Q热多表位疫苗的研究

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
81371767
项目类别：
面上项目
资助金额：
16.0万
负责人：
熊小路
依托单位：
中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
学科分类：
H2201.病原细菌与感染
结题年份：
2014
批准年份：
2013
项目状态：
已结题
起止时间：
2014-01-01 至2014-12-31

项目参与者：
王锡乐；段长松；焦俊；齐永；龚文平；贾引军；
关键词：
Q热多表位疫苗保护性抗原免疫应答贝氏柯克斯体

项目摘要

Coxiella burnetii is a Gram-negative bacterium that causes chronic disease (Q fever) in both animals and humans. The development of a safe and effective vaccine to prevent Q fever remains an important public health goal.In this application, the Th epitopes of partial protective antigens Com1, Mip,P1 and etc will be designed and synthesized based on the online bioinformatics predictions.The synthesized peptides will be incubated with CD4+ T cells isolated from C57 mice.Subsequently,ELISPOT, flow cytometry, MTT assay will be used to observe Th1 response. The genes of the identified Th epitope will be ligated and cloned into expression vectors. The recombinant multi-epitope protein will be expressed and then used to immunize C57/B6 mice to evaluate its protective efficiency. The study will provide a basis for developing a new generation of safe and effective human vaccine against Q fever.

贝氏柯克斯体是Q热的病原体，对人和动物有极强的感染性。研发安全有效的Q热疫苗来预防贝氏柯克斯体感染仍然是公共卫生的一个重要目标。本研究基于已证明有部分保护力的Com1、Mip、P1等贝氏柯克斯体重组抗原，通过在线服务器设计它们的免疫优势性Th表位，并化学合成表位短肽。通过酶联免疫斑点（ELISPOT）、流式细胞、MTT等技术筛选刺激机体产生Th1型细胞免疫应答的表位肽。再通过基因工程法制备Th细胞表位串联融合蛋白, 并将与载体蛋白藕联并免疫C57/B6小鼠来评价其保护效能和探讨免疫保护机制。该研究将为研发新一代安全、有效的人用多肽Q热疫苗奠定理论和工作基础。

结项摘要

贝氏柯克斯体是Q热的病原体，对人和动物有极强的感染性。本研究基于贝氏柯克斯体的主要免疫原性外膜蛋白，通过在线服务器设计它们的 H2 I-Ab型Th表位，并化学合成短肽共计121条。通过酶联免疫斑点（ELISPOT）技术筛选出22条能显著刺激重组抗原免疫小鼠的CD4+T细胞产生IFN-γ 的表位肽。通过ELISPOT和MTT实验进一步证明这22条中的7条肽能显著刺激贝氏柯克斯体菌体免疫的小鼠的CD4T细胞显著分泌IFN-γ和显著增值。将这7条多肽混合免疫小鼠之后再用贝氏柯克斯体攻击免疫小鼠，证明7肽组合物具有显著的免疫保护效能。并通过流式和CBA细胞因子检测实验证明7肽混合物能诱导CD4+T细胞向Th1方向分化并显著分泌IFN-γ等细胞因子来激发机体的杀菌活性。该课题的研究成果将为研发新一代安全，有效的人用多肽Q热疫苗奠定理论和工作基础。截至2014年12月，该研究发表标注SCI论文7篇，参加国内会议报告1次，申请发明专利1项。