGC；ELWTNGSRPTVC。初步证明基于化学合成肽EYWYCLSWRTGC的ELISA方法可用于检测抗A IgG（敏感度0.791和特异性0.793），IgM（敏感度0.881和特异性0.800）。初步证明基于噬菌体展示的EYWYCLSWRTGC具有滤除抗A的效果（p<0.01）。为了获得更多的新颖A抗原模拟肽，本研究还通过其他噬菌体文库研究了血型A抗原的模拟肽。本研究结果为发展新型的血型抗A检测方法和滤除材料提供了数据基础，为研究其他血型抗体的检测及滤除方法提供了新的思路。

项目成果

期刊论文数量（2）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
ABO血型不相容器官移植的现况
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    临床血液学杂志(输血与检验版)
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    常盼盼;汤兆明;胡丽华
  • 通讯作者：
    胡丽华
血型A抗原模拟多肽与抗A抗体的分子对接
  • DOI：
    10.1074/jbc.m117.799080
  • 发表时间：
    2017-08-11
  • 期刊：
    临床血液学杂志(输血与检验版)
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Feinberg H;Jégouzo SAF;Rex MJ;Drickamer K;Weis WI;Taylor ME
  • 通讯作者：
    Taylor ME

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  • 通讯作者：
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  • 作者：
    胡丽华
  • 通讯作者：
    胡丽华
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  • 发表时间：
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  • 期刊：
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  • 作者：
    武其文;胡丽华;蔡鹏程
  • 通讯作者：
    蔡鹏程
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  • DOI：
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  • 发表时间：
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  • 期刊：
    J Investig Allergol Clin Immunol
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  • 作者：
    胡丽华
  • 通讯作者：
    胡丽华
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  • 期刊：
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  • 作者：
    胡丽华;王路乔;程晓曙
  • 通讯作者：
    程晓曙

其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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