基于酵母菌的脂肪酶共展示技术研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31070089
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    33.0万
  • 负责人：
    闫云君
  • 依托单位：
    华中科技大学
  • 学科分类：
    C0104.微生物遗传与生物合成
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

酶法制备生物柴油是一种绿色、前景广阔的技术工艺。但游离脂肪酶易聚集失活，且无法回收；而固定化脂肪酶的优良载体难以获得，固定化过程复杂，酶售价高昂。因此，研制性能良好且价格低廉的固定化脂肪酶对发展生物制造产业具有重要意义。基于表面展示技术的固定化脂肪酶具有高稳定性、长寿命、可回收等优点，且省去常规固定化酶所需分离纯化和固定化过程，可大幅降低酶的生产成本。同时，项目组在阐明酰基转移是脂肪酶转酯反应限速步骤后，利用位置特异性不同的LipozymeTLIM与Novozym435复合催化，发现两种酶间存在正协同效应，显著提高转化效率，缩短反应时间。为此，本项目拟在初步阐明锚定蛋白与脂肪酶匹配规律基础上，筛选出具较强正协同效应的脂肪酶组合，采用共表达策略，将其高效均衡地共展示在酵母菌表面，以期研制出一种既可大幅降低成本，又具广泛底物适应性的全细胞催化剂，为酶法生物柴油新工艺产业化提供强有力的技术支撑。

结项摘要

本项目较好完成了任务书中设定的研究任务及可和指标，初步阐明了不同锚定蛋白的细胞壁锚定结构域与脂肪酶融合方式对表面展示脂肪酶结构、活性与稳定性的影响规律，获得3株表面展示单个脂肪酶的毕氏酵母工程菌株和3株具有正协同效应的共展示脂肪酶毕氏酵母基因工程菌株，具有显著协同效应的共展示脂肪酶应用于生物柴油合成，在最优条件下甲酯得率达到95.4%，比单展示脂肪酶有了显著提高。目前，本项目正撰写发明专利1项，发表SCI 收录论文16篇，其中SCI收录13篇，已培养硕、博士生6名。

项目成果

期刊论文数量（16）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
A novel oriented immobilized lipase on magnetic nanoparticles in reverse micelles system and its application in the enrichment of polyunsaturated fatty acids
反胶束体系中磁性纳米粒子新型定向固定化脂肪酶及其在多不饱和脂肪酸富集中的应用
  • DOI：
    10.1016/j.biortech.2012.12.191
  • 发表时间：
    2013-03-01
  • 期刊：
    BIORESOURCE TECHNOLOGY
  • 影响因子：
    11.4
  • 作者：
    Liu, Tao;Zhao, Yuandi;Yan, Yunjun
  • 通讯作者：
    Yan, Yunjun
Effect of sub- and supercritical CO2 treatment on the properties of Pseudomonas cepacia lipase
亚临界和超临界 CO2 处理对洋葱假单胞菌脂肪酶性质的影响
  • DOI：
    10.1016/j.enzmictec.2013.04.005
  • 发表时间：
    2013-07-10
  • 期刊：
    ENZYME AND MICROBIAL TECHNOLOGY
  • 影响因子：
    3.4
  • 作者：
    Chen, Dawei;Zhang, Houjin;Yan, Yunjun
  • 通讯作者：
    Yan, Yunjun
Improving activity and enantioselectivity of lipase via immobilization on macroporous resin for resolution of racemic 1- phenylethanol in non-aqueous medium.
通过固定在大孔树脂上提高脂肪酶的活性和对映选择性，用于非水介质中外消旋 1-苯乙醇的拆分
  • DOI：
    10.1186/1472-6750-13-92
  • 发表时间：
    2013-10-29
  • 期刊：
    BMC biotechnology
  • 影响因子：
    3.5
  • 作者：
    Li X;Huang S;Xu L;Yan Y
  • 通讯作者：
    Yan Y
Constitutive Expression of Yarrowia lipolytica Lipase LIP2 in Pichia pastoris Using GAP as Promoter
以GAP为启动子在毕赤酵母中组成型表达解脂耶氏酵母脂肪酶LIP2
  • DOI：
    10.1007/s12010-011-9524-4
  • 发表时间：
    2012-03-01
  • 期刊：
    APPLIED BIOCHEMISTRY AND BIOTECHNOLOGY
  • 影响因子：
    3
  • 作者：
    Wang, Xiaofeng;Sun, Yongchuan;Yan, Yunjun
  • 通讯作者：
    Yan, Yunjun
疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母中的表面展示及酶学性质
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    微生物学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    代敏;纪昌涛;汪小锋;智晓燕;徐莉;刘云;闫云君
  • 通讯作者：
    闫云君

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  • 通讯作者：
    闫云君

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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