旋毛虫副肌球蛋白TsPmy与补体膜攻击复合物相关组分作用位点的定位及功能研究

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基本信息

  • 批准号：
    81171598
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    58.0万
  • 负责人：
    诸欣平
  • 依托单位：
    首都医科大学
  • 学科分类：
    H2203.寄生虫与感染
  • 结题年份：
    2015
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2015-12-31

项目摘要

旋毛虫副肌球蛋白（TsPmy）是本课题组新发现的一个抗原蛋白，近期研究显示该蛋白通过与补体膜攻击复合物（MAC）重要组分C9结合，阻碍MAC的组装，使旋毛虫逃避宿主补体系统的杀伤。本课题将在表达重组TsPmy蛋白截短片段及合成重叠短肽的基础上，应用Western blot、ELISA和定点突变等方法，明确重组TsPmy与补体C9的结合位点；研究结合位点多肽对补体C9聚合反应及补体介导细胞溶解反应的影响；同时，制备识别结合位点多肽的单抗，评价单抗在补体对旋毛虫体外杀伤中的作用。本研究将精确定位重组TsPmy与补体C9结合的位点，探究并证实TsPmy在补体介导免疫杀伤中的功能，从新的视角揭示旋毛虫逃避宿主免疫反应的分子机制。也将从另一个侧面深入阐明重组TsPmy作为疫苗候选抗原分子的免疫机理，为抗旋毛虫病疫苗的研制提供关键准确的分子靶标和更充足的科学依据。

结项摘要

旋毛虫副肌球蛋白（Ts-Pmy）是本课题组新发现的一个抗原蛋白，近期研究显示该蛋白通过与补体膜攻击复合物（MAC）重要组分C9结合，阻碍MAC的组装，使旋毛虫逃避宿主补体系统的杀伤。本课题在表达重组Ts-Pmy蛋白截短片段及合成重叠短肽的基础上，应用Far Western blot及Dot blot方法，明确重组Ts-Pmy与补体C9的结合位点；通过红细胞溶血实验，研究结合位点多肽对补体C9聚合反应及补体介导细胞溶解反应的影响；应用杂交瘤技术，制备识别结合位点多肽的单抗，评价了单抗在补体对旋毛虫体外杀伤中的作用。本研究精确定位了重组Ts-Pmy与补体C9结合的位点，探究并证实Ts-Pmy在补体介导免疫杀伤中的功能，从新的视角揭示旋毛虫可以部分逃避宿主免疫反应的相关分子机制。

项目成果

期刊论文数量（10）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
RNAi-Mediated Silencing of Paramyosin Expression in Trichinella spiralis Results in Impaired Viability of the Parasite
RNAi 介导的旋毛虫副肌球蛋白表达沉默导致寄生虫活力受损
  • DOI：
    10.1371/journal.pone.0049913
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    PLOS ONE
  • 影响因子：
    3.7
  • 作者：
    Chen X;Yang Y;Yang J;Zhang Z;Zhu X
  • 通讯作者：
    Zhu X
Heat shock protein 70 from Trichinella spiralis induces protective immunity in BALB/c mice by activating dendritic cells
旋毛虫热休克蛋白 70 通过激活树突状细胞诱导 BALB/c 小鼠的保护性免疫
  • DOI：
    10.1080/13534645.2018.1546723
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    Vaccine
  • 影响因子：
    5.5
  • 作者：
    Yuan Gu;Bin Zhan;Jingjing Huang;Xinping Zhu
  • 通讯作者：
    Xinping Zhu
Protective effect of a prime-boost strategy with the Ts87 vaccine against Trichinella spiralis infection in mice
Ts87 疫苗初免-加强策略对小鼠旋毛虫感染的保护作用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    Biomed Research International
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Lei Wang;Kuo Bi;Yunyun Wang;Xinping Zhu
  • 通讯作者：
    Xinping Zhu
Mapping of the complement C9 binding domain on Trichinella spiralis paramyosin
旋毛虫副肌球蛋白上补体 C9 结合域的定位
  • DOI：
    10.1186/1756-3305-7-80
  • 发表时间：
    2014-02-24
  • 期刊：
    Parasites & Vectors
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Zhao X;Hao Y;Yang J;Gu Y;Zhu X
  • 通讯作者：
    Zhu X
RNAi-Mediated Silencing of Paramyosin Expression in Trichinella spiralis Results in Impaired Viability of the Parasite.
RNAi 介导的旋毛虫副肌球蛋白表达沉默导致寄生虫活力受损。
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    PLos One
  • 影响因子：
    3.7
  • 作者：
    Yang; Yaping;Yang; Jing;Zhang; Zhifei;Zhu; Xinping
  • 通讯作者：
    Xinping

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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