靶向性阻断醛固酮诱导的巨噬细胞ATP自分泌/旁分泌途径干预石英诱导的肺纤维化

结题报告

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
81102088
项目类别：
青年科学基金项目
资助金额：
22.0万
负责人：
姬文婕
依托单位：
中国人民武装警察部队后勤学院
学科分类：
H3002.职业卫生与职业病学
结题年份：
2014
批准年份：
2011
项目状态：
已结题
起止时间：
2012-01-01 至2014-12-31

项目参与者：
张莉；徐忠伟；周欣；李学任；胡道川；陈雪芬；
关键词：
矽肺醛固酮纳米载体单核巨噬细胞盐皮质激素受体

项目摘要

肺泡巨噬细胞表型转化的调节是干预石英诱导肺纤维化病理进展的可行途径。醛固酮通过活化巨噬细胞盐皮质激素受体（MR）可引发促炎症表型转化（M1），并介导ATP释放至胞外，以自分泌/旁分泌的形式通过P2X7受体活化炎症复合体。故拮抗醛固酮-MR通路，则有可能阻断巨噬细胞的M1表型偏移，从而对石英诱导的肺纤维化产生治疗作用。本项目通过药剂学、细胞学和动物干预研究，力图明确：(1)采用脂质体靶向性阻断肺泡巨噬细胞MR后对石英诱导的巨噬细胞表型转化的影响及对肺纤维化的治疗效果；(2)降低肺组织细胞外ATP含量，能否通过阻断P2X7受体通路继而降低肺部炎症反应，产生治疗效果？(3)同时阻断巨噬细胞MR通路和P2X7受体通路，能否对巨噬细胞表型偏移和肺部炎症反应产生治疗协同作用？(4)醛固酮-MR通路和ATP-P2X7通路在巨噬细胞表型偏移中的联系。本项目有助于揭示矽肺发生的分子机制并具有潜在应用价值。

结项摘要

肺泡巨噬细胞表型转化的调节是干预石英诱导肺纤维化病理进展的可行途径。醛固酮通过活化巨噬细胞盐皮质激素受体（MR）可引发促炎症表型转化（M1），并介导ATP 释放至胞外，以自分泌/旁分泌的形式通过P2X7 受体活化炎症复合体。本研究旨在探讨醛固酮-MR 通路和ATP-P2X7 通路在巨噬细胞表型偏移中的联系，及其以此为靶点的干预措施对石英诱导的急慢性肺损伤的影响。我们首先采用脂质体制备技术制备了具有单核巨噬细胞吞噬系统靶向性的螺内酯脂质体。采用经口咽气管滴注法制备小鼠矽肺模型，分别观察了螺内酯脂质体、ATP水解酶对单核巨噬细胞表型偏移以及对急慢性肺损伤的干预作用。结果表明螺内酯脂质体和ATP水解酶均能减轻石英引起的肺部炎症反应，降低胶原沉积程度，降低矽肺组小鼠早期Ly6Chi 的比例，同时亦改善了肺泡巨噬细胞和肺间质巨噬细胞的M2型偏移。研究还表明螺内酯脂质体可以降低局部ATP的含量，表明螺内酯可能通过ATP旁分泌途径调节巨噬细胞表型的偏移。随后我们构建了MR和P2X7受体敲除的RAW264.7细胞株，采用系列的干预措施，结果表明盐皮质激素受体阻断剂螺内酯和P2X7受体阻断剂A438均可以明显减少RAW264.7的M1型偏移，降低胞内外的ATP水平，利用MR和P2X7受体低表达细胞株观察到了相同的结果，但是同时阻断盐皮质激素受体通路和ATP-P2X7通路的预实验结果表明虽然遏制巨噬细胞M1表型偏移作用较单独作用有增加的趋势，但不明显。