Y-27632对慢性移植肾失功的治疗作用及分子机制：依赖于调节细胞紧密连接/VHL通路拮抗EMT的新途径

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基本信息

  • 批准号：
    81000311
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    20.0万
  • 负责人：
    刘敏
  • 依托单位：
    同济大学
  • 学科分类：
    H0507.肾移植
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

慢性移植肾失功是多年来的研究重点和难点。本研究旨在运用Rho特异性抑制剂Y-27632，从调节细胞紧密连接(TJ)相关蛋白表达入手，从动物、细胞水平寻找减轻肾小管上皮细胞骨架损伤，治疗慢性移植肾失功的新方法。构建大鼠CAD模型，于不同阶段取材，采用激光微分离、RT-PCR、Western和共聚焦显微镜等方法观察、检测肾小管上皮细胞TJ相关跨膜蛋白表达变化和Y-27632的影响；其次，培养大鼠TEC细胞，予TGF-b刺激和Y-27632拮抗，从mRNA和蛋白水平观察TEC上相关TJ蛋白表达情况；第三，以VHL siRNA转染人肾小管上皮细胞，同时叠加TGF-b干预，并用Y-27632拮抗VHL表达下调和TGF-b刺激诱导的协同作用，检测细胞骨架蛋白的表达变化，观察Y-27632对小管上皮细胞TJ的保护作用。

结项摘要

慢性移植肾失功是多年来的研究重点和难点。项目按原预期目标进行：运用Rho特异性抑制剂Y-27632，从调节细胞紧密连接(TJ)相关蛋白表达入手，从动物、细胞水平研究Rho抑制剂对肾脏病变的保护作用和机理。.本项目按原计划进行，进展顺利。从实验室构建大鼠CAD模型，于不同阶段取材，采用激光微分离、RT-PCR、Western和共聚焦显微镜等方法观察、检测肾小管上皮细胞TJ相关跨膜蛋白表达变化和Y-27632的影响；在体外培养肾小管上皮细胞（TEC细胞），予TGF-b刺激和Y-27632拮抗，从mRNA和蛋白水平观察TEC上相关TJ蛋白表达情况；以VHL siRNA转染人肾小管上皮细胞，同时叠加TGF-b干预，并用Y-27632拮抗VHL表达下调和TGF-b刺激诱导的协同作用，检测细胞骨架蛋白的表达变化，观察Y-27632对小管上皮细胞TJ的保护作用。.结果进一步证明，Y-27632可有效的抑制肾小管上皮细胞发生的EMT改变，可望成为抗肾脏纤维化的药物，值得进一步研究。

项目成果

期刊论文数量（13）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
CO_2气腹对人肾癌裸鼠原位移植瘤中HIF-1α、VEGF表达的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    同济大学学报(医学版)
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    陈远卓;郑军华;刘敏;张海民;王光春;许云飞
  • 通讯作者：
    许云飞
Novel evidence demonstrates that epithelial-mesenchymal transition contributes to nephrolithiasis-induced renal fibrosis
新证据表明上皮间质转化有助于肾结石引起的肾纤维化
  • DOI：
    10.1016/j.jss.2012.07.066
  • 发表时间：
    2013-06-01
  • 期刊：
    JOURNAL OF SURGICAL RESEARCH
  • 影响因子：
    2.2
  • 作者：
    Liu, Min;Liu, Yong-Zhen;Zheng, Jun-Hua
  • 通讯作者：
    Zheng, Jun-Hua
High Expression of Notch ligand Jagged2 is associated with the metastasis and recurrence in urothelial carcinoma of bladder
Notch配体Jagged2的高表达与膀胱尿路上皮癌的转移和复发有关
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    Int J Clin Exp Pathol
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    刘敏
  • 通讯作者：
    刘敏
Protective Effects of Rosuvastatin in Experimental Renal Failure Rats via Improved Endothelial Function
瑞舒伐他汀通过改善内皮功能对实验性肾衰竭大鼠的保护作用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    Biological Research for Nursing
  • 影响因子：
    2.5
  • 作者：
    Liu, Yong-zhen;Liu, Min;Zhang, Yi-ming;Kang, Li;Chen, Ping-zhi;Wang, Ze-feng;Feng, Yuan;Zheng, Jun-hua
  • 通讯作者：
    Zheng, Jun-hua
黄蜀葵花总黄酮对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2010
  • 期刊：
    中国中西医结合肾病杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    冯媛;刘敏;张苗;何劲松
  • 通讯作者：
    何劲松

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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