HCN通道介导针刺心经保护急性心肌缺血致心律失常模型大鼠心室肌功能的相对特异性研究

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
81574083
项目类别：
面上项目
资助金额：
50.0万
负责人：
吴子建
依托单位：
安徽中医药大学
学科分类：
H3118.中医针灸学
结题年份：
2019
批准年份：
2015
项目状态：
已结题
起止时间：
2016-01-01 至2019-12-31

项目参与者：
蔡荣林；李梦；郝锋；夏晓红；汪克明；孙娟；欧金梅；张慧；段文秀；
关键词：
HCN通道心律失常相对特异性心经针刺

项目摘要

Effect of moxibustion was still not very clear although it had been proven to be effective, and the smoking was considered to be harmful to health. HCN channels are a kind of non-selective cation channels that regulated by voltage and cAMP. the Ih current mediated by HCN has some characteristics such as hyperpolarization, activate potassium and sodium ion, intracellular cAMP regulation and small single channel conductance, which take part in regulating physical activities widely, and also HCN channel were regulated by autonomic nervous activity. Based on thes characteristics, we thought that acupuncture heart meridian could regulate the HCN channel current and expression of mRNA and proteins in ventricular myocardium. In this study, we are going to observe the effect of acupuncture tissue liquid on ventricular myocardium with patch, and teh experession of HCN mRNA and proteins, to give further supports for the study on meridian-viscera correlationship.

经脉脏腑相关是经络理论的核心。我们长期开展的心经与心脏相对特异性联系的成果表明，针刺心经可以使机体在中枢系统调控下，影响急性心肌缺血状态下的自主神经活动以及多种神经递质（调质）释放，从而发挥保护心脏功能活动的作用，且这种作用与针刺属于同神经节段支配的肺经经脉段相比较具有相对特异性。超极化激活的环核苷酸门控通道是一种能被电压和环磷酸腺苷调控的、无选择性阳离子通道，它介导的Ih电流广泛的参与了对心脏和神经元节律活动的调控，是心脏起搏的离子基础，受自主神经影响较大。结合前期工作基础，我们提出科学假说，HCN通道介导了针刺心经调控心室肌细胞活动，对心脏具有相对特异性的保护作用。采用“针刺组织液”的概念，应用膜片钳技术观察其对心肌细胞HCN通道电流的影响，应用分子生物学方法研究心肌细胞HCNmRNA和蛋白表达，探讨针刺心经对心肌细胞保护的相对特异性的离子机制，为经脉脏腑相关深入研究提供实验支持。

结项摘要

本项目在前期工作基础上，基于对电针心经及其原穴“神门”具有相对特异性地保护AMI模型大鼠心肌损伤效应及其作用机制研究的深入，旨在探讨电针不同时程效应及电针后效应的现象和作用机制。以AMI致心律失常和心肌损伤的模型大鼠为研究对象，以HCN2和HCN4为核心指标，先后开展了电针7天的后效应，和电针1d，2d，3d，5d，和7d的实验观察，探讨了电针对HCN2和HCN4，以及DA、5-HT、ACh和NE在血清和心肌组织中的表达情况，进而开展了不同时程的电针血清对H9C2心肌细胞株的HCN2和HCN4蛋白表达情况。结果表明：电针心经原穴“神门”，能够显著改善 AMI模型大鼠的心律失常状态，保护心肌损伤，具有持续性的后效应，与电针肺经相比具有较明显的相对特异性；单胺类和胆碱类递质参与了电针对AMI致心律失常和心肌损伤的保护作用，但不同的递质发挥的作用不同。在心肌组织和血清中，5-HT、DA和ACh均表现出对AMI模型的反转效应，但NE没有明显的作用；而且电针心经与肺经比较具有相对特异性差异；HCN通道蛋白参与了电针对AMI致心律失常和心肌损伤的保护作用，不同时程的电针效应有所不同，电针3d和电针7d对损伤心肌的保护作用最明显；不同时程电针心经“神门”对AMI模型大鼠心肌组织的DA含量影响较小，但对DA的D1受体表达较为显著，电针2-3天表达量最多；不同时程电针对AMI血清内环境影响较为明显，能够较为显著地影响H9C2细胞株的HCN2和HCN4蛋白表达，表明“电针血清”可以作为干预条件进行动物组织原代细胞的相关实验研究，同时也为临床规范电针疗程提供实验支持。