转染自杀基因的骨髓内皮祖细胞靶向治疗肺癌的实验研究

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基本信息

  • 批准号：
    81071924
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    32.0万
  • 负责人：
    梅举
  • 依托单位：
    上海交通大学
  • 学科分类：
    H1815.肿瘤靶向治疗
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

肺癌严重威胁人类的健康和生命，其发病率和死亡率逐年增加，并且大多数肺癌患者发现时已属晚期，传统的治疗手段如手术、化疗和放疗等难以奏效。自杀基因疗法以直接杀伤肿瘤细胞为目的，而不考虑肿瘤复杂的分子机制，作用直接有效，具有临床应用前景。我们的前期研究证实，骨髓内皮祖细胞（endothelial progenitor cell，EPCs）在体内能定向归巢至肿瘤，并参与肿瘤新生血管的建立。本研究拟构建自杀基因－嘧啶脱氨酶基因（CD基因）重组腺病毒并体外转染骨髓EPCs，将携带CD基因的EPCs输注到肺癌荷瘤裸鼠体内，以EPCs作为CD基因的治疗载体，将CD基因特异性地投送至肺癌组织中并有效表达胞嘧啶脱氨酶，在局部将无毒的前体药物5-氟胞嘧啶转化为细胞毒性物质5-氟尿嘧啶（5-FU），实现靶向治疗肺癌的目的，为探索新的肺癌治疗手段提供理论和实验依据。

结项摘要

肺癌是一种具有高发病率和死亡率的疾病，大部分患者在发现时都已属晚期。自杀基因疗法以直接杀伤肿瘤细胞为目的，而不考虑肿瘤复杂的分子机制，作用直接有效，具有临床应用前景。本课题的目的是研究5-氟胞嘧啶(5-FC)诱导转基因型内皮祖细胞群（EPCs）发生自身死亡及旁效应对共培养人肺癌细胞系SPC-A1的杀伤作用。我们的前期研究证实，骨髓EPCs在体内能定向归巢至肿瘤，并参与肿瘤新生血管的建立。之后，我们构建了自杀基因－嘧啶脱氨酶基因（CD基因）重组腺病毒并体外转染骨髓EPCs，获得转基因型EPCs。5-FC敏感性检测实验证实，转基因型EPCs较野生型存活率显著性降低（P<0.05）。之后我们将携带CD基因的EPCs与SPC-A1共培养，将CD基因特异性地投送至肺癌组织，结果显示，在5-氟胞嘧啶的作用下EPCs发生自身死亡并触发强有效的旁效应，对共培养的SPC-A1细胞产生非常明显的杀伤效果。这说明通过骨髓EPCs与自杀基因的联合应用，可有效提高自杀基因的杀伤效率，实现了靶向治疗肺癌的目的，为探索新的肺癌治疗手段提供理论和实验依据。

项目成果

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  • 通讯作者：
    梅举

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

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本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
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