高频碱基替换技术的建立和gat基因的体外定向进化

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30770021
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    28.0万
  • 负责人：
    刘子铎
  • 依托单位：
    华中农业大学
  • 学科分类：
    C0105.微生物学新技术与新方法
  • 结题年份：
    2010
  • 批准年份：
    2007
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2008-01-01 至2010-12-31

项目摘要

为解决现行体外蛋白质定向进化技术由于诱变频率低，突变DNA分子多样性受限导致正向突变筛选劳动强度大使应用受限的问题，本项目欲通过dUTP和dITP双介导物的PCR诱变系统建立一个新的体外高频碱基替换技术，这一技术的建立不仅可广泛应用于酶制剂、多肽药物、疫苗等的体外改良，对我国生物技术产业将产生积极影响，潜在有巨大的经济效益，而且为蛋白质、酶结构与功能研究提供一个新的技术平台。同时，本研究试图利用该新技术对具有潜在应用前景的新抗除草剂――草甘膦N－乙酰转移酶（GAT）基因进行体外改良，在研究不同活性GAT突变体酶学性质、酶动力学、结构与功能关系的基础上，筛选具有使用价值的优良gat基因，为研发我国新一代抗草甘膦转基因作物奠定基础。

结项摘要

项目成果

期刊论文数量（9）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
A cold-active endoglucanase (Cel9P) from a sea bacteria Paenibacillus provencensis BME-14
来自海洋细菌普罗旺斯类芽孢杆菌 BME-14 的冷活性内切葡聚糖酶 (Cel9P)
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
  • 通讯作者：
A novel beta-mannanase from Pantoea agglomerans A021: gene cloning, expression, purification and characterization
来自成团泛菌 A021 的新型 β-甘露聚糖酶：基因克隆、表达、纯化和表征
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
  • 通讯作者：
Molecular cloning, purification, and characterization of a novel, acidic, pH-stable endoglucanase from Martelella mediterranea
来自地中海 Martelella 的新型酸性、pH 稳定内切葡聚糖酶的分子克隆、纯化和表征
  • DOI：
    10.1007/s12275-010-9361-0
  • 发表时间：
    2010-06-01
  • 期刊：
    JOURNAL OF MICROBIOLOGY
  • 影响因子：
    3
  • 作者：
    Dong, Junli;Hong, Yuzhi;Liu, Ziduo
  • 通讯作者：
    Liu, Ziduo
A novel pH-stable xylanase from deep-sea Cellulomonas fermentans JK4
来自深海发酵纤维单胞菌 JK4 的新型 pH 稳定木聚糖酶
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
  • 通讯作者：
A novel alkali-stable, cellulase-free xylanase fromdeep-sea Kocuria sp. Mn22
一种来自深海 Kocuria sp 的新型碱稳定、无纤维素酶的木聚糖酶。
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
  • 通讯作者：

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其他文献

苏云金芽孢杆菌死亡活性成分研究进展
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    应用与环境生物学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    蔡启良;刘子铎;喻子牛
  • 通讯作者：
    喻子牛
苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白基因特性分析
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中国生物化学与分子生物学学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    蔡启良;刘子铎;喻子牛
  • 通讯作者：
    喻子牛
苏云金芽胞杆菌营养期杀虫蛋白 Vip与Cry蛋白的协同作用
  • DOI：
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  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    微生物通报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    蔡启良;刘子铎;孙明;喻子牛
  • 通讯作者：
    喻子牛

其他文献

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刘子铎的其他基金

GC碱基特异替换技术的建立和AlbD酶的体外进化
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    2005
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    2003
  • 资助金额：
    20.0 万元
  • 项目类别：
    面上项目
苏云金芽胞杆菌“棉丰杀虫剂”毒素分子作用机理研究
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    39970423
  • 批准年份：
    1999
  • 资助金额：
    11.0 万元
  • 项目类别：
    面上项目
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    39270023
  • 批准年份：
    1992
  • 资助金额：
    5.5 万元
  • 项目类别：
    面上项目

相似国自然基金

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相似海外基金

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AI项目解读示例

课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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