一个编码两个硝酸盐运输蛋白的水稻基因:剪切机制和功能

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AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    31071839
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    40.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    C1511.设施园艺学
  • 结题年份:
    2013
  • 批准年份:
    2010
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

植物在旱地和水田的主要氮源分别为硝态氮和铵态氮。有别于旱地植物,水稻具发达的根系通气组织和强烈的根表、根际硝化作用,因此推测淹水栽培的水稻根实际持续吸收硝态氮和铵态氮。然而水稻硝酸盐运输蛋白的功能尚未报道。我们发现水稻同一个硝酸盐运输蛋白基因OsNRT2.3通过剪切可同时编码OsNRT2.3a和OsNRT2.3b;前者主要在根系表皮和中柱表达;而后者在叶片韧皮部表达,过量表达OsNRT2.3b及其显著提高水稻氮利用和产量。本项目将通过缺失和突变其内源启动子,与GUS报告基因融合转化水稻,原位杂交和Western Blot分析确定OsNRT2.3a和OsNRT2.3b的转录调控机制;通过OsNRT2.3a-RNAi敲除鉴定其在硝酸盐调控根系发育中的生理功能;通过分析OsNRT2.3b超表达对体内代谢物质及其相关基因表达影响确定其氮高效和高产的协调机制,为分子遗传改良提高氮利用率提供关键基因。

结项摘要

硝态氮是包括水稻在内的两个最为重要的氮源之一,然而水稻硝酸盐运输蛋白的功能尚未报道。本项目利用我们前期发现的水稻中同一个硝酸盐运输蛋白基因OsNRT2.3通过剪切可同时编码OsNRT2.3a和OsNRT2.3b的基础上,通过蛙卵异源表达体系、水稻转基因等电生理和分子生物学技术途径,深入揭示了两者的表达调控特征和生理功能差异。研究发现OsNRT2.3a和OsNRT2.3b都是水稻原生质体细胞质膜定位的跨膜蛋白,前者主要是在硝态氮供应条件下的根部木质部的薄壁组织表达,而后者主要是在地上部的韧皮部表达。通过对OsNRT2.3a RNAi沉默突变体的分析表明,OsNRT2.3a基因沉默不会显著影响外界低NO3-条件下水稻根系对NO3-的吸收,同时OsNRT2.3a也没有参与硝酸盐从老叶(氮源)到新叶(氮库)的再移动。但OsNRT2.3a基因的沉默会抑制NO3-从地下部往地上部的转运,从而导致水稻根系NO3-的积累,进而间接下调OsNRT2.1/2.2的表达量,减少根系从外界环境中吸收硝酸盐,最终严重抑制水稻的生长与发育。通过OsNRT2.3a和OsNRT2.3b的超表达转基因水稻植株的表型发现单独超表达OsNRT2.3a基因的转基因植株与野生型水稻相比没有明显的表型差异,而单独超表达OsNRT2.3b基因的转基因植株与野生型水稻相比株型显著增大。OsNRT2.3b超表达不仅能提高水稻氮素积累总量和后期氮素转运的数量与比率,而且能显著促进水稻后期生长和提高产量。 我们的研究表明OsNRT2.3a主要在硝酸盐从地下往地上部的运输过程中起关键作用;而OsNRT2.3b对水稻体内地上部氮素分配转运起重要调控作用。

项目成果

期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Rice OsNAR2.1 interacts with OsNRT2.1, OsNRT2.2 and OsNRT2.3a nitrate transporters to provide uptake over high and low concentration ranges
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  • DOI:
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  • 发表时间:
    2011-08-01
  • 期刊:
    PLANT CELL AND ENVIRONMENT
  • 影响因子:
    7.3
  • 作者:
    Yan, Ming;Fan, Xiaorong;Xu, Guohua
  • 通讯作者:
    Xu, Guohua
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  • DOI:
    10.4161/psb.6.9.16377
  • 发表时间:
    2011-01-01
  • 期刊:
    PLANT SIGNALING & BEHAVIOR
  • 影响因子:
    2.9
  • 作者:
    Feng, Huimin;Fan, Xiaorong;Xu, Guohua
  • 通讯作者:
    Xu, Guohua
Optimizing plant transporter expression in Xenopus oocytes.
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  • DOI:
    10.1186/1746-4811-9-48
  • 发表时间:
    2013-12-20
  • 期刊:
    Plant methods
  • 影响因子:
    5.1
  • 作者:
    Feng H;Xia X;Fan X;Xu G;Miller AJ
  • 通讯作者:
    Miller AJ
Plant Nitrogen Assimilation and Use Efficiency
植物氮同化和利用效率
  • DOI:
    10.1146/annurev-arplant-042811-105532
  • 发表时间:
    2012-01-01
  • 期刊:
    ANNUAL REVIEW OF PLANT BIOLOGY, VOL 63
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    Xu, Guohua;Fan, Xiaorong;Miller, Anthony J.
  • 通讯作者:
    Miller, Anthony J.

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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
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技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
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实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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