利用库存红细胞自身eNOS合成NO的可行性研究

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基本信息

项目摘要

以往一直认为库存血的形态学和生化指标变化是输血引发局部组织供血不足和缺血再灌注损伤的原因。但即使输用新鲜血液也会出现上述情况,说明还存在另外的贮存损伤机制。据最近的文献报道和我们前期研究表明,血液在贮存过程中一氧化氮(NO)的迅速耗竭、丧失低氧性血管舒张的功能是其主要原因,对库存血重新亚硝基化可以恢复此功能,但该措施有悖于血液制备贮存的操作常规。为此,我们提出利用库存红细胞自身的一氧化氮合酶(RBC-NOS)合成NO。在现有的血液保养液中加入NO的合成底物L-精氨酸和NOS激动剂ATP并确定其剂量-效应关系。采用荧光免疫、免疫印迹、免疫共沉淀等技术方法研究RBC-NOS与RBC其他蛋白质之间的相互作用,阐明RBC-NOS合成NO的可能的信号通路,为后续的体内外功能试验奠定基础,为保持低氧性血管舒张功能的新型血液保养液的研制提供思路,为提高库存血质量和临床输血的安全性和有效性提供技术保障。

结项摘要

观察了加入L-精氨酸后库存红细胞eNOS的磷酸化水平和血管舒张作用。悬浮红细胞被存储在4°C,分别在 0 d、 7 d、 14 d、 21 d、 28 d 和 35 d后进行测试。WB 和免疫荧光实验证实红细胞膜上 存在NOS ,其浓度和活性水平在整个血液贮存的 35 d内保持稳定。L-NAME抑制库存红细胞NO的合成。L-arg(3,30, 300 and 3000 μmol/L) 添加到血液保存液中,显示与NO的合成呈剂量效应关系 (P < 0.01)。L-精氨酸 (3000 μmol/L) 组红细胞 eNOS的 Ser1177 和 Ser113磷酸化水平都显著高于对照组,Thr495 的磷酸化水平低于对照组 (P < 0.05)。添加L-精氨酸的悬浮红细胞显示比对照组高的血管舒张活性(P<0.01)。以上结果显示,L-精氨酸可以诱导Ser1177 和 Ser113的磷酸化,从而增加NO的合成并恢复库存血乏氧性血管舒张的功能。. 该项目已经发表核心期刊论文2篇,申报发明专利1项,培养博士和硕士研究生各1名。

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
影响库存血运氧能力的指标分析
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    临床输血与检验
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    冯双利;卓海龙;陈民才;杜为;王全立
  • 通讯作者:
    王全立
4℃保存红细胞内皮型一氧化氮合酶表达情况的研究
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    中国输血杂志
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    冯双利;陈廷友;陈民才;王全立
  • 通讯作者:
    王全立

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其他文献

自然杀伤细胞在肿瘤免疫治疗中的研究进展
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  • 通讯作者:
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  • DOI:
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  • 发表时间:
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  • 通讯作者:
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王全立的其他基金

异源反应性NK细胞对输血相关免疫抑制的防治作用研究
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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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