Prmt5在鱼类胚胎和生殖细胞发育中的作用机理研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号:
    31272645
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    80.0万
  • 负责人:
  • 依托单位:
  • 学科分类:
    C1903.水产生物繁殖与发育
  • 结题年份:
    2016
  • 批准年份:
    2012
  • 项目状态:
    已结题
  • 起止时间:
    2013-01-01 至2016-12-31

项目摘要

Prmt5, a protein arginine methyltransferase, plays important roles in multi bioproccesses such as RNA splicing, myogenesis, cell apoptosis, germ cell development and stem cell maintenance in mammals. However, few studies concern about the functions of Prmt5 in embryonic and germ cell development of fish. We will study the post-translational modification of proteins with symmetrical dimethylated arginines (sDMA) in the embryos and gonads of medaka by using proteomic analysis, the roles of Prmt5 in embryonic and germ cell development including cell proliferation and apoptosis by means of gene knockdown and overexpression, the effects of Prmt5 on gene expression in embryos by transcriptomic analysis, and the proteins that interact with Prmt5 by using yeast two hybridization, bimolecular fluorescence complementation and co-immunoprecipitation. The genes, which are specific to germ cells or stem cells, will be studied further by using in situ hybridization and quantitative RT-PCR, etc. We will get a full and extensive understanding of the roles and mechanisms of Prmt5 on embryonic and germ cell development in fish and the regulation of post-translational methylation on fish development after finishing this project. The results obtained from this study will be used as references for reproduction and cultivation and stem cell culture in aquatic fishes.
Prmt5是蛋白质精氨酸甲基化酶,在多种生物功能如RNA剪切、肌肉发生、细胞凋亡、哺乳动物干细胞维持和生殖细胞发生等过程中发挥重要作用。鱼类Prmt5在其胚胎及生殖细胞发育中的功能研究鲜有报道。本研究以青鳉为模式对象,应用蛋白组学方法,研究胚胎发育关键阶段和性腺的蛋白质甲基化状况。通过基因敲降和过量表达,观察Prmt5对胚胎发育、生殖细胞发生的作用以及Prmt5对细胞增殖和凋亡的影响,并通过转录组分析了解Prmt5对胚胎基因表达的影响。采用酵母双杂交和BiFC、免疫共沉淀等方法研究与Prmt5相互作用的其它蛋白质。对一些生殖细胞和干细胞特异基因通过原位杂交、定量RT-PCR等方法做进一步研究。项目的完成将对Prmt5在鱼类胚胎发育和生殖细胞发生的作用有比较全面而深入的了解,更深刻地了解甲基化在鱼类发育中的调控作用。本项目的研究成果对水产养殖鱼类生殖繁育甚至干细胞培育都具有参考作用。

结项摘要

本项目的研究目标是以青鳉为模式动物,了解Prmt5在鱼类胚胎发育、生殖细胞形成过程中的作用。本项目基本按照既定研究计划执行。采用TALEN基因编辑技术,获得Prmt5及Mep50基因突变体,正在进行纯合子筛选和后续的研究工作。采用酵母双杂交技术,本项目获得了与Prmt5相互作用的蛋白质,并对部分蛋白如Prdm1、Mep50等在青鳉发育和免疫等方面的作用进行了研究。Mep50 是Prmt5的伴侣蛋白,其表达模式和Prmt5一致。研究发现了Mep50与Prmt5相互作用的关键位点,进行了Prmt5和Mep50的体外表达。Prdm1有两个同源基因Prdm1a和Prdm1b,它们都能与Prmt5相互作用,在多种组织中有表达。Prmd1a在青鳉和斑马鱼先天免疫中也有作用。进行了雄性生殖干细胞相关基因Plzf以及与Prdm1相互调控的Bcl6的研究。而原定的蛋白组学和转录组学分析尚待后续研究。本项目已经发表相关研究论文7篇(包括5篇SCI论文),参加国内和国际学术会议多次,培养毕业硕士研究生5名。经费约有17万元结余,将用于后续研究。

项目成果

期刊论文数量(7)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(2)
专利数量(0)
Expression of plzfa in embryo and adult of medaka Oryzias latipes
plzfa在青鳉胚胎和成虫中的表达
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
    Journal of Fish Biology
  • 影响因子:
    2
  • 作者:
    Qi, C.;Zhong, X. P.;Zhou, Q. C.;Wang, J. L.
  • 通讯作者:
    Wang, J. L.
斑马鱼胚胎发育过程中TGF-β1基因的表达特征分析
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2014
  • 期刊:
    水生生物学报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    徐功玉;赵浩斌;周青春;钟雪萍
  • 通讯作者:
    钟雪萍
Germ cell-specific expression of dead end (dnd) in rare minnow (Gobiocypris rarus)
稀有米诺鱼 (Gobiocypris rarus) 生殖细胞特异性表达死端 (dnd)
  • DOI:
    10.1007/s10695-015-0029-x
  • 发表时间:
    2015-04-01
  • 期刊:
    FISH PHYSIOLOGY AND BIOCHEMISTRY
  • 影响因子:
    2.9
  • 作者:
    Duan, Jundan;Feng, Gongqing;Zhao, Haobin
  • 通讯作者:
    Zhao, Haobin
斑马鱼nrf基因时空表达分析及其在调控胰外分泌酶原基因表达中的作用研究
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2016
  • 期刊:
    水生生物学报
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    钟雪萍;赵浩斌;陈新华;周青春
  • 通讯作者:
    周青春
Identification and expression profiles of prdm1 in medaka Oryzias latipes
青鳉prdm1的鉴定及表达谱
  • DOI:
    10.1007/s11033-013-2899-2
  • 发表时间:
    2013-12
  • 期刊:
    Molecular Biology Reports
  • 影响因子:
    2.8
  • 作者:
    Yoshitaka Nagahama;Xueping Zhong;Qingchun Zhou;Yaping Wang
  • 通讯作者:
    Yaping Wang

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其他文献

荧光定量PCR测定木糖醇亚硒酸酯诱导人肝癌细胞系SMMC-7221细胞凋亡的机制研究(英文)
  • DOI:
    --
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
    华中师范大学学报(自然科学版)
  • 影响因子:
    --
  • 作者:
    沈浩;曹郁;雷明;ZAHID Kashif Rafiq;吴雪;刘珂;刘艳丽;刘金林;杨继红;赵浩斌;祁超
  • 通讯作者:
    祁超
母型-合子型过渡的研究进展
  • DOI:
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  • 发表时间:
    --
  • 期刊:
    细胞生物学杂志, 28(1):42-46,2006
  • 影响因子:
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  • 作者:
    陈静;王玉凤*;赵浩斌
  • 通讯作者:
    赵浩斌

其他文献

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赵浩斌的其他基金

Prdm1与Prmt5、Mep50的相互作用及其在鱼类先天免疫中的作用
  • 批准号:
    31672284
  • 批准年份:
    2016
  • 资助金额:
    62.0 万元
  • 项目类别:
    面上项目
Prmt5在青鳉生殖细胞发生及其干细胞维持中的作用机制研究
  • 批准号:
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  • 批准年份:
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  • 资助金额:
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  • 项目类别:
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课题项目:调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要:

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题,其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子,其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而,TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用,影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法,探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用,为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义,并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路:

科学问题:TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达?
前期研究:已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应,但其具体机制尚不明确。
研究创新点:本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线:包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术:TRIM2与病毒RNA的相互作用分析,IFN-β启动子活性检测。
实验模型:使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
      
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