对瑞氏木霉的基因定位置换整合构建木糖醇生产菌
项目介绍
AI项目解读
基本信息
- 批准号:39770012
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:11.0万
- 负责人:
- 依托单位:
- 学科分类:C0104.微生物遗传与生物合成
- 结题年份:2000
- 批准年份:1997
- 项目状态:已结题
- 起止时间:1998-01-01 至2000-12-31
- 项目参与者:鲍晓明; 李波; 邹玉霞; 王春卉;
- 关键词:
项目摘要
采用双载体系统和PCR技术克隆了瑞氏木霉木糖醇脱氢酶cDNA基因和基因组基因,测定了基因的核苷酸序列;采用系列Northern杂交的方法对瑞氏木霉木糖代谢关键酶基因(木糖还原酶基因、木糖醇脱氢酶基因)以及PP途径转醛醇酶基因在20种不同碳源上的表达进行了研究;构建了多株不同基因型、能利用木糖、积累木糖醇的重组酿酒酵母菌;其中HMEX2转化木糖为木糖醇的效率可达094g/g;将木糖醇脱氢酶反义DNA插入瑞氏木霉CEH强启动子和终止子序列之间,构建了木糖醇脱氢酶反义RNA表达盒;将携带反义RNA的转化载体与潮霉素抗性质粒p3SR2一起,对瑞氏木霉RutC30原生质体进行共转化,筛选到能积累木糖醇的转化菌株AM10。该菌株木糖醇的积累量可达48g/l,比出发菌株提高6.7倍。
结项摘要
项目成果
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