电刺激促进大鼠视网膜前体细胞增殖、分化及其机制的初步探讨

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81070764
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    37.0万
  • 负责人：
    莫晓芬
  • 依托单位：
    复旦大学
  • 学科分类：
    H1309.眼科学研究新技术与新方法
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

视网膜神经元进行性凋亡将导致不可逆性盲，促进神经元自体再生或细胞替代治疗是重要的研究方向。我们前期研究发现经角膜电刺激（TES）能上调大鼠视网膜多种营养因子和Gadd45b的表达，并在睫状体边缘带（CMZ）观察到了细胞增殖现象。Gadd45家族由Gadd45a、b、g三个功能相似的小分子核糖体蛋白组成，近期研究发现其可以参与DNA的去甲基化的调控。我们推测TES能上调视网膜Gadd45家族一种或多种因子的表达，进而引起视网膜内BDNF、FGF、IGF-1基因去甲基化使其蛋白表达上调，从而促进CMZ视网膜前体细胞的增殖、分化。因此本课题拟观察比较成年大鼠接受TES前后视网膜上述营养因子的表达变化及CMZ视网膜前体细胞增殖、分化的情况，并探讨两者的相关性；从表观遗传学调控的角度入手，探讨Gadd45家族各因子对上述三种营养因子的甲基化调控作用，为经角膜电刺激治疗视网膜疾病的应用提供科学依据。

结项摘要

视网膜神经元退行性疾病如青光眼等，最终造成神经元持续凋亡而导致视功能不可逆性缺失，目前临床对此尚无良策，各种保护视网膜神经元及促进视神经再生的基础研究正在热点展开中，其中，原位诱导自体内源性视网膜前体细胞增殖、分化，以期将来指导临床治疗新方案的研究备受关注。在此领域，本课题组通过设计对成年大鼠以一定模式的低电流刺激后，观察视网膜前体细胞的增殖和分化情况，并检测了视网膜Muller细胞BDNF、FGF、IGF-1等的表达情况，探讨了电刺激促进视网膜前体细胞增殖、分化的初步机制。.研究表明：1.经过摸索得到对成年大鼠适宜的经角膜低电流刺激模式为：双相方波电流:波宽3ms，频率20Hz，强度300uA，刺激持续时间1h；经形态学检查未观察到眼部不良反应；在该模式下进行干预后，在成年大鼠睫状体边缘带视网膜前体细胞出现增殖，并伴有视网膜内即早基因Gadd45β一过性表达增加； 2. 经过摸索得到对新生SD大鼠体外培养的Müller细胞适宜的体外低电流电刺激参数是：双相方波电流:波宽3ms，频率20Hz，电流强度100 uA，刺激时间持续 1h；在该模式电刺激下，观察到电刺激后1-12h内神经营养因子BDNF、FGF的表达水平持续明显增加，电刺激干预后1-3h内视网膜Müller细胞内Gadd45β的表达一过性增加，符合即早基因表达的时间特点；表明电刺激能促进体外培养的大鼠视网膜Müller细胞内Gadd45β一过性的表达增加，与调控BDNF/FGF基因的DNA去甲基化相关，进而促进BDNF/FGF的分泌；且多频次电刺激有望增加神经营养因子的持续分泌，使得神经保护效应增强。.本项目研究期间培养硕士研究生4人，协助培养博士研究生1人；已发表标注受本项目资助的SCI论文3篇；获得国家授权发明专利1项；获得中华医学会科技进步二等奖（第7完成人）1项；参加国内会议交流4人次，国际会议2人次。

项目成果

期刊论文数量（3）
专著数量（1）
科研奖励数量（3）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Neuroprotective effect of transcorneal electrical stimulation on ischemic damage in the rat retina
经角膜电刺激对大鼠视网膜缺血损伤的神经保护作用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    EXPERIMENTAL EYE RESEARCH
  • 影响因子：
    3.4
  • 作者：
    Wang; Xin;Mo; Xiaofen;Li; Dake;Wang; Yan;Fang; Yuan;Rong; Xianfang;Miao; Huamao;Shou; Ti;e
  • 通讯作者：
    e
Neuroprotective effect of erythropoietin-loaded composite microspheres on retinal ganglion cells in rats
促红细胞生成素复合微球对大鼠视网膜神经节细胞的神经保护作用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2011
  • 期刊：
    EUROPEAN JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES
  • 影响因子：
    4.6
  • 作者：
    Rong; Xianfang;Mo; Xiaofen;Ren; Tiantian;Yang; Sixing;Yuan; Weien;Dong; Jingyan;Wang; Yan;Wang; Xin
  • 通讯作者：
    Xin
Effects of Erythropoietin-Dextran Microparticle-Based PLGA/PLA Microspheres on RGCs
促红细胞生成素-葡聚糖微粒 PLGA/PLA 微球对 RGC 的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    INVESTIGATIVE OPHTHALMOLOGY & VISUAL SCIENCE
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Rong; Xianfang;Yang; Sixing;Miao; Huamao;Guo; Tingting;Wang; Zhenyu;Shi; Wanru;Mo; Xiaofen;Yuan; Weien;Jin; Tuo
  • 通讯作者：
    Tuo

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其他文献

电穿孔辅助bFGF基因转染视网膜神经节细胞层延缓RCS大鼠视网膜色素变性
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中国眼耳鼻喉科杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    董京艳;张圣海;莫晓芬;吴继红;张萌;方媛;李希;郭文毅
  • 通讯作者：
    郭文毅

其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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